一株鹭山病毒的分子生物学鉴定

目的采用分子生物学方法鉴定一株甲病毒M1。方法M1病毒在C6/36细胞中增殖,用TRIZOL法提取总RNA。采用RT-PCR方法扩增目的片段,并将其克隆到T载体中,筛选重组子并测定其核苷酸序列。用NCBI/BLAST程序进行同源性收索。结果M1病毒扩增出469bp的特异片段,且包含SAG特有的100nt片段。同源性分析表明,该片段与SAG、GET相对应片段同源性为95%,91%。结论M1病毒属于鹭山病毒。

抗鹭山病毒单克隆抗体的研制及应用

本文报告应用淋巴细胞杂交瘤技术，共获得５株能持续、稳定分泌抗鹭山（ＳＡＧ）病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞系，间接免疫荧光法证实，两株ＭｃＡｂ具有病毒种的特异性，其它３株具有亚组特异性。免疫印迹分析发现，前者仅能识别ＳＡＧ病毒Ｃ蛋白上的表位，后者能识别ＳＡＧ病毒的三个结构蛋白（Ｅ１、Ｅ２和Ｃ），并与ＧＥＴ、ＭＡＹ及ＲＲ鹭甲病毒的Ｃ蛋白有明显的交叉反应。

海南岛两株甲病毒基因组3′末端核苷酸序列的克隆与分析

目的 从分子水平鉴定海南省分离的两株甲病毒 (HBb17和M1病毒 )。方法 采用RT-PCR方法 ,分别扩增两株病毒基因组的 3′末端核苷酸序列 ,扩增产物经亚克隆 ,筛选重组子并测定核苷酸序列对序列进行分析。结果 HBb17和M1病毒分别扩增出约 1 6kb和 1 3kb的特异片段。序列分析表明 ,在 3′末端非翻译区HBb17病毒与罗斯河病毒 (国际标准株T48病毒 )核苷酸同源性为99 % ,M1病毒与鹭山病毒 (SAG)同源性为 98% ;两病毒结构基因的E1区序列 ,HBb17病毒与罗斯河病毒核苷酸 (氨基酸 )同源性为 99% (99% ) ,M1病毒与鹭山病毒核苷酸 (氨基酸 )同源性为 97% (99% ) ,M1病毒与盖塔病毒同源性为 94% (98% )。结论 序列分析表明 ,海南岛分离的HBb17病毒属于罗斯河病毒 。