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UPLC-MS/MS法测定蘑菇、科研用人血清和尿液中5种鹅膏肽类毒素的方法研究
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作者 曾豪威 戚平 +3 位作者 林子豪 彭名军 陈婷 毛新武 《食品与发酵科技》 CAS 2024年第3期117-123,共7页
本文建立了适用于蘑菇、科研用人血清和尿液样本中5种鹅膏肽类毒素的超高效液相色谱-串联质谱分析方法。样品经乙腈提取和水稀释后,采用XSelect HSS T3(3mm×150mm,2.5μm)进行色谱分离,以0.01%甲酸-乙腈和水为流动相进行梯度洗脱,... 本文建立了适用于蘑菇、科研用人血清和尿液样本中5种鹅膏肽类毒素的超高效液相色谱-串联质谱分析方法。样品经乙腈提取和水稀释后,采用XSelect HSS T3(3mm×150mm,2.5μm)进行色谱分离,以0.01%甲酸-乙腈和水为流动相进行梯度洗脱,串联质谱-电喷雾离子源(ESI)正离子模式检测。5种鹅膏肽类毒素在1~50ng/mL范围内呈现良好线性关系,相关系数均大于0.99,蘑菇样品方法检出限为0.06 mg/kg,定量限为0.2 mg/kg,在3个加标水平下平均回收率为92.6%~124.0%,相对标准偏差为3.2%~14.8%(n=6);科研用人血清样品方法检出限为0.01 mg/L,定量限为0.03 mg/L,在3个加标水平下平均回收率为85.5%~123.5%,相对标准偏差为0.9%~16.4%(n=6);科研用人尿液样品方法检出限为0.005 mg/L,定量限为0.015 mg/L,在3个加标水平下平均回收率为84.8%~119.3%,相对标准偏差为0.9%~16.1%(n=6)。本方法简单快速,高效准确,适用于蘑菇、科研用人血清和尿液中5种鹅膏肽类毒素的快速检测,为突发事件应急检验提供参考依据。 展开更多
关键词 鹅膏肽类毒素 蘑菇 血清 尿液 超高效液相色谱-串联质谱
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超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法测定毒蘑菇中5种鹅膏肽类毒素 被引量:4
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作者 贺丽迎 唐晓琴 +2 位作者 赵舰 杨乾展 李莉 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期94-103,共10页
鹅膏肽类毒素是毒蘑菇中毒事件中最常见的致死毒素,因此研究建立了超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱检测毒蘑菇中5种鹅膏肽类毒素的方法。样品经纯水提取后,以乙腈-5 mmol/L乙酸铵水溶液(含0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,... 鹅膏肽类毒素是毒蘑菇中毒事件中最常见的致死毒素,因此研究建立了超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱检测毒蘑菇中5种鹅膏肽类毒素的方法。样品经纯水提取后,以乙腈-5 mmol/L乙酸铵水溶液(含0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,用HSS T3色谱柱(100 mm×2.0 mm, 2.1μm)对待测组分进行色谱分离;采用可加热电喷雾电离源(HESI),全扫描/数据依赖二级质谱扫描(Full mass-ddMS^(2))模式对待测物进行定性分析;在目标离子选择性扫描(Targeted-SIM)模式下,以外标法对待测物进行定量测定。结果显示,5种鹅膏肽类毒素在1.0~20.0μg/L范围内均呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.99,检出限均为0.006 mg/kg,加标回收率为81.8%~102.4%,相对标准偏差为3.2%~8.3%。方法提供了丰富的化合物特征信息,可根据提取离子流色谱图结合同位素分布信息锁定可疑化合物,根据一级质谱和二级质谱碎片离子的精确质荷比,在没有相关标准品的情况下可对未知化合物进行结构推断和确证。方法样品前处理简单,定性分析特异性强,定量测定灵敏度高,可满足突发公共卫生事件快速定性定量的检测要求,同时也为开展此类毒素中毒快速筛查及未知毒素的结构锁定提供了可靠的技术支撑。 展开更多
关键词 超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱 鬼笔毒 毒蘑菇
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高效液相色谱⁃串联质谱法测定野生蘑菇中鹅膏肽类与色胺类毒素 被引量:3
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作者 刘磊琦 陈镜泽 +1 位作者 傅武胜 唐翠英 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期976-985,共10页
蘑菇毒素种类繁多,化学结构差异大,为了实现蘑菇中毒素的准确、高通量分析,本文采用固相萃取净化技术,以高效液相色谱⁃串联质谱法(HPLC⁃MS/MS)为分析手段,建立了蘑菇中5种鹅膏肽类、2种色胺类蘑菇毒素的分析方法。优化了色谱条件、质谱... 蘑菇毒素种类繁多,化学结构差异大,为了实现蘑菇中毒素的准确、高通量分析,本文采用固相萃取净化技术,以高效液相色谱⁃串联质谱法(HPLC⁃MS/MS)为分析手段,建立了蘑菇中5种鹅膏肽类、2种色胺类蘑菇毒素的分析方法。优化了色谱条件、质谱参数和样品提取净化方法,蘑菇干粉以含0.3%甲酸的甲醇提取,强阳离子交换柱(SCX)净化后,待测样液用T3色谱柱分离,以含0.1%甲酸的5 mmol/L乙酸铵水溶液、乙腈为流动相进行梯度洗脱,采用多反应监测模式(MRM)扫描,以基质匹配标准曲线法对鹅膏肽毒素定量,以同位素内标法对色胺类毒素定量。结果显示,7种毒素在一定的浓度范围内与峰面积(或峰面积比)均呈良好的线性关系(r^(2)>0.99)。蟾蜍色胺、脱磷裸盖菇素、鹅膏肽类毒素的检出限(LOD)分别为2.0、5.0、10μg/kg,定量限(LOQ)分别为5.0、10、20μg/kg;以香菇干粉为基质,在3个水平下加标,5种鹅膏肽类毒素的回收率为71.8%~115%,相对标准偏差(RSD)为2.14%~9.92%;2种色胺类毒素的回收率为80.6%~117%,RSD为1.73%~5.98%;与国家市场监管总局食品补充检验方法BJS 202008进行比对,结果表明鹅膏毒素含量具有可比性,无显著性差异(p>0.05)。该方法简便、快速,准确度和精密度较高,符合要求,适用于野生蘑菇中7种蘑菇毒素的检测。采用该法开展了福建省野生蘑菇中蘑菇毒素分布情况的调查,在全省9个设区市采集了59份野生蘑菇样品,采用核糖体DNA内转录间隔区(rDNA⁃ITS)分子条形码技术进行了种属鉴定,在2份样品中检测出了蘑菇毒素,在1份拟灰花纹鹅膏(Amanita fuligine⁃oides)干粉提取物中检出α⁃鹅膏毒肽、β⁃鹅膏毒肽和二羟鬼笔毒肽,含量分别为607、377、69.0 mg/kg;在1份口蘑科(Tricholomataceae)蘑菇中检出脱磷裸盖菇素,含量为12.6 mg/kg。 展开更多
关键词 高效液相色谱⁃串联质谱法 鬼笔毒 脱磷裸盖菇素 蟾蜍色胺 蘑菇
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TurboFlow在线净化-液相色谱-串联质谱法快速检测人尿中鹅膏肽类毒素 被引量:9
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作者 方力 邱凤梅 余新威 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期338-345,共8页
鹅膏肽类毒素是一类环状多肽类蘑菇毒素,中毒后会造成急性肝损伤,病死率非常高。我国因误食野生毒蘑菇导致的中毒事件常有发生,测定人尿中鹅膏肽类毒素的浓度,可为临床早期诊断和救治提供有价值的信息。该研究建立了TurboFlow(TF)在线净... 鹅膏肽类毒素是一类环状多肽类蘑菇毒素,中毒后会造成急性肝损伤,病死率非常高。我国因误食野生毒蘑菇导致的中毒事件常有发生,测定人尿中鹅膏肽类毒素的浓度,可为临床早期诊断和救治提供有价值的信息。该研究建立了TurboFlow(TF)在线净化-液相色谱-三重四极杆质谱快速定量检测尿液中5种鹅膏肽类毒素(α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽和二羟鬼笔毒肽)的新方法。尿液样品经高速离心后,直接注入TurboFlow在线净化-液相色谱-串联质谱进行分析。对影响TF在线净化的参数如TF净化柱、上样溶剂、洗脱溶剂、转移流速、转移时间等进行了优化。在优化后的实验条件下,以TurboFlow TM Cyclone柱(50 mm×0.5 mm)为净化柱,Hypersil GOLD C 18柱(100 mm×2.1 mm)为分析柱,甲醇和4 mmol/L乙酸铵为流动相进行梯度洗脱,电喷雾正离子选择反应监测(SRM)模式下进行检测,基质匹配外标法定量。结果表明,鹅膏肽类毒素在1.0~50.0μg/L范围内呈现良好的线性关系,相关系数均可达到0.997以上。方法的检出限为0.15~0.3μg/L,定量限为0.5~1.0μg/L。在2.0、5.0和10.0μg/L的加标水平下,5种鹅膏肽类毒素的日内和日间回收率分别为87.0%~108.6%和86.8%~112.7%,日内、日间相对标准偏差(RSD)均小于14.5%。该检测方法准确、快速、灵敏度高、易操作,适用于公共卫生应急检测或临床中毒病因识别检测。 展开更多
关键词 在线净化 液相色谱-串联质谱法 鹅膏肽类毒素 蘑菇毒素 尿液
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毒鹅膏菌和鹅膏肽类毒素研究进展 被引量:19
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作者 王晶 史振霞 +3 位作者 乔洁 侯晓强 吴智艳 韩美玲 《廊坊师范学院学报(自然科学版)》 2018年第1期46-53,57,共9页
在我国,经常有因为误食剧毒鹅膏菌而导致中毒的报道。本章概述了鹅膏肽类毒素的化学结构与性质、中毒的症状和机理、我国产鹅膏肽类毒素的主要蘑菇种类等,为预防鹅膏菌中毒和其应用研究提供一定的科学依据。
关键词 鹅膏肽类毒素 鬼笔毒 鬼伞素
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超高效液相色谱-电喷雾离子化-四级杆飞行时间串联质谱指纹图谱检测毒蕈中4种鹅膏肽类毒素 被引量:41
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作者 柳洁 丁文婕 +2 位作者 何碧英 罗兰 黄蔷 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2013年第4期500-508,共9页
建立了基于超高效液相色谱-电喷雾离子化-四级杆飞行时间串联质谱技术(UPLC-ESI-Q-TOF)的4种鹅膏肽类毒素特征信息的色谱和质谱指纹图谱和分析鉴定方法。样品用含0.1%TFA的甲醇溶液提取后,再用Oasis HLB固相柱净化,洗脱液经UPLC HSS T3... 建立了基于超高效液相色谱-电喷雾离子化-四级杆飞行时间串联质谱技术(UPLC-ESI-Q-TOF)的4种鹅膏肽类毒素特征信息的色谱和质谱指纹图谱和分析鉴定方法。样品用含0.1%TFA的甲醇溶液提取后,再用Oasis HLB固相柱净化,洗脱液经UPLC HSS T3色谱柱分离后,采用ESI-TOF MS和ESI-Q-TOF MS2进行测定;建立了包含毒素准分子离子准确质量数及其同位素特征,以及二级质谱特征子离子信息的指纹图谱;方法定量测定的线性范围在50~1000μg/L,相关系数在0.9974~0.9985之间;4种毒素的检出限均为10μg/L;定量限为50μg/L;加标回收率在68.2%~88.2%之间;相对标准偏差为7.2%~11.8%。对采集的20余种野生菌样品进行分析,有5种样品检测出含有毒素。本方法快速、准确、选择性好、特异性强,适用于突发毒蕈中毒事件样品中α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、二羟鬼笔毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽的确证分析。 展开更多
关键词 α- β- 二羟鬼笔毒 羧基二羟鬼笔毒 超高效液相色谱-电喷雾离子化-四级杆飞行时间串联质谱 指纹图谱 野生菌
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鹅膏肽类毒素检测方法的历史与现状 被引量:24
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作者 陈作红 胡劲松 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第8期11-16,共6页
每年因误食毒蘑菇导致中毒死亡事件在世界各国都有发生,也是我国食物中毒事件中导致死亡的重要因素之一。鹅膏菌属中某些种类含有的肽类毒素是主要的致死原因,快速而有效地检测样品(包括有毒蘑菇子实体、食物剩余物、呕吐物、中毒患者... 每年因误食毒蘑菇导致中毒死亡事件在世界各国都有发生,也是我国食物中毒事件中导致死亡的重要因素之一。鹅膏菌属中某些种类含有的肽类毒素是主要的致死原因,快速而有效地检测样品(包括有毒蘑菇子实体、食物剩余物、呕吐物、中毒患者血液和尿液等)中的毒素对于食物中毒的毒源鉴定和中毒后的针对性治疗具有重要意义。本文从化学显色反应、生物化学法、物理法、色谱法等4个方面对鹅膏肽类毒素检测方法的历史和研究进展进行整理和总结,并对其在我国的应用加以讨论和展望。 展开更多
关键词 鬼笔毒 检测方法
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QuEChERS-液相色谱-四极杆飞行时间质谱法测定毒蘑菇中5种鹅膏肽类毒素 被引量:4
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作者 林子豪 罗鼎峰 +1 位作者 戚平 毛新武 《食品安全导刊》 2021年第30期78-80,82,共4页
建立了5种鹅膏肽类毒素的液相色谱-四极杆飞行时间质谱快速分析方法。样品用乙腈提取,经C;和无水硫酸钠净化,用水稀释后,四极杆飞行时间质谱电喷雾正离子模式检测。结果表明,5种鹅膏肽类毒素在10~200 ng/mL的范围内均呈良好的线性关系,... 建立了5种鹅膏肽类毒素的液相色谱-四极杆飞行时间质谱快速分析方法。样品用乙腈提取,经C;和无水硫酸钠净化,用水稀释后,四极杆飞行时间质谱电喷雾正离子模式检测。结果表明,5种鹅膏肽类毒素在10~200 ng/mL的范围内均呈良好的线性关系,相关系数均>0.99,方法检出限为0.03~0.36 mg/kg,平均回收率为90.1%~105.4%,相对标准偏差为0.1%~4.1%。该方法快速简便、回收率高,适用于毒蘑菇中5种鹅膏肽类毒素的定性定量分析。 展开更多
关键词 鹅膏肽类毒素 液相色谱-四极杆飞行时间质谱 毒蘑菇 QUECHERS
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超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法快速测定野生蘑菇中6种鹅膏肽类毒素 被引量:2
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作者 林子豪 彭名军 +2 位作者 周庆琼 曾豪威 戚平 《现代食品》 2022年第23期118-122,共5页
建立了超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱快速测定野生蘑菇中6种鹅膏肽类毒素的分析方法。样品采用甲醇-水(V/V=50/50)提取和水稀释后,采用ACQUITY UPLC BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)进行分离,以0.1%乙酸-乙腈和水为流动相进行... 建立了超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱快速测定野生蘑菇中6种鹅膏肽类毒素的分析方法。样品采用甲醇-水(V/V=50/50)提取和水稀释后,采用ACQUITY UPLC BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)进行分离,以0.1%乙酸-乙腈和水为流动相进行梯度洗脱,四极杆飞行时间质谱电喷雾正离子模式检测。6种鹅膏肽类毒素在5~100 ng·mL^(-1)均呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.995,方法检出限为0.4 mg·kg^(-1),定量限为1 mg·kg^(-1)。在3个加标水平下平均回收率为74.1%~119.9%,相对标准偏差为0.1%~6.7%(n=6)。本方法快速准确,适合于野生蘑菇中6种鹅膏肽类毒素的快速检测。 展开更多
关键词 鹅膏肽类毒素 野生蘑菇 超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱
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含鹅膏肽类毒素蘑菇中毒药物治疗研究进展
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作者 徐红跃 姚群梅 +1 位作者 钟加菊 余成敏 《当代医学》 2022年第22期184-187,共4页
90%以上的蘑菇中毒死亡事件是由含鹅膏肽类毒素蘑菇所致,目前该类蘑菇中毒尚无特效解毒药物。本文根据不同作用机制,将治疗药物分为胃肠道吸收抑制剂、肝细胞摄取抑制剂、抗氧化剂、RNAPⅡ结合抑制剂及中药5类,并对其作用机制、临床适... 90%以上的蘑菇中毒死亡事件是由含鹅膏肽类毒素蘑菇所致,目前该类蘑菇中毒尚无特效解毒药物。本文根据不同作用机制,将治疗药物分为胃肠道吸收抑制剂、肝细胞摄取抑制剂、抗氧化剂、RNAPⅡ结合抑制剂及中药5类,并对其作用机制、临床适应证、给药剂量进行综述,以期为临床治疗提供指导。 展开更多
关键词 鹅膏肽类毒素 蘑菇中毒 中毒机制 药物治疗
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高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法测定深圳梧桐山野生蘑菇中5种鹅膏肽类毒素的含量 被引量:1
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作者 叶小莉 岳亚军 +4 位作者 赖璟琦 朱波 赖少阳 叶敏 庄辉元 《理化检验(化学分册)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期909-913,共5页
针对深圳梧桐山野生蘑菇中毒案件,于事发地采集23种野生蘑菇样品,采用题示方法同时测定其中α-鹅膏毒肽(α-AMA)、β-鹅膏毒肽(β-AMA)、羧基二羟鬼笔毒肽(PCD)、羧基三羟鬼笔毒肽(PSC)和二羟鬼笔毒肽(PHD)等5种鹅膏肽类毒素的含量,并... 针对深圳梧桐山野生蘑菇中毒案件,于事发地采集23种野生蘑菇样品,采用题示方法同时测定其中α-鹅膏毒肽(α-AMA)、β-鹅膏毒肽(β-AMA)、羧基二羟鬼笔毒肽(PCD)、羧基三羟鬼笔毒肽(PSC)和二羟鬼笔毒肽(PHD)等5种鹅膏肽类毒素的含量,并对唯一检出毒素的致命鹅膏不同生长时期的子实体中的5种毒素含量进行考察。在新鲜蘑菇1 g或干蘑菇0.2 g中加入10 mL水,匀浆后超声10 min,离心5 min。分取1 mL上清液过0.22μm水相滤膜,滤液供高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法分析。以ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱为固定相,以不同体积比5 mmol·L^(-1)乙酸铵溶液和乙腈的混合溶液为流动相进行梯度洗脱,分离后的各目标物用串联质谱仪的电喷雾离子源正离子模式电离,多反应监测模式检测。结果显示:5种鹅膏肽类毒素的质量浓度均在20.0~500.0μg·L^(-1)内与其对应的峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)均为6 ng·g^(-1);对空白样品进行加标回收试验,回收率为78.3%~98.3%,测定值的相对标准偏差(n=6)为0.30%~11%。在23种野生蘑菇中,除致命鹅膏外,其他22种野生蘑菇均未检出5种鹅膏肽类毒素。致命鹅膏样品中检出了α-AMA、β-AMA、PCD和PSC,毒素总量在成熟期最高(1.50 mg·g^(-1),湿重),生长期最低(1.05 mg·g^(-1),湿重);β-AMA检出量最高、α-AMA次之。 展开更多
关键词 高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法 鬼笔毒 野生蘑菇 致命
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超高效液相色谱-串联质谱法测定野生蘑菇中的6种鹅膏肽类毒素 被引量:12
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作者 郎乐 王庆峰 刘斌 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第6期1506-1510,共5页
目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, UPLC-MS/MS)测定野生蘑菇中6种鹅膏肽类毒素的含量。方法 干燥后的样品粉末经水提取后,提取液转移至固相萃取柱净化,采用ACQ... 目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, UPLC-MS/MS)测定野生蘑菇中6种鹅膏肽类毒素的含量。方法 干燥后的样品粉末经水提取后,提取液转移至固相萃取柱净化,采用ACQUITY UPLC BEH C_18色谱柱以5 mmol/L的甲酸铵水溶液和甲醇为流动相迚行梯度洗脱,流速为0.3mL/min,柱温40℃,采用多反应监测模式检测。结果 6种待测物在色谱图上全部做到基线分离,在20~1000μg/kg的范围内呈现良好的线性关系,检出限均达到20μg/kg,不同水平下的加标回收实验中各待测物的平均回收率为78.2%~95.7%,相对标准偏差为1.2%~5.2%。结论 该方法操作简单,灵敏度高,重复性好,适用于野生蘑菇中鹅膏肽类毒素的检测。 展开更多
关键词 鬼笔毒 超高效液相色谱-质谱法 野生蘑菇
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云南楚雄3种环柄菇中鹅膏肽类毒素的检测与分析
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作者 许苹 余成敏 +4 位作者 姚群梅 李吉品 唐燕 吴兆华 钟加菊 《中国食品卫生杂志》 CSCD 北大核心 2024年第6期741-750,共10页
目的对云南楚雄地区3种环柄菇中的6种鹅膏肽类毒素含量进行分析。方法采集的蘑菇45℃烤干,采用形态学和分子生物学方法进行物种鉴定。将蘑菇分为3个不同生长时期(生长期、成熟期、衰老期)和不同组织部位(菌盖、菌柄、整体),用超纯水超... 目的对云南楚雄地区3种环柄菇中的6种鹅膏肽类毒素含量进行分析。方法采集的蘑菇45℃烤干,采用形态学和分子生物学方法进行物种鉴定。将蘑菇分为3个不同生长时期(生长期、成熟期、衰老期)和不同组织部位(菌盖、菌柄、整体),用超纯水超声提取毒素,采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法、电喷雾(ESI-)模式下多反应监测(MRM)方式检测,外标法定量。结果细环柄菇(Lepiota clypeolaria)和冠状环柄菇(Lepiota cristata)未检出鹅膏肽类毒素,肉褐鳞环柄菇(Lepiota brunneoincarnata)中检测出α-鹅膏毒肽(α-AMA)、β-鹅膏毒肽(β-AMA),其中α-AMA含量高于β-AMA。α-AMA总含量成熟期(1.67 mg/g)>生长期(1.56 mg/g)>衰老期(0.40 mg/g),β-AMA总含量成熟期(0.71 mg/g)>生长期(0.60 mg/g)>衰老期(0.14 mg/g)。两种毒素在生长期和成熟期的分布为:菌盖>菌柄,而衰老期为菌柄>菌盖。结论楚雄地区的肉褐鳞环柄菇L.brunneoincarnata主要含有鹅膏毒肽,包括α-AMA、β-AMA、Amanin、Amaninamide,不含鬼笔毒肽及毒伞肽,并且在不同生长期、不同组织部位中的α-AMA、β-AMA含量具有差异,能够为该类蘑菇中毒的临床诊断及治疗提供参考。 展开更多
关键词 环柄菇属 肉褐鳞环柄菇 超高效液相色谱-串联质谱法 毒蘑菇 鹅膏肽 云南省
原文传递
超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法快速检测菌类中鹅膏毒肽毒素
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作者 蒋云露 吴文林 +5 位作者 黄弋耘 夏鸿玲 吴丹 郭添荣 孙群 张敏 《粮食储藏》 2024年第4期40-45,61,共7页
采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法测定蘑菇中3种鹅膏肽类毒素的含量[α-鹅膏毒肽(α-AMA)、β-鹅膏毒肽(β-AMA)和γ-鹅膏毒肽(γ-AMA)]。将样品均质后,利用甲酸-甲醇-水(0.5∶10∶89.5,v/v/v)标准混合溶液提取,经由... 采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法测定蘑菇中3种鹅膏肽类毒素的含量[α-鹅膏毒肽(α-AMA)、β-鹅膏毒肽(β-AMA)和γ-鹅膏毒肽(γ-AMA)]。将样品均质后,利用甲酸-甲醇-水(0.5∶10∶89.5,v/v/v)标准混合溶液提取,经由BEH shield RP18柱(150 mm×2.1 mm,1.7μm)实施分离,采取梯度洗脱,流动相为0.03%氨水与甲醇,在HESI离子化方式下以tSIM正离子模式进行扫描检测,外标法定量。蘑菇所含3类鹅膏肽类毒素具良好线性关系,区间是0.05 mg/kg~5 mg/kg,相关系数r均在0.995以上,确定α-AMA、γ-AMA检出限是0.01 mg/kg,定量限是0.02 mg/kg;β-AMA的检出限和定量限分别为0.02 mg/kg和0.05 mg/kg。平均回收率于3个加标水平下处在72.5%~91.9%范围,相对标准偏差(RSD,n=6)为2.8%~7.4%。方法简单高效,适用于蘑菇中3种鹅膏肽类毒素(α-AMA、β-AMA和γ-AMA)的快速检测。 展开更多
关键词 蘑菇 超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱
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混合阳离子固相萃取净化结合UPLC-MS/MS测定蘑菇及生物样本中鹅膏肽类毒素 被引量:2
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作者 易思亮 赵志勇 +4 位作者 赵兰馨 范婷婷 赵晓燕 周昌艳 杨凌宸 《分析试验室》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第7期923-930,共8页
建立了一种混合阳离子固相萃取净化结合超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定蘑菇、尿液及血浆中α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、二羟鬼笔毒肽和羧基二羟鬼笔毒肽的方法。对于蘑菇样本,烘干粉碎后纯水超声提取,经混合阳... 建立了一种混合阳离子固相萃取净化结合超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定蘑菇、尿液及血浆中α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、二羟鬼笔毒肽和羧基二羟鬼笔毒肽的方法。对于蘑菇样本,烘干粉碎后纯水超声提取,经混合阳离子柱(MCX)净化;对于尿液和血浆样本,乙腈提取后,经PRi ME MCX柱净化。净化的样本以甲醇和5 mmol/L甲酸铵水溶液为流动相,在ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱上进行分离,电喷雾正离子多反应监测(MRM)模式检测,基质匹配外标法定量。结果表明,5种鹅膏肽类毒素在0.5~1000μg/L范围内均呈良好的线性关系,相关系数R^(2)>0.999。方法检出限为0.1~0.5μg/kg(μg/L),定量限为0.5~1.0μg/kg(μg/L);3个加标浓度下的平均回收率为79.1%~103.5%,相对标准偏差(RSD)为0.2%~9.6%。该方法适用于含鹅膏毒肽蘑菇中毒的确证与临床诊断。 展开更多
关键词 混合阳离子固相萃取 超高效液相色谱串联质谱法 鹅膏肽类毒素 蘑菇 尿液和血浆
原文传递
毒蘑菇中鹅膏肽类毒素的超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱同时测定法
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作者 黄小芹 陈汝梅 +2 位作者 阮燕明 孙明月 林佶 《职业与健康》 CAS 2023年第17期2337-2344,共8页
目的建立超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-mass spectrometer detector quadrupole time of flight,UPLC-Q-TOF)定性定量检测毒蘑菇中鹅膏肽类毒素的分析方法。方法样品加入甲醇后均... 目的建立超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-mass spectrometer detector quadrupole time of flight,UPLC-Q-TOF)定性定量检测毒蘑菇中鹅膏肽类毒素的分析方法。方法样品加入甲醇后均质,超声离心提取,待测液采用ACQUITY UPLC?HSS T_(3)1.8μm色谱柱(2.1×50 mm)进行分离,以0.1%氨水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱0 min,2%B;0~0.5 min,2%B;0.5~6.0 min,95%B;6.0~7.0 min,95%B;7.0~8.0 min,2%B,流速0.3 mL/min,柱温40℃,进样量2.0μL。采用超高效液相色谱四级杆飞行时间质谱仪对毒蘑菇进行分离、鉴定鹅膏菌中的毒素成分。结果毒蘑菇样品中1、2、3、5、6、7、8号样品均未检出鹅膏肽类毒素;4号样品共检出6种组分,经鉴定为已知的鹅膏肽类毒素,分别是α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、二羟鬼笔毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽和二羟鹅膏毒肽酰胺。进一步建立鹅膏肽类毒素快速定量方法,5种鹅膏肽类毒素在25~1000μg/L范围内呈现良好的线性关系,相关系数为0.9912~0.9989,平均加标回收率为89.5%~110.5%,相对标准偏差为3.80%~7.80%。其中α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、二羟鬼笔毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽的含量分别是(19.701±0.175)、(0.098±0.014)、(1.548±0.001)、(0.331±0.002)及(0.108±0.060)mg/kg,二羟鹅膏毒肽酰胺与羧基二羟鬼笔毒肽相对含量为0.754 mg/kg。结论该方法用于测定毒蘑菇中多种鹅膏肽类毒素,方法简单、快速、可靠,为进食毒蘑菇突发中毒患者的快速临床诊断和及时治疗提供了有效的科学依据。 展开更多
关键词 超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱法 鹅膏肽类毒素 野生菌 食物中毒
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鹅膏菌毒性成分中毒特征及开发应用研究进展 被引量:1
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作者 陈瑜鑫 李瑶 +3 位作者 高海云 李慧 刘天睿 袁媛 《中国药物警戒》 2024年第5期496-501,共6页
目的探究鹅膏菌的毒性成分种类、中毒特征及其在医药和生物学领域内的应用前景,提供客观认识鹅膏菌安全性的新视角,为鹅膏菌的进一步合理开发和安全利用提供参考。方法通过检索国内外相关文献,针对鹅膏菌毒性成分、中毒特征及开发利用... 目的探究鹅膏菌的毒性成分种类、中毒特征及其在医药和生物学领域内的应用前景,提供客观认识鹅膏菌安全性的新视角,为鹅膏菌的进一步合理开发和安全利用提供参考。方法通过检索国内外相关文献,针对鹅膏菌毒性成分、中毒特征及开发利用的现代研究进行整理、分析和归纳。结果鹅膏菌主要含有多肽、氨基酸、生物碱等毒性成分,但其成分组成和含量会受品种、使用部位等多种因素影响;中毒特征主要表现为胃肠道症状和急性肝肾损伤。同时毒性成分在抑菌、抗肿瘤、抗炎等药物开发和生物学研究中也具有开发利用价值。结论鹅膏菌具有重要的开发价值,了解鹅膏菌毒性成分种类、作用机制和安全剂量,有助于为鹅膏菌的临床安全使用及开发利用提供参考。 展开更多
关键词 毒性成分 中毒特征 剧毒 资源开发
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毒蕈中α-鹅膏毒肽的中毒机制及检测技术研究进展 被引量:2
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作者 易思嘉 罗林 +4 位作者 陈子键 雷红涛 沈玉栋 王弘 徐振林 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2023年第20期129-139,共11页
α-鹅膏毒肽是毒蕈中分布广、含量高且毒性极强的蘑菇毒素,其性质十分稳定,一般的加热烹饪方式难以使之失活,误食含有该毒肽的毒蕈可引发中毒效应,具体表现为呕吐、腹泻等严重胃肠道反应甚至可导致肝肾功能衰竭,其发病迅速且目前没有特... α-鹅膏毒肽是毒蕈中分布广、含量高且毒性极强的蘑菇毒素,其性质十分稳定,一般的加热烹饪方式难以使之失活,误食含有该毒肽的毒蕈可引发中毒效应,具体表现为呕吐、腹泻等严重胃肠道反应甚至可导致肝肾功能衰竭,其发病迅速且目前没有特效药可以解毒,对食品安全和人类的生命健康安全造成了极大的威胁。传统的检测方法存在设备不便携、成本昂贵、检测速度慢等弊端,因此,通过了解α-鹅膏毒肽的致毒机制和建立准确、高效、便捷的检测技术对于有效防范α-鹅膏毒肽中毒事件的发生意义重大。本文简要综述了α-鹅膏毒肽的中毒症状、中毒机制、现有的解毒方式,着重阐述了α-鹅膏毒肽的检测技术研究进展,并对未来快速免疫检测技术的发展进行了展望,以期为治疗α-鹅膏毒肽中毒和保障人类的生命健康安全提供有效的帮助。 展开更多
关键词 蘑菇 毒蕈 α- 中毒机制 检测方法
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正电性金纳米-核酸适配体纳米生物传感器快速检测野生菌中的α-鹅膏毒肽 被引量:2
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作者 杨人香 王巍 +3 位作者 马怡 苏欣 苏会岚 李娜 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2023年第10期76-83,共8页
目的 构建一种基于正电性金纳米-核酸适配体的纳米生物传感器,以实现野生菌中α-鹅膏毒肽(α-amanitin, α-AMA)的快速检测。方法 选择可与α-AMA特异性结合的核酸适配体作为识别元件,以半胱氨酸(cysteamine, Cys)修饰的正电性纳米金(go... 目的 构建一种基于正电性金纳米-核酸适配体的纳米生物传感器,以实现野生菌中α-鹅膏毒肽(α-amanitin, α-AMA)的快速检测。方法 选择可与α-AMA特异性结合的核酸适配体作为识别元件,以半胱氨酸(cysteamine, Cys)修饰的正电性纳米金(gold nanoparticles, AuNPs)作为信号探针。基于静电吸附作用,将适配体固载到Cys@AuNPs表面。测定溶液在特定波长处吸光度值的变化,实现α-AMA的快速检测。结果 该纳米生物传感器检测α-AMA的最佳条件:Cys@AuNPs体积为150μL,适配体浓度为6 nmol/L, Cys@AuNPs与适配体反应时间为10min, α-AMA与适配体结合时间为10 min。在最佳条件下检测α-AMA的线性范围为1~125 ng/mL(r2=0.995)。本体系中α-AMA的检出限为0.87 ng/mL,加标回收率为98.6%~120.0%。结论 该纳米生物传感器操作简便、灵敏度高、特异性好、成本低廉,适用于野生菌样品中α-AMA的快速检测。 展开更多
关键词 适配体 正电性金纳米 α- 野生菌
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野生菌中鹅膏毒肽和鬼笔毒肽检验方法及样品处理技术研究进展 被引量:1
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作者 谭建林 曾明梅 +7 位作者 赵秀琳 赵小林 彭珍华 张雪媛 陈明瑶 王吉祥 牛之瑞 马雪涛 《化学分析计量》 CAS 2023年第8期115-120,共6页
综述鹅膏毒肽和鬼笔毒肽检验方法及野生菌样品处理技术研究进展。食用蘑菇中毒事件多为误食鹅膏菌毒素所致,引起急性肝毒性中毒的致命蘑菇毒素主要为鹅膏毒肽和鬼笔毒肽。蘑菇毒素检测样品处理技术主要包括蛋白沉淀法、固相萃取技术、... 综述鹅膏毒肽和鬼笔毒肽检验方法及野生菌样品处理技术研究进展。食用蘑菇中毒事件多为误食鹅膏菌毒素所致,引起急性肝毒性中毒的致命蘑菇毒素主要为鹅膏毒肽和鬼笔毒肽。蘑菇毒素检测样品处理技术主要包括蛋白沉淀法、固相萃取技术、在线净化技术、免疫亲和技术等,检测方法主要包括快速检测法、毛细管电泳质谱联用法、高效液相色谱法、液相色谱质谱联用法等。快速检测法操作简便,适用于蘑菇毒素现场检测;毛细管电泳质谱联用法有高分辨率和高灵敏度的特点;高效液相色谱法在基层实验室广泛应用于蘑菇毒素的检测分析;液相色谱质谱联用法可准确的对蘑菇毒素进行定性和定量分析。通过比较这些技术和方法,可对实验室根据相对应的样本建立简单、快速、准确检测鹅膏毒肽的方法提供重要参考依据。 展开更多
关键词 野生菌 鬼笔毒 前处理技术 检测方法
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