鸭肝宁防治雏鸭病毒性肝炎的试验研究

中药口服制剂“鸭肝宁”防治雏鸭病毒性肝炎的结果表明：在实验室攻毒试验中保护率达84%，在临床试用中保护率达85%，仅次于鸭传染性肝炎卵黄抗体的防治水平，具有临床应用价值．

鸭肝蛋白酶解产物中抗炎肽的分离鉴定及活性分析

利用等电点沉淀法提取鸭肝中的蛋白质,经碱性蛋白酶和风味蛋白酶同步水解,得到鸭肝蛋白多肽组分。水解物经凝胶渗透色谱测定分子质量分布后,采用凝胶过滤色谱与反相高效液相色谱结合的方法对潜在抗炎活性的肽逐步分离纯化。并结合液相色谱-串联质谱联用技术共鉴定筛选出10种分子质量低于1 300 Da的新肽。合成多肽在脂多糖诱导的RAW264.7细胞中验证其抗炎活性。其中,LVYPFPGPI和VIESPPEI剂量依赖性抑制炎症细胞中NO的释放,质量浓度为100μg/mL时,抑制率分别为48.24%、56.32%。而VIESPPEI在质量浓度为100μg/mL时,对TNF-α释放的抑制率达42.48%。抑制IL-6释放能力最强的是IDVSPDSPDHY,在质量浓度为25μg/mL时,抑制率达到27.04%。研究结果为鸭副产物高值化综合利用和炎症的安全治疗提供新思路。

氧化苦参碱在鸭原代肝细胞中抗鸭乙肝病毒(DHBV)作用的研究

通过建立鸭原代肝细胞-DHBV感染模型研究氧化苦参碱抗DHBV的作用。分别在DHBV感染前、感染同时以及感染后给药，利用打点杂交、Southern印迹核酸杂交和荧光定量PCR方法分别检测培养细胞上清及细胞内病毒核酸，观察氧化苦参碱在病毒感染的各个环节所起的抗病毒作用。实验结果显示：1mg／mL氧化苦参碱处理细胞后，鸭原代肝细胞培养上清及细胞内的DHBV核酸明显低于病毒感染对照组，病毒抑制率达91．6％；在病毒感染同时加药对病毒的抑制率可达98．5％；感染后持续用药能使不同培养天数的鸭肝细胞内的DHBV核酸降低60．5％～96．6％；氧化苦参碱与DHBV共孵育后，可以使病毒感染力下降69．6％。结果说明氧化苦参碱可以在DHBV感染鸭原代肝细胞的多个环节，包括病毒吸附、进入细胞及细胞内复制等方面发挥抗病毒作用。

鸭肝谷氨酸脱氢酶的纯化与酶学性质研究

目的:获得鸭肝谷氨酸脱氢酶纯品并对其酶学性质进行研究。方法:采用丙酮脱脂、重金属离子沉淀、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析和SephacrylS-200凝胶层析方法,分离纯化鸭肝谷氨酸脱氢酶,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定和酶相对分子质量测定。结果:从鸭肝中分离纯化获得电泳纯的谷氨酸脱氢酶,纯化倍数为60.93倍,酶活力回收率为11.02%,比活力达24.37U/mg。酶相对分子质量为371.41,亚基相对分子质量为61.60。推测该酶由6个相同亚基构成。该酶对NADH的Km为53.19μmol/L,最适pH值为10.0,最适反应温度为35℃。该酶在pH8.0左右较稳定;在40℃以下酶活力保持稳定。Zn2+、Li+和Cu2+对该酶具有显著的抑制作用。结论:分离纯化获得谷氨酸脱氢酶,该酶具有较高应用价值。

风味鸭肝酱的研制

以普通鸭肝为主要原料研究风味鸭肝酱的最佳工艺配方。利用香辛料和不同温度的水处理鸭肝。为达到进一步去腥减色的目的,通过单因素实验获得鸭肝、瘦猪肉、鸡肉的最佳比例;匀浆过程中冰水的添加量;以及柠檬酸和β-环糊精的添加量。最终获得风味鸭肝酱的最佳工艺配方。

超声波辅助提取鸭肝卵磷脂的工艺研究

本文以鸭肝为实验原料,以超声波辅助提取鸭肝中的卵磷脂。通过控制超声温度、超声时间、乙醇浓度、乙醇用量和超声功率来进行单因素实验,并以卵磷脂提取率为依据,对鸭肝卵磷脂的提取工艺进行响应面优化。实验结果显示,响应面优化得到鸭肝卵磷脂提取的最佳参数为:超声温度35℃,超声时间43min,乙醇浓度95%,乙醇用量17mL。验证实验鸭肝卵磷脂提取率为76.34%。在该工艺条件下鸭肝卵磷脂的提取率达到较高,可以作为工业化生产的加工条件。

响应面试验优化超声辅助碱提鸭肝蛋白工艺及其抗氧化性能

以鸭肝为原料,以Na OH溶液为提取剂,采用超声辅助提取,通过响应面分析方法优化鸭肝蛋白提取工艺条件,并比较常规碱提和超声辅助碱提鸭肝蛋白的抗氧化性能。结果显示,鸭肝蛋白的最佳提取条件为超声功率256 W、超声时间43 min、p H 11,此时鸭肝蛋白的得率达到73.1%;抗氧化实验结果表明:超声提取鸭肝蛋白清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(2,2’-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate)free radical,ABTS+·)、羟自由基IC50值分别为1.97、0.168、0.529 mg/m L,其中鸭肝蛋白对ABTS+·清除效果较强,其还原力较高;与常规碱提蛋白相比,超声辅助碱提鸭肝蛋白的抗氧化能力提高显著(P<0.05)。因此,超声辅助碱提鸭肝蛋白具有较好的抗氧化性。该研究为鸭肝的深加工提供了的一定的科学依据。

高稳定性鸭肝多肽饮品的配方优化及其抗氧化性能

以鸭肝蛋白酶解物为原料,以白砂糖、果胶为辅料制备营养丰富的动物源蛋白多肽饮品。在鸭肝多肽饮品稳定性单因素试验基础上,通过响应面试验设计对主要影响鸭肝多肽饮品稳定性的因素进行优化。结果表明,在鸭肝多肽添加量2.0%、白砂糖添加量8%、果胶添加量0.09%(均为质量分数)时饮品的稳定性最高,稳定系数高达99.1%;氨基酸组成结果表明,鸭肝多肽含有丰富的氨基酸,具有较高的营养价值;经高压灭菌后,放置30 d未检测到大肠杆菌、霉菌及致病菌;感官评价实验表明,多肽饮品均一、稳定性较好;抗氧化结果显示,鸭肝多肽饮品对和2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基清除及二价铁螯合能力的IC50值分别为0.035 mg/m L和0.101 mg/m L。以上研究表明,此多肽饮品具有较好的稳定性和抗氧化性,该研究为肉品加工副产物鸭肝的深加工和高值化开发提供了一定的参考依据。

鸭肝丁酰胆碱酯酶的纯化与酶学性质研究

目的:获得鸭肝丁酰胆碱酯酶纯品并对其酶学性质进行研究。方法:采用丙酮脱脂、酸沉淀、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose阴离子交换层析和Sephacryl S-200凝胶层析方法,分离纯化鸭肝丁酰胆碱酯酶;采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定和酶相对分子量测定。结果:从鸭肝中分离纯化获得电泳纯的丁酰胆碱酯酶,纯化倍数为156.45倍,酶活回收率为23.60%,比活达17.21U/mg。酶相对分子量为388.85kDa,亚基相对分子量为64.70kDa。推测该酶由六个相同亚基构成。该酶最大紫外吸收为278nm。酶催化碘化硫代丁酰胆碱水解的最适pH为8.0,最适温度为35℃。该酶在pH3.0～10.0区域较稳定;在40℃以下处理1h,酶活力保持稳定。Zn2+、Mn2+和Cu2+对该酶具有显著的抑制作用。以碘化丁酰硫代胆碱为底物,测定该酶的表观Km为71.15μmol/L,没有过量底物抑制现象。结论:成功分离纯化获得丁酰胆碱酯酶,该酶具有较好的酸碱耐受性。

鸭γ干扰素体外抑制鸭乙型肝炎病毒复制的实验研究

目的 在体外模型中系统研究DuIFN γ对鸭乙型肝炎病毒 (DHBV)复制的影响 ,探讨其抑制病毒复制的可能机制。方法 用重组DuIFN γ及DHBV特异抗原刺激的PBMC上清液 ,分别作用于DHBV慢性感染的原代鸭肝细胞 (PDH) ,检测PDH上清液中DHBVDNA、DHBsAg浓度和胞内病毒复制水平。结果 1U mL、1 0U mL重组DuIFN γ可以抑制培养细胞上清液中DHBVDNA和DHBsAg的分泌 ,与慢性感染对照组比较 ,P <0 .0 5。病毒复制的抑制水平 (包括细胞内DHBV总DNA、闭合环状DNA以及上清液中病毒颗粒和DHBsAg)与DuIFN γ作用呈时间、剂量依赖性 ,但DHBV特异抗原刺激的PBMC上清液无明显抑制病毒复制的作用。结论 DuIFN

中式鸭肝调味酱的研制

文章研究以鲜鸭肝和黄豆酱为主要原料生产中式鸭肝调味酱的加工工艺。经正交试验后应用模糊数学评价法得出鸭肝调味酱的最佳配方为:鲜鸭肝与黄豆酱比例为40∶60,冰屑添加量为6 kg/100 kg,复合乳化剂添加量为12 g/kg。

氧化铝柱层析纯化鸭肝卵磷脂的工艺研究

【目的】探讨氧化铝柱层析法纯化鸭肝卵磷脂的最佳工艺条件。为鸭肝卵磷脂的生产利用提供参考。【方法】以鸭肝为试验材料，考察氧化铝目数、洗脱液体积分数、洗脱液流速、上样质量分数、上样量等因素对氧化铝柱层析纯化鸭肝卵磷脂的影响，并对纯化卵磷脂进行薄层层析定性分析和气相色谱定量分析。【结果】在氧化铝目数100～200目、95％乙醇洗脱液、洗脱液流速3．5mL／min、上样质量分数0．2g/mL、上样量4．25g的柱层析纯化条件下，鸭肝卵磷脂的纯度和得率分别为90．37％和86．51％；纯化后鸭肝卵磷脂经薄层层析定性分析呈大而亮的斑点，杂质少；纯化鸭肝卵磷脂的不饱和脂肪酸含量较高，其中所含人体必需脂肪酸亚油酸、亚麻酸约占15．100％。【结论】氧化铝柱层析法是纯化鸭肝卵磷脂的有效方法。

高质量鸭肝脏组织总RNA的提取及稳定性测试

为获得高质量的鸭肝组织RNA样本,通过优化提取方案,从1 g超低温(-80℃)的冻存组织中提取RNA,以紫外分光光度计对RNA的含量进行了测定,并对其纯度进行了分析;通过琼脂糖凝胶电泳对RNA的完整性进行了检测,并对所得样本的稳定性进行了测试。结果表明:试验得到了1 528μg RNA,样品OD260/OD280=1.93,电泳得到的28 s和18 s RNA条带清晰可见,没有发生降解,样品在室温条件可保存24 h以上,在-20℃可保存8 d以上。提取的RNA质量较高。

珠子草等对原代鸭肝细胞的延长生长作用

我们在原代鸭肝细胞培养中，观察到珠子草及其亚种等提取物可以延长肝细胞生长，从而抑制纤维母细胞增生。

新型鸭肝酱的研制

以鸭肝、凤尾菇和黄油为原料,研制一种新型鸭肝酱的生产配方。通过单因素试验和正交试验确定鸭肝酱的最佳配方为鸭肝添加量40%、凤尾菇添加量25%、黄油添加量20%、大豆卵磷脂4%,以此配方制作的新型鸭肝酱质地均匀,酱体状态良好,口感细腻,有鸭肝特有香味。

酶法辅助鸭肝卵磷脂提取的工艺研究

本文以鸭肝为实验原料,用胰蛋白酶强化提取鸭肝中的卵磷脂。通过控制酶用量、酶反应时间、和酶反应温度来进行单因素实验,并以卵磷脂提取率为依据,对酶法强化鸭肝卵磷脂的提取工艺进行响应面优化。结果显示,响应面优化得到酶法强化鸭肝卵磷脂提取的最佳参数为:酶反应温度45.5℃,酶反应时间2.22 h,酶用量3090 U,鸭肝卵磷脂提取率可高达87.51%。验证试验得到鸭肝卵磷脂提取率为87.42%。验证实验显示,在该工艺条件下鸭肝卵磷脂的提取率达到较好值,可以作为工业化生产的基本加工条件。

鸭肉、鸭肝及鸭蛋中人畜共患病毒的检测与分析

目的对福建省部分地区的鸭肉、鸭肝和鸭蛋开展人畜共患病毒的检测。方法应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术对2011年3月至2012年4月间从不同采样点采集的鸭肝、鸭肉等样品开展禽流感病毒、新城疫病毒及鸭坦布苏病毒的检测。结果对所采集的529份样品检测结果表明,样品中禽流感病毒、新城疫病毒和鸭坦布苏病毒检出率分别为0%、0.76%和1.1%。结论所采集的鸭肉等样品的人畜共患病毒污染情况很轻,但农村早市等地方来源样品的阳性率明显高于其他地方,应进一步完善和健全鸭粗加工制品的食品安全质量检测工作。

纳地青霉发酵灭菌鸭肝的质构、小肽和游离氨基酸含量变化研究

运用物性分析仪、高效液相色谱仪和高速氨基酸分析仪分析纳地青霉发酵对鸭肝食用品质的变化。将纳地青霉接入高温高压灭菌锅灭菌后的鸭肝糜中,(28±1)℃前发酵4 d、4℃后发酵10 d制得发酵鸭肝产品,比较未发酵鸭肝(对照组)、发酵过程中及最终发酵鸭肝产品、质构、小肽和游离氨基酸含量的变化,并进行感官评定。结果表明:鸭肝在发酵过程中,硬度先增大后减小,弹性显著增大(P<0.05),黏着性显著增大(P<0.05);后发酵10 d的鸭肝产品中小肽显著增加(P<0.05),游离氨基酸(包括必需氨基酸和风味氨基酸)含量显著增加(P<0.05);发酵鸭肝产品感官评定分值显著高于对照组(P<0.05)。由此可见,灭菌鸭肝经纳地青霉发酵后可产生适于食用的特性,这为开发新型发酵肉制品提供了一种新思路。

蒸煮对不同品质鸭肥肝营养特性及脂肪酸组成的影响

研究3种不同品质的鸭肥肝在蒸煮后常规养分、脂肪酸组成及脂质过氧化的变化。结果表明:1)熟化增加了鸭肥肝中C12:0、总脂和丙二醛(MDA)的含量,降低了水分、蛋白的含量,对鸭肥肝中糖原的含量无影响;2)鱼油组肥肝熟化后,其SFA、PUFA、n-6PUFA、n-3PUFA、EPA、DHA均显著高于大豆油组肥肝(P<0.05),极显著高于玉米组肥肝(P<0.01);3)玉米组肥肝熟化后SFA和MUFA显著降低(P<0.05),PUFA、n-6 PUFA、n-3 PUFA显著升高(P<0.05),大豆油组肥肝熟化对这几种脂肪酸的影响不大,而鱼油组肥肝熟化后这几种脂肪酸含量均升高,其中n-6PUFA达到显著水平(P<0.05);4)熟化具有降低3种肥肝中EPA和DHA的趋势,EPA降低幅度以玉米组肥肝最大,DHA降低幅度以大豆油组肥肝最大。以上结果提示,鱼油组肥肝的食用价值最高。

鸭乙型肝炎病毒在鸭肝原代细胞中复制的试验观察

取正常雏鸭肝脏制备原代细胞，在细胞培养板中进行鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）感染，通过ＰＣＲ、紫外分光光度仪、细胞原位杂交等实验技术的检测，观察ＤＨＢＶ在鸭肝原代细胞中的复制。结果，ＤＨＢＶ感染鸭肝原代细胞后３ｄ，病毒即表现出明显的复制现象，在随后一周内细胞内ＤＨＢＶ复制逐渐增强；第二周病毒复制能力开始逐渐衰减，３５ｄ后复制能力基本消失。病毒分布和复制区域主要在肝细胞核内。