标准鸭肝炎Ⅰ型血清对鸭肝炎野毒株的免疫保护试验

为探讨珠江三角洲及其附近地区鸭肝炎免疫失败的原因 ,对从该地区分离到的鸭肝炎野毒 SN株等 6个毒株在 7日龄雏鸭、1 0日龄鸭胚及 9日龄鸡胚上作免疫保护试验、交叉中和试验。试验结果表明 ,标准鸭肝炎 型 ( DH- )血清对部分野毒株 ( SN株、Z株、SF株 )的免疫保护指数较低 ,明显低于相应野毒株血清的保护指数 ,表明该疫区部分鸭肝炎野毒的抗原性已发生改变。这一免疫保护试验结论得到了交叉中和试验结果的支持。根据试验结果 ,采取若干有代表性鸭肝炎野毒与标准 DH- 型毒株 ,制备鸭肝炎高免血清或高免卵黄抗体用于临床免疫防治 ,并注意排除一些其他因素的干优 ,使临床免疫保护率达到 96%。

鸭肝炎Ⅰ型琼脂扩散试验的研究

本试验用不同的鸭肝炎病料 ,通过氯仿去脂和反透析法进行病毒的提纯浓缩 ,研究鸭肝炎的琼脂扩散试验。结果显示用抗原检测抗体或用抗体 (血清 )检测病毒病原 ,均可达到 80 %的阳性检出率。试验中还发现 ,试验最佳的凝胶配方为 p H为 7.2 ,w(Na Cl)为 8%和琼脂糖的质量分数为 1 % ,病雏鸭肝浓缩抗原最为理想。

鸭Ⅰ型肝炎病毒一步法RT-LAMP可视化快速检测方法的建立

本研究根据GenBank中登录的鸭I型肝炎病毒（ DHV I） VP1基因的高度保守序列,设计了特异性的引物,建立了一种灵敏、特异、高效的可视化体外环介导等温扩增方法（ RT-LAMP）。结果表明,该方法的灵敏性可达到10 fg,是常规一步法RT-PCR方法的100倍以上。全部反应可以在1.0～1.5 h内完成,并可以直接通过肉眼观察颜色进行结果判定,该方法对其他鸭常见的病原体检测结果全部为阴性,该方法的建立为下一步研制鸭I型肝炎病毒的RT-LAMP快速检测试剂盒打下基础。

Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒一步法RT-PCR诊断方法的建立及初步应用

根据GenBank中发表的I型鸭病毒性肝炎病毒(DHV-I)的3D基因设计一对引物,用实验室分离培养的毒株提取病毒RNA进行RT-PCR扩增,得到预期大小的目的片段。试验结果表明,所建立的RT-PCR方法最低模板检出量为50pg,且该方法只能特异地检测出鸭病毒性肝炎病毒,不能检出鸭瘟病毒(DPV)、禽流感病毒(AIV)和番鸭呼肠孤病毒(MDRV)等。该方法也能成功检测出人工感染发病死亡雏鸭的肝脏和脾脏。结果表明,该方法可用于DHV-Ⅰ的分离鉴定、临床病料的检测和分子流行病学调查。

应用RT-PCR方法检测鸭病毒性肝炎新型和I型病毒

鸭病毒性肝炎病毒是危害养鸭业的重要病毒性传染病,主要感染低日龄雏鸭,临床上分离到的病原主要为鸭病毒性肝炎I型病毒和鸭病毒性肝炎新型病毒,为了加快本病的检测速度,尽快确诊病原,根据GeneBank上两种毒株的基因组序列,选择两种毒株的差异基因序列分别设计了一对特异性的检测引物,将两对引物放在一个PCR反应体系中,两种毒株分别进行特异性扩增,根据扩增片段的大小进行鉴别,建立了可以同时检测鸭病毒性肝炎病毒I型和新型毒株的复合RT-PCR方法,该检测方法快速,特异性强,灵敏性高,可以用于鸭病毒性肝炎病毒的分型鉴别检测。

鸭肝炎自然病例与鸭肝炎病毒人工发病病例组织病理学观察

到目前为止 ,对鸭肝炎Ⅰ型作组织病理学研究的工作可分为下列几种 :鸡鸭肝炎Ⅰ型标准毒株人工发病雏鸭肝、脾、脑等多种器官作组织病理学观察 ;对鸭肝炎Ⅰ型野外病例肝、脾、脑等作组织病理学观察 ;对鸭肝炎Ⅰ型人工感染鸡胚肝脏等几种脏器作组织病理学观察等。国外Sandhu等还对鸭肝炎Ⅰ型变异株感染雏鸭作组织病理学观察。本文报道了对珠江三角洲有变异倾向的鸭肝炎Ⅰ型自然病例和 6株野毒人工发病病例的组织病理学观察结果 ,观察包括肝、脾、胰、脑、心、肺、肾、腺胃、小肠、法氏囊等 10种脏器 ,并对各器官的病变进行具体描述与统计。为国内外研究DHVⅠ型变异株感染的组织病理学研究提供了更丰富详实的资料。