鸡血藤总黄酮乙酸乙酯部位对大肠杆菌脂多糖(LPS)刺激RAW264.7免疫细胞氧化应激的调节作用

通过观察鸡血藤总黄酮乙酸乙酯部位(FEA)预处理和后处理对大肠杆菌脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞所致氧化应激的影响,探讨其抗应激活性。试验将细胞分为空白对照组、LPS刺激组、LPS+阳性药物组(维生素C)、LPS+不同浓度FEA组(25、50、100、200μg/m L)。试验1的细胞先用药物预处理12 h,再用LPS进行刺激;试验2则先用LPS刺激2 h后,再用药物进行处理。分别采用Griess法和荧光探针法检测NO分泌和活性氧(ROS)水平。结果发现,FEA预处理和后处理均能显著抑制LPS刺激引起的NO和ROS水平的升高(P<0.05),且后处理效果更明显。因此,FEA具有良好的抗氧化应激活性,且作为治疗药物比作为预防药物效果更佳。

狐尾藻乙酸乙酯萃取部位总黄酮含量测定与抗氧化活性研究

目的:以浙江省采集的狐尾藻作为研究对象,将狐尾藻植物乙醇提取的浸膏用乙酸乙酯进行萃取,对所得乙酸乙酯部位进行抗氧化活性测定。为狐尾藻的开发利用提供科学依据。方法:通过比色法对狐尾藻乙酸乙酯部位总黄酮总酚酸含量进行测定,采用DPPH法、羟自由基法测定狐尾藻乙酸乙酯部位的抗氧化活性。结果:狐尾藻乙酸乙酯部位含有黄酮类化合物,且样品溶液具有较好的抗氧化活性,在一定浓度范围内,样品浓度越高,其抗氧化活性越强。结论:该研究结果表明狐尾藻中含有黄酮类化合物,且在一定范围内其抗氧化活性比Trolox强。

丁香茄叶乙酸乙酯部位化学成分及抗炎活性研究

基于脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞(RAW 264.7)生物模型研究丁香茄Calonyction muricatum叶乙酸乙酯部位的抗炎活性成分。在体外活性追踪下,采用硅胶、MCI、ODS、HW-40C柱色谱及半制备液相等方法对乙酸乙酯活性部位进行分离纯化,根据理化性质结合现代波谱技术鉴定化合物结构。从丁香茄叶乙酸乙酯部位分离得到15个化合物,分别为:12-oxo-phytodienoic acid(1)、(9 Z,12 Z,14 E,16 R)-16-hydroxyoctadeca-9,12,14-trienoic acid(2)、(9 Z,12 S,13 E,15 Z)-12-hydroxyoctadeca-9,13,15-trienoic acid methyl ester(3)、(9 Z,11 E,13 R,15 Z)-13-hydroxyoctadeca-9,11,15-trienoic acid(4)、(9 R,10 E,12 Z)-9-hydroxyoctadeca-10,12-dienoic acid(5)、(9 S,10 E,12 Z)-9-hydroxyoctadeca-10,12-dienoic acid(6)、1-十二烷醇(7)、山柰酚-3-O-半乳糖苷(8)、6-methoxykaempferol-3-O-galactoside(9)、紫云英苷(10)、6-methoxykaempferol-3-O-glucoside(11)、(6 S,9 R)-长寿花糖苷(12)、咖啡酸乙酯(13)、麦芽酚(14)、hydroxydihydrobovolide(15)。化合物1~12、14、15为首次从月光花属植物中分离得到。单体化合物抗炎活性筛选结果表明,化合物1、3、4、5均具有一定的抗炎活性,其中1和5的抑制NO作用显著,IC_(50)值分别为1.17±0.51、0.97±0.89μM。

滇桂艾纳香乙酸乙酯部位化学成分研究

采用反复硅胶柱色谱及重结晶方法从滇桂艾纳香Blumea riparia(Bl.)DC.乙酸乙酯部位分离得到11个化合物,通过理化方法和波谱数据对化合物的结构进行鉴定,分别为:木栓酮(1)、木栓醇(2)、β-谷甾醇(3)、5-羟基-7,3′,4′-三甲氧基黄酮(4)、山奈酚(5)、木犀草素(6)、邻苯二甲酸二丁酯(7)、原儿茶醛(8)、原儿茶酸(9)、咖啡酸(10)、水杨酸(11)。其中,化合物1、2、4、7首次从该植物中分离得到。

槐角乙酸乙酯部位的化学成分研究

为研究槐角乙酸乙酯部位的化学成分,采用槐角粗粉70%乙醇提取物,正己烷、乙酸乙酯、正丁醇分步萃取,利用硅胶柱、Sephadex LH-20凝胶柱、半制备高效液相等色谱技术进行分离纯化,根据化合物的理化性质、波谱数据并结合文献报道鉴定化学物的结构。结果可知,从槐角乙酸乙酯部位中分离得到18个化合物,分别鉴定为鹰嘴豆芽素A(1)、红车轴草素(2)、樱黄素(3)、木豆素(4)、木樨草素(5)、香叶木素(6)、3′-甲基香豌豆酚(7)、2′-羟基鹰嘴豆芽素A(8)、杨梅素(9)、柚皮素(10)、芫花素(11)、芹菜素(12)、杨梅苷(13)、白杨素(14)、杨属苷(15)、异槲皮苷(16)、黄芩苷(17)、金丝桃苷(18)。所有化合物均为首次从槐角中分离得到,其中化合物7、8、9、11、15、18为首次从槐属植物中分离得到。

甘蔗叶乙酸乙酯部位化学成分研究

甘蔗是糖类加工产业主要的经济作物,甘蔗叶作为广西特色瑶药,在广西民间及瑶族地区具有悠久的药用历史。该课题组前期发现甘蔗叶乙酸乙酯部位具有抗肿瘤活性,为进一步明确其乙酸乙酯部位的化学成分,该文采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、制备型高效液相色谱等多种分离纯化的方法对甘蔗叶乙酸乙酯部位进行研究。结果表明:从甘蔗叶乙酸乙酯萃取部位分离且鉴定了20个化合物,分别为原儿茶醛(1)、3,4-二羟基-苯甲酸甲酯(2)、3,4-二羟基苯甲酸(3)、3-羟基-4-甲氧基苯甲酸(4)、对羟基苯甲酸(5)、对羟基苯甲醛(6)、对羟基肉桂酸(7)、丁香酸(8)、3,5-二甲氧基对苯二酚(9)、1-hydroxy-benzoyl-4-O-α-L-rhamnopyranoside(10)、对羟基苯甲酸-β-D-吡喃葡萄糖酯苷(11)、槲皮素(12)、小麦黄素(13)、异柽柳素(14)、异鼠李素(15)、5,3′,4′-三羟基-7-甲氧基二氢黄酮(16)、7-O-甲基圣草酚(17)、[(E)-4-(1 S,3 R,4 R)-1-hydroxy-4,5,5-trimethyl-7-oxabicyclo[4.1.0]heptan-1-yl]but-1-en-3-o-ne(18)、blumenol A(19)和胸腺嘧啶脱氧核苷(20)。其中,化合物1-4、6、9-11、13-16、18和20均为首次从甘蔗叶中分离得到。该研究结果为日后甘蔗叶乙酸乙酯部分的进一步开发提供了依据.

鸡血藤木质部、韧皮部黄酮类成分比较及药效成分分布规律研究

目的:建立HPLC-ESI-MS法鉴定比较鸡血藤木质部、韧皮部中黄酮类成分;建立HPLC-PDA法同时测定鸡血藤木质部、韧皮部中5种黄酮类成分(儿茶素、表儿茶素、大豆苷、芒柄花苷、芒柄花素)的含量。方法:HPLCESI-MS法采用DiamonsilC_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm),流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B),梯度洗脱,流速0.7 m L/min,柱温:25℃。离子阱质谱,负离子模式扫描。结果:从鸡血藤木质部中检测到23种黄酮类成分,韧皮部中检测到21种黄酮类成分。鸡血藤木质部中5种黄酮类成分的含量高于韧皮部。结论:木质部的药效成分含量高于韧皮部,为鸡血藤的"辨状论质"提供理论数据。

鸡血藤黄酮乙酸乙酯部位对H_2O_2诱导RAW264.7细胞氧化应激的调节作用

为了探讨鸡血藤黄酮乙酸乙酯部位(the ethyl acetate fraction of spatholobus suberectdunn flavonoid,EFSF)的抗氧化应激作用,试验采用双氧水(H_2O_2)处理RAW264.7细胞,建立氧化应激模型,EFSF处理氧化应激细胞后,利用分光光度法检测一氧化氮(NO)分泌水平和细胞内活性氧自由基(ROS)水平的变化。结果表明:200μg/m L及以下浓度的EFSF对RAW264.7细胞无毒性作用;25,50,100μg/m L的EFSF均能明显降低H_2O_2诱导氧化应激细胞的NO分泌水平及细胞内ROS的含量。说明EFSF对H_2O_2处理RAW264.7细胞引起的氧化应激损伤具有一定的保护作用。

大高良姜、红豆蔻总黄酮含量及抗氧化活性比较研究

目的:比较大高良姜、红豆蔻乙酸乙酯部位总黄酮含量及其体外抗氧化活性的差异。方法:采用紫外分光光度法,并结合DPPH·自由基体系、ABTS+·自由基体系、O_2^-·自由基体系,比较研究了大高良姜、红豆蔻乙酸乙酯部位的总黄酮含量及体外抗氧化活性。结果:大高良姜、红豆蔻乙酸乙酯部位均含有总黄酮成分,且均有抗氧化活性,其抗氧化活性大小顺序为:160μg·mL^(-1)>120μg·mL^(-1)>100μg·mL^(-1)>80μg·mL^(-1)>40μg·mL^(-1)>10μg·mL^(-1)>5μg·m^(-1)。结论:大高良姜、红豆蔻乙酸乙酯部位均含有总黄酮类成分且均有抗氧化活性。大高良姜乙酸乙酯部位的总黄酮含量低于红豆蔻乙酸乙酯部位,且大高良姜乙酸乙酯部位清除ABTS+·及O_2^-·自由基的能力强于红豆蔻乙酸乙酯部位。同时还发现其抗氧化活性的大小均与其质量浓度有关系。

鸡血藤干、鲜品黄酮部位的高效液相指纹图谱比较

目的:建立鸡血藤黄酮部位的HPLC指纹图谱,通过比较同一产地鸡血藤干、鲜品药材的指纹图谱,考察两者化学成分种类和含量上的差异。方法:采用高效液相色谱法,DiamonsilC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,检测波长280 nm,检测时间80 min。结果:分别建立了干、鲜鸡血藤黄酮部位的HPLC指纹图谱共有模式,标定了11个共有指纹峰,并指认了4个共有峰,发现干、鲜品在成分和含量上均有差异。结论:该方法简便、准确,具有良好的重复性,可为鸡血藤化学成分深入研究及其加工利用提供科学依据。

西藏猫乳化学成分研究

目的:研究西藏猫乳Rhamnella gilgitica Mansf.et Melch.心材的化学成分。方法:采用正反相硅胶柱层析、Sephadex LH⁃20柱层析、制备型高效液相等色谱分离方法对西藏猫乳的乙酸乙酯部位进行分离纯化,并结合核磁共振、质谱等波谱学方法进行结构鉴定。结果:从西藏猫乳中分离得到9个化合物,分别鉴定为:(-)⁃南烛木树脂酚(1)、儿茶素(2)、(-)⁃表儿茶素(3)、柚皮素(4)、山柰酚(5)、鼠李柠檬素(6)、芹菜素(7)、(+)⁃丁香脂素(8)、(+)⁃皮树脂醇(9)。结论:其中,化合物1~3、6~9为首次从该植物中分离得到。

延龄草不同提取部位的分光光度法质量控制研究

目的测定延龄草乙酸乙酯部位、正丁醇部位的总皂苷及总黄酮含量。方法采用香草醛-高氯酸比色法、硝酸铝-亚硝酸钠法分别测定延龄草乙酸乙酯部位和正丁醇部位的总皂苷、总黄酮的含量。结果延龄草正丁醇部位总皂苷含量达到44.6%,总黄酮含量为0.98%,延龄草乙酸乙酯部位总皂苷含量为77.4%,总黄酮含量约为5.1%。结论初步确定了延龄草不同部位中皂苷、黄酮的含量,而延龄草的乙酸乙酯部位及正丁醇部位的总皂苷含量均远大于总黄酮含量,所以延龄草发挥防病治病作用的成分多以皂苷类为主。研究为进一步研究延龄草有效成分提供指导。