乙肝一号对鸭乙肝模型外周血DHBsAG表达的影响

以酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）为检测手段，ＤＨＢｓＡＧ为评价指标，观察了乙肝一号对鸭乙肝模型外周血ＤＨＢｓＡＧ表达的影响。实验结果表明，乙肝一号能明显抑制ＤＨＢｓＡＧ的表达，转阴率达６０％，并对其作用机理进行了探讨。

聚合酶链反应技术检测后天感染鸭乙型肝炎病毒模型中共价闭环状DNA表达

目的:聚合酶链反应方法检测后天感染鸭乙型肝炎病毒模型中共价闭环状DNA的表达。方法:实验于2006-06/2007-01在解放军总医院老年医学研究所完成。1日龄北京雏鸭6只经腿静脉注射上海麻鸭DHBV阳性血清(中国医学科学院提供)0.2mL/只,感染7d后处死动物取血分离血清并取肝组织,同时取同日龄正常鸭6只肝组织作为对照。聚合酶链反应技术检测肝脏、血清中鸭乙型肝炎病毒DNA及共价闭环状DNA的表达。结果:①血清斑点杂交显示模型制备成功,平均病毒吸光度值为0.62±0.12。②琼脂糖凝胶电泳显示,模型肝脏、血清中DHBVDNA均高表达,而共价闭环状DNA仅在模型肝脏表达,正常鸭DNA与共价闭环状DNA均不表达。结论:后天感染鸭乙型肝炎病毒模型中共价闭环状DNA高表达,可作为临床乙肝药物筛选模型。

利用鸭乙型肝炎病毒感染模型评价血液成分中病毒的灭活效果

目的利用鸭乙型肝炎病毒(DHBV)感染动物模型,评价亚甲蓝光化学病毒灭活方法对血液成分中DNA病毒的灭活效果。方法将超离纯化的DHBV分别加入人血浆或人红细胞,经亚甲蓝光化学灭活病毒,将含不同基因组拷贝数DHBV的血浆成分经静脉感染1 d龄雏鸭。采用放射性核素核酸杂交法对血清中DHBV DNA进行检测,计算病毒灭活处理前、后人血浆及人红细胞中DHBV的半数感染计量(ID50)。结果结果显示加入DHBV的血浆在未经灭活处理前对1 d龄雏鸭的ID50值为103.33,而经病毒灭活处理后ID50值为1010拷贝,灭活处理可使病毒感染性滴度下降达6个Log;加入DHBV的红细胞灭活前ID50值为103.35,经灭活处理后ID50值为108.35拷贝,灭活处理使病毒感染性滴度下降5个Log。结论利用DHBV感染动物模型,可以检测到少量病毒在自然感染宿主体内的感染性,可用于评判血液成分中病毒灭活方法的效果,亚甲蓝光化学处理对血浆中DNA病毒的灭活效果较好于对红细胞中DNA病毒的灭活作用。

鸭乙型肝炎动物模型在药学领域的应用进展

鸭乙型肝炎病毒的基因组、复制方式和发病机制与人乙型肝炎病毒相似,且鸭乙肝病毒的天然宿主容易获得、价格低廉、感染成功率高,因此鸭乙型肝炎动物模型已被广泛应用于药物筛选、药理学和病理学研究。在应用于药物筛选时,该模型容易获得,感染成功率高且具有良好的稳定性。在药理学研究中,该模型能够持续维持高水平的病毒DNA复制,并且能够出现明显的肝脏损伤表型,可以反映不同机制药物的药理药效作用。而在病理机制研究中,该模型则具有完整的病毒生命周期,且在感染动物肝脏细胞中可检测到cccDNA,可以帮助科研人员更好的研究人乙型肝炎病毒致病机制。本文对鸭乙型肝炎动物模型在药物筛选、药理和病理研究中的应用进行综述,并对其应用前景进行展望。

荔枝核总黄酮的抗鸭乙型肝炎病毒作用

目的:研究荔枝核总黄酮(TFL)抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用.方法:采用桂林先天感染DHBV的麻鸭为动物模型,荔枝核总黄酮灌胃给药,2g/(kg·d)与1g/(kg·d),共15d,斑点杂交法观察用药前与用药后(1、5、10、15d)及停药后5d血清中DHBVDNA表达,HE染色观察肝脏组织病理学变化.结果:TFL2g/(kg·d)于用药后15d血清DHBVDNA水平为0.74±0.42,与生理盐水对照组1.64±0.68比较,明显降低(vs对照组,P<0.05(0/6),病理检查发现TFL大剂量组实验鸭肝细胞未发现明显的点灶坏死(0/6),与生理盐水对照组(4/6)比较有显著性差异(P<0.05).结论:TFL有抑制乙肝病毒的作用,并具有明显的抗炎、保肝作用.

扇贝多糖抗鸭乙型肝炎病毒作用

目的研究扇贝多糖抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用。方法选1日龄北京鸭,人工感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV),感染后第7d,阳性鸭随机分为模型组、拉米夫定阳性对照组(50mg.kg-1)和扇贝多糖(75、150、300mg.kg-1)3个剂量组,均连续灌胃给药10d,每日2次。分别于给药前、给药5d、10d及停药后3d取血清,应用斑点杂交法检测血清中DHBV-DNA水平。结果扇贝多糖150、300mg.kg-1剂量组于用药后5d、10d,与给药前(T0)比较,血清DHBV-DNA水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论扇贝多糖体内有抑制DHBV的作用。

新药肝龙胶囊对雏鸭体内鸭乙型肝炎病毒的抑制效果

目的:研究新药肝龙胶囊对鸭乙型肝炎病毒的体内抗病毒作用。方法:以鸭乙型肝炎病毒(DHBV)静脉注射感染雏鸭为模型,于感染第7天后分组灌喂肝龙(GL)胶囊浸膏0.5、1.5、3.0g.kg-1.d-1及生理盐水(对照组),阳性对照组腹腔注射无环鸟苷(0.4g.kg-1.d-1)或磷羧基甲酸钠(0.5g.kg-1.d-1)。给药每天2次,连续10d。分别于给药前、给药后第5天、第10天和停药后第3天取血清,采用斑点杂交方法检测不同时间鸭血清DHBV-DNA,观察其动态变化,以病毒抑制率为疗效指标。结果:三次重复的结果表明,与给予生理盐水的病毒对照组比较,肝龙的三个不同剂量组均有不同程度的疗效,且不同剂量组之间有一定的量效关系,其中GL3.0g.kg-1.d-1组疗效明显(P<0.01),与阳性对照组无环鸟苷或磷羧基甲酸钠组的疗效无显著性差异,而且作用持续时间较长。结论:肝龙(GL)胶囊可抑制DHBV感染雏鸭体内DHBV-DNA的复制。

广西藤茶提取物TTF抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

目的观察从广西藤茶中提取出的一有效部位TTF抗鸭乙型肝炎病毒的作用。方法选1日龄北京雏鸭，人工感染鸭乙型肝炎病毒（DHBV）动物模型，应用斑点杂交法观察TTF对鸭血清鸭乙型肝炎病毒DNA（DHBV—DNA）的影响。结果DHBV感染鸭在感染后第7天口服TTF药物治疗，75—150mg,／kg组2次／d，10d对鸭血清DHBV—DNA水平有一定的抑制效果；300mg／kg组，对感染鸭血清DHBV—DNA水平的抑制作用显著，停药3d未见明显的反跳现象。结论TTF可明显抑制DHBV—DNA复制，提示TTF有抗HBV的作用。

复方鬼辣椒根液对鸭乙型肝炎治疗作用的研究

目的研究复方鬼辣椒根口服液(复辣液)对幼年感染雏鸭病毒性乙型肝炎(DHBV)的治疗作用。方法取1日龄广西麻鸭经鸭腿胫静脉注射0.4 ml/只人体“大三阳”乙型病毒性肝炎血清,第2天重复注射一次,饲养15 d,取血1 ml检验乙肝定性5项。将感染的鸭分4组,即3个治疗组(拉米夫定组、复辣液大剂量组、复辣液小剂量组)和1个模型对照组,每组12只,均灌胃给药,用药10 d,取血检乙肝5项定性,观察各组疗效。结果模型对照组12只无效,拉米夫定组7只有效,复辣液大小剂量均5只有效,拉米夫定组与模型对照组比较,P<0.01,复辣液大小、剂量组与模型对照组疗效比较,P均<0.05,均具显著性意义。结论复辣液对鸭乙型病毒性肝炎有一定疗效。

原卟啉二钠的抗鸭乙型肝炎病毒作用

目的:研究原卟啉二钠(PPN)抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用。方法:采用先天感染DHBV的龙岩麻鸭为动物模型,分设模型对照组、拉米呋啶组和PPN组,各组按20 mg.kg-1.d-1灌胃给药10 d,斑点杂交法观察用药前、用药5 d、10 d及停药后3 d血清中DHBV DNA表达,HE染色观察肝脏组织病理学变化。结果:PPN组于用药后5 d1、0 d,血清DHBV DNA水平分别为1.36±0.261、.05±0.28,与模型对照组2.04±0.05、1.90±0.31比较明显降低(T5P<0.05、T10P<0.01),病理检查发现PPN组肝细胞点状坏死明显减轻,与模型对照组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:PPN有抑制DHBV DNA的作用,并具有明显的抗炎、保肝作用。

海珠益肝胶囊抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

目的 :研究海珠益肝胶囊对鸭乙型肝炎的抗病毒作用。方法 :使 1日龄北京麻鸭感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV) ,7天后用Dot EIA法筛选出DHBsAg强阳性鸭。随机分成 5组 :海珠益肝胶囊大、中、小 3个剂量组、以生理盐水灌胃的模型组和以无环鸟苷 (ACV )灌胃的对照组。每组 6只 ,各组雏鸭均灌胃 10天。用药前、用药 5天、10天及停药后 3天分别采血 ,采用斑点杂交法检测血清DHBVDNA。结果 :用海珠益肝胶囊 5天、 10天时鸭血清DHBVDNA其OD值均明显低于给药前 ,差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。与对照组相比 ,差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。结论 :海珠益肝胶囊有一定的抑制DHBVDNA复制的作用。

芒果苷在鸭体内抑制鸭乙型肝炎病毒感染的实验研究

[目的]观察芒果苷对鸭乙型肝炎病毒感染模型的抑制作用。[方法]采用1日龄北京鸭静脉注射强阳性鸭乙型肝炎病毒后,口服给予芒果苷50、100和200mg/kg 3个剂量,每日2次,连续给药10d,于给药前、给药后第5、10天以及停药后第3天采血,分离血清,采用斑点杂交方法及放射自显影方法,观察鸭血清乙肝病毒DNA(DHBV-DNA)的动态变化。[结果]芒果苷100mg/kg、200mg/kg在给药期间对DHBV-DNA有明显抑制作用;且在停药后未见明显反跳现象。[结论]提示芒果苷有良好的抑制DHBV感染作用,且停药后不易出现反跳现象。

肝康栓抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

目的:用鸭乙肝模型研究肝康栓对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的体内抗病毒作用。方法:用DHBV阳性血清感染1日龄的樱桃谷鸭,制备鸭乙型肝炎模型。随机分成5组:肝康栓大、中、小3个剂量治疗组,生理盐水模型组和阿昔洛韦(ACV)对照组,每组12只,均连续给药4周。分别于给药前,给药14天、28天,停药7天时取血清,用real-timePCR法检测鸭血清中DHBVDNA拷贝数的变化情况。结果:肝康栓大剂量组给药14天、28天及停药7天,中剂量组给药14天、28天,小剂量组给药28天,鸭血清中DHBVDNA拷贝数的对数值均较给药前降低(>2个对数级),差异有统计学意义(P<0·01)。结论:肝康栓具有有效抑制鸭体内DHBVDNA复制的作用。

四逆散体内抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

目的观察四逆散加减方醇提物体内抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用。方法采用先天感染鸭乙型肝炎病毒的广州麻鸭为动物模型,检测用药前后鸭血清DHBV-DNAOD值的变化,并以阿昔洛韦作阳性对照。结果停用后第3天,四逆散原方组鸭血清DHBV-DNAOD值明显低于用药前(P<0.05);用药后第5天和第10天,四逆散加味组鸭血清DHBV-DNAOD值明显低于用药前(P<0.05,P<0.01);用药后第10天,四逆散加味组的中位抑制率与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论四逆散原方、四逆散加味方在鸭体内有抗乙型肝炎病毒作用。

疏肝健脾祛湿中药体内抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

目的:观察由疏肝健脾袪湿中药组成的加味四逆散醇提物体内抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用。方法:采用先天感染鸭乙型肝炎病毒的广州麻鸭为动物模型,以斑点杂交法检测用药前后鸭血清DHBV-DNAOD值的变化,并以拉米夫定作阳性对照。结果:加味四逆散大剂量组用药第5天和第10天,血清DHBV-DNAOD值明显下降,与病毒对照组比较,差异有显著性(P<0.05,P<0.01),与自身用药前比较,差异有显著性(P<0.05,P<0.01);加味四逆散中剂量组在用药第5和第10天,血清DHBV-DNAOD值明显下降,与病毒对照组比较差异有显著性(P<0.05,P<0.05);与自身用药前比较,用药第10天,血清DHBV-DNAOD值明显下降,差异有显著性(P<0.05)。结论:加味四逆散大、中剂量在鸭体内有抗乙型肝炎病毒作用。

方格星虫多糖抗乙型肝炎病毒的实验研究

目的进一步探讨方格星虫多糖(SNPs)治疗乙型肝炎(乙肝)的机制。方法取50只重庆麻鸭随机分为对照组、阿昔洛韦组及SNPs大、中、小剂量组各10只,均经静脉注射HBV-DNA阳性鸭血清0.2 ml/只建立乙肝模型,7 d后分别予生理盐水、阿昔洛韦及不同剂量SNPs灌胃,均为每天2次,连续给药10 d。给药前1 d、用药5 d、用药10 d及停药后3 d各组均自鸭腿胫静脉取血分离血清,采用实时定量PCR法检测HBV-DNA复制情况,计算HBV-DNA抑制率。结果SNPs不同剂量组HBV-DNA复制均有不同程度抑制(P<0.05),且大、中剂量组与阿昔洛韦组作用相似,但小剂量组反跳现象明显。结论SNPs在体内有一定抑制HBV复制作用,此为抗乙肝药物的研制提供了新思路。

治疗乙型肝炎新药肝龙胶囊的药效学初步研究

目的观察肝龙胶囊对鸭乙型肝炎病毒的抑制效果和对实验性肝损伤的保护作用。方法(1)以鸭乙型肝炎病毒(DHBV)静脉注射感染雏鸭为模型,于感染第7天后分组灌胃肝龙(GL)胶囊浸膏0.5,1.5,3.0 g.k-g1.d-1,阳性对照组给予无环鸟苷(ACV)或磷羧基甲酸钠(PFA)。采用斑点杂交方法检测鸭血清DHBV-DNA,以病毒抑制率为疗效指标;(2)以昆明种小鼠腹腔注射CC l4肝损伤为模型,给予GL浸膏(200 mg.kg-1)。测定SGPT值,并取肝脏作病理形态学观察。结果(1)GL三个不同剂量组对DHBV均有不同程度的抑制作用,有一定的量效关系;(2)GL降低CC l4肝损伤小鼠血清SGPT值并减轻肝细胞损伤。结论肝龙胶囊可抑制雏鸭体内DHBV-DNA的复制并能保护CC l4所致的小鼠肝损伤。

邪毒致肝病血瘀证研究的几点思考

5年前,我们在采用鸭乙型肝炎模型进行抗病毒试验(国家攻关课题完成后转新药开发)时,受到启发,率先开展了鸭乙型肝炎肝纤维化模型的研究,随后又进行了应用评价。此举不仅在肝纤维化的六大类模型(化学中毒性、免疫性,营养性、瘀血性、血吸虫病、遗传基因性)之外成功地增加了一种病毒性肝纤维化模型,也顺应了“

慢性病毒性肝炎治疗的现状与未来

病毒性肝炎是一种全世界的常见病,我国属流行严重地区,各种类型病毒性肝炎严重威胁着人民的健康。西方国家以丙型肝炎最多,我国主要流行乙型肝炎。据预测,我国感染乙型肝炎病毒者有1亿人以上,由于乙型肝炎引起肝功能不正常患者约有3千万人。此外,慢性病毒性肝炎还与原发性肝癌的发生有着密切关系,绝大部分肝癌病人有慢性肝炎病史。因此。