鸡血藤黄酮类有效部位SSCE对人肺腺癌细胞A549细胞周期调控的分子机制

目的:探讨鸡血藤黄酮类有效部位(SSCE)对人肺癌A549细胞的周期阻滞作用及其分子机制。方法:采用CCK-8法检测SSCE对A549细胞的增殖影响;流式细胞仪检测细胞周期;RT-PCR法检测CDK1、2、4、6mRNA表达;Western-blot法测定CDK1、2、4、6蛋白表达。结果:SSCE抑制A549细胞的增殖,SSCE引起A549细胞G1/S期和/或G2/M期阻滞。160mg/L SSCE作用A549细胞24h后,CDK1、CDK2、CDK6mRNA表达较对照组减少(P<0.05);CDK1、CDK2、CDK6蛋白含量较对照组低(P<0.05);160mg/L SSCE作用A549细胞48h后,细胞内CDK1mRNA表达较对照组减少(P<0.05);细胞内CDK1蛋白含量较对照组低(P<0.05)。结论:SSCE通过下调CDK1mRNA转录水平及蛋白表达量引起A549细胞G2/M期阻滞;通过下调CDK2、6mRNA转录水平及蛋白表达量引起A549细胞G1期阻滞。

鸡血藤黄酮类有效部位对人肺腺癌A549细胞氧化应激的影响

目的:探讨鸡血藤黄酮类有效部位(SSCE)对人肺腺癌A549细胞的杀伤活性与氧化应激反应的相关性。方法:实验分为SSCE高、中、低剂量组和正常对照组,各组分别加入不同浓度的SSCE(正常组用培养基代替)作用人肺腺癌A549细胞24 h后,采用脂质过氧化物(MDA)、谷胱甘肽(GSH)试剂盒检测A549细胞MDA,GSH的含量;以2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)为荧光探针,用荧光酶标法和共聚焦荧光显微镜法检测活性氧(ROS);选择加入SSCE高浓度组同时加入抗氧化剂维生素C(Vit C),维生素E(Vit E),谷胱甘肽过氧化物酶(GPx),过氧化氢酶(CAT)作用细胞24 h后,采用CCK-8法检测A549细胞增殖情况及荧光酶标仪法检测ROS。结果:加入SSCE后,SSCE各组细胞MDA均含量上升(P<0.01)、高浓度组GSH含量下降(P<0.01);高、中浓度组细胞ROS含量上升(P<0.01);共聚焦显示SSCE各组均有绿色荧光,其中高、中浓度组荧光较强;加入抗氧化剂后,各组细胞抑制率均降低(P<0.05),ROS含量均下降(P<0.01)。结论:SSCE可以改变A549细胞MDA,GSH,ROS水平,其抗肿瘤作用可能是通过诱导肿瘤细胞氧化应激反应而实现的。

鸡血藤黄酮类有效部位通过CKI途径对人肺腺癌细胞A549细胞周期的影响

目的:从细胞周期蛋白激酶抑制因子(CKI)途径入手探讨鸡血藤黄酮类有效部位(SSCE)对人肺癌A549细胞的周期阻滞作用的分子机制。方法:采用RT-PCR法检测人肺腺癌A549细胞中p21、p27 mRNA表达;应用Western Blotting法测定人肺腺癌A549细胞中p21、p27蛋白表达。结果:160mg/L SSCE作用于人肺腺癌A549细胞24h后,细胞内p21 mRNA表达较对照组增加(P<0.01);p21蛋白含量较对照组高(P<0.01),而细胞内p27 mRNA表达及蛋白含量与对照组比较差异无统计学意义;160mg/L SSCE作用人肺腺癌A549细胞48h后,细胞内p21、p27 mRNA表达与对照组比较差异无统计学意义;细胞内p21、p27蛋白含量与对照组比较差异无统计学意义。结论:SSCE上调p21 mRNA转录水平及蛋白表达量是引起人肺腺癌A549细胞G2/M期细胞周期阻滞的机制之一;p21、p27对SSCE引起的人肺腺癌A549细胞G0/G1期阻滞无直接作用。

夜关门治疗慢性气管炎有效成分的研究(四)——有效部位707的分离与鉴定

夜关门(Lespedeza cuneata G.Don.)的有效部位707治疗慢性气管炎有较好的止咳、祛痰和平喘作用。经用溶媒法和层析法分得了七个结晶:山萘酚、槲皮素、牡荆素、荭草素和水杨酸,还有两个为结构尚未完全确定的黄酮类化合物。牡荆素和荭草素分别为芹菜素和木犀草素的8-C-葡萄糖甙,二者结构近似不易分离。以混合结晶为原料经碘氢酸水解证明了甙元部分,三氯化铁氧化裂解证明了糖的部分,最后用单体结晶经红外、紫外、核磁共振、质谱确证了它们的结构。牡荆素和荭草素为在治疗慢性气管炎植物药中首次分得的黄酮碳糖甙类,其治疗作用有待药理和临床的研究。

海南产仙人掌的抗糖尿病的化学成分研究

本研究对海南产的仙人掌的抗糖尿病的化学成分进行研究。通过降糖实验发现其有效部位。对有效部位的化学成分进行研究 ,从中分离鉴定了 4 7个化合物 ,其中 9个为新的化合物 ,2 8个为本属植物中首次分离得到的化合物 ,8个为本种植物中首次分离得到的化合物。通过体外抗自由基作用、抗NO释放活性、醛糖还原酶抑制活性实验 。