鸭源沙门菌三价油乳剂灭活疫苗的制备及免疫效果

以江苏徐州地区主要流行的印第安纳沙门菌、阿贡纳沙门菌和鸭沙门菌3株鸭源沙门菌为研究对象,采用高密度发酵制备多价油乳剂灭活疫苗,检验疫苗性状并对疫苗免疫后雏鸭血清抗体水平的消长规律和淋巴细胞的活性进行检测,评价疫苗对雏鸭的免疫保护效果,以期制定出合理的免疫程序。结果显示,制备的疫苗为油包水剂型,物理性状稳定,无菌检测合格。雏鸭免疫抗体水平监测结果显示,单次免疫,抗体水平在免疫后3周达到高峰;多次免疫,抗体水平在免疫后5周达到高峰,7周后依然维持较高水平。E玫瑰花环试验检测T淋巴细胞数量,免疫组明显高于对照组。动物免疫试验结果显示,制备的三价油乳剂灭活疫苗可以有效抵抗强毒菌株的攻击,动物保护率达到87%以上。本研究制备的鸭源沙门菌多价油乳剂灭活疫苗性状稳定,免疫效果好,能有效抵抗强毒菌株攻击,为鸭沙门菌病的预防提供有效的防控生物制品。

鸭源阿培依姆沙门菌的生物学特性及致病性分析

为探究鸭源阿培依姆沙门菌的生物学特性及对雏鸭的致病性,本实验将本研究室前期分离到的1株阿培依姆沙门菌BJ1999分别接种至不同培养基测定菌落生长特征,接种至LB肉汤培养基测定细菌生长特性,通过生化反应试验测定其生化反应特征,结果显示,分离菌BJ1999株在Rambach培养基、XLD培养基、亮绿琼脂培养基和麦康凯琼脂培养基中均生长,且呈典型沙门菌菌落颜色和形态;在LB肉汤中生长良好;生化反应结果也符合沙门菌属细菌的特征。通过结晶紫染色法测定该分离菌生物被膜(BF)形成能力,结果显示,分离菌在LB肉汤中培养48 h和96 h的BF形成能力均极显著弱于鼠伤寒沙门菌ATCC14028株(P<0.001)。采用PCR方法检测该分离菌的毒力基因,结果显示扩增到胞内存活(msg A、spiA等)、Ⅲ型分泌系统结构和功能(invA、hilA等)、菌毛结构和功能(lpfA、lpfC)、铁代谢(sitC)等相关的毒力基因共18个。进一步选用健康雏鸭,以10^(9)cfu/只、10^(8)cfu/只皮下注射和10^(9)cfu/只口服感染该菌,评估分离菌对雏鸭的致病性。结果显示,10^(9)cfu/只和10^(8)cfu/只皮下注射雏鸭表现为精神沉郁、食欲下降,分别导致60%和30%死亡率;剖检可见病死雏鸭肝脏明显出血和白色坏死点。以10^(9)cfu/只口服感染后1 d雏鸭肝脏细菌检出率40%(2/5)、脾脏检出率100%(5/5),感染后3 d肝脏和脾脏平均载菌量分别为640 cfu/g和2140 cfu/g,感染后7 d肝脏内细菌基本被清除(1/5),脾脏平均载菌量下降至560 cfu/g。结果表明,阿培依姆沙门菌BJ1999株具有典型的沙门菌属细菌的生物学特性,并且对雏鸭具有一定致病性。国内鲜见对阿培依姆沙门菌的系统研究,尤其未见对禽源阿培依姆沙门菌的研究,本研究首次对鸭源阿培依姆沙门菌的生物学特性及致病性进行了分析,为该菌的系统性研究奠定了基础,同时丰富了沙门菌属细菌的流行病学资料。