鸽A群轮状病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立及应用

鸽A群轮状病毒(group A rotavirus,RVA)是影响养鸽业健康发展的主要病原之一。为实现鸽RVA的高通量快速检测,根据目前国内外流行的鸽RVA VP6基因保守区域设计特异性引物与探针,建立了一种可以特异性检测鸽RVA的实时荧光RT-PCR方法,并对该方法的灵敏度、特异性和重复性进行了评估。结果显示,该方法灵敏度高,最低检测限为7.22×10^(2)copies/μL;特异性强,与鸽群其他常见病毒无交叉反应;重复性好,组内与组间重复变异系数均小于1.5%。利用该方法和普通RT-PCR方法对200份临床样品进行检测,发现荧光RT-PCR方法的病毒阳性检出率高于普通RT-PCR方法,二者符合率为94.00%。结果表明,本研究建立的实时荧光RT-PCR方法敏感、特异、准确,重复性好,可为开展鸽RVA的临床检测及流行病学调查提供技术支持。

山东省某鸽场混合感染的病原检测与基因型分析

为明确导致山东省某鸽场乳鸽大规模发病死亡的病原种类及其基因型,对4只病死乳鸽进行了病理剖检、细菌分离培养、相关病毒核酸检测和遗传进化分析。结果显示:病死鸽气管、肠道、腺胃等组织脏器出血严重,细菌分离培养无菌落生长,鸽新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)、鸽轮状病毒(pigeon rotavirus,PiRV)和鸽圆环病毒(pigeon circovirus,PiCV)核酸阳性。从病死鸽中检测出的NDV属于基因VI.2.1.1.2.2亚型,与我国参考株SH-167同源性最高;检测出的PiRV属于G18P[17]基因型,与我国参考株CHN/ARO、SX-05同源性最高;检测出的PiCV与我国SF-80参考株同源性最高。结果表明,该鸽场乳鸽的发病死亡由NDV、PiCV和PiRV 3种病原混合感染引起,相关流行毒株未发生较大变异。结果提示,鸽群中流行病原较复杂,除应加强生物安全管理外,还应加强鸽群疫苗免疫,以降低鸽病暴发与流行风险。