鸭瘟病毒抗体间接ELISA检测试剂盒的研制

将鸭瘟病毒(DPV)CHv株经过鸭胚成纤维细胞增殖、反复冻融、差速离心和蔗糖密度介质离心制备纯化抗原,建立了用于检测鸭血清中抗DPV特异性IgG抗体的间接ELISA方法,并对其进行了标准化研究,确定了最佳工作条件,研制了相应的检测试剂盒并对盒内各组分的保存条件、质量控制以及试剂盒的特异性、重复性进行了研究。结果显示,4.75μg/孔的纯化DPV抗原包被反应板可获得良好的特异性和敏感性,1∶100稀释的待检血清样品反应后D405 nm值换算为抗体效价的标准直线方程为y=1.573+3.552x(r=0.953,n=40)。试剂盒在4℃保存3个月或-20℃保存10个月后各项性能都很好。应用该试剂盒对皮下注射、口服和滴鼻免疫DPV弱毒的20日龄樱桃谷鸭血液中抗DPV特异性IgG抗体效价进行了测定,皮下免疫鸭于第6 d,口服和滴鼻免疫鸭于第9 d可在血清中检测到DPV特异性抗体,且至第60 d时依然可检测到高效价抗体。证实,该试剂盒可用于鸭瘟的血清流行病学调查和鸭场免疫抗体水平的监测。

金荞麦对鸭瘟疫苗免疫效果的影响

为了研究金荞麦对鸭瘟疫苗免疫效果的影响,试验将金荞麦按照1%、2%、3%的比例混合于鸭日粮中,采用ELISA方法检测针对鸭瘟病毒的抗体效价和γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)水平,MTT法检测T淋巴细胞转化效率,综合评价金荞麦对三穗麻鸭鸭瘟疫苗体液免疫和细胞免疫效果的影响。结果表明:在饲料中添加1%、2%、3%比例的金荞麦均能促进鸭瘟病毒抗体、IFN-γ和IL-2产生,提高T淋巴细胞转化效率。说明金荞麦具有促进鸭瘟疫苗免疫效果的作用。