抗鸭IgG单克隆抗体的研究及其酶结合物的制备

本研究筛选出1株分泌抗大丰鸭 IgG 单克隆抗体(McAb)淋巴细胞杂交瘤5H,经4次克隆,其细胞培养上清液和诱发的 Balb/c 小鼠腹水,经 ELISA 间接法测定,McAb 效价分别为1∶10~2—1∶4×10~3和1∶10~6以上。腹水经正辛酸—饱和硫酸铵沉淀二步法提纯,获得纯度高的抗大丰鸭IgGMcAb,用过碘酸钠氧化法与辣根过氧化物酶进行交联,获得一种抗鸭 IgG McAb 酶结合物免疫学试剂。经测定,该试剂对鸭 IgG 具有专一性。

鸭血清IgG的提纯方法比较

本文对鸭血清分别采用了硫酸钠法、辛酸-硫酸铵法、硫酸铵法进行了鸭IgG的提取。提取后的鸭IgG样品用纯度和蛋白含量两个指标来衡量。用辛酸-硫酸铵法提取的鸭IgG样品蛋白含量为9.45mg/ml,纯度能达到用于免疫标记技术的要求,而且操作简单、价格低廉,适于从大批量样品中提纯鸭IgG;用硫酸钠法提取的鸭IgG样品蛋白含量为9.14mg/ml,相对较高,但纯度较低;用硫酸铵法提取的鸭IgG样品蛋白含量、浓度都较低。