两株鹿源芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

为获得鹿源肠道菌群中的芽孢杆菌并研究其益生作用,对梅花鹿肠道分泌物85℃水浴处理15min以筛选芽孢杆菌。根据菌落形态、生理生化特征及分子生物学结果进行鉴定,通过抑菌试验、耐酸、耐胆盐试验及产纤维素酶试验等方法对其生物学特性进行研究。结果表明:试验共分离出4株芽孢杆菌,分别编号为XF-1、XF-2、XF-3、XF-4,对其中的两株进行鉴定,最终确定XF-1为地衣芽孢杆菌,XF-3为解淀粉芽孢杆菌。采用牛津杯法研究两株芽孢杆菌对4种致病菌的抑制作用,发现XF-1对大肠杆菌、链球菌、沙门氏菌都具有良好的抑制作用,XF-3对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、沙门氏菌都具有良好的抑制作用。选择CMC-Na培养基检测这两株芽孢杆菌的产纤维素酶能力,试验表明,菌株XF-1的纤维素降解指标为D/d=2.18,菌株XF-3纤维素降解指标为D/d=3.18,XF-3的降解纤维素能力高于XF-1。试验中计算在不同酸性环境和胆盐环境中菌株的成活率,评价耐受能力的差异,结果表明:XF-1在p H值3.0环境中24h存活率是7.3%,在0.2%胆盐环境中24h存活率为8.57%,可产纤维素酶;XF-3在p H值3.0环境中24h存活率是12.5%,在0.2%胆盐环境中24h存活率为6.67%,可产纤维素酶。试验结果证明这两株芽孢杆菌有一定的抗逆性和益生能力,具有作为益生菌研究开发的潜力。

鹿茸及鹿源系列中药真伪鉴别与质量评价研究进展

以网络文献查阅与手工检索相结合的方法,梳理了1977—2012年有关鹿茸及其鹿源系列中药真伪鉴别与质量评价方面的106篇文献资料。分析结果表明:随着医疗保健用途的不断扩大和市场的迅速发展,鹿茸及鹿源系列中药的来源更为复杂多样,鉴别方法由简单的性状、显微和理化鉴别发展为多学科、多层次、多组分指纹图谱技术的综合鉴定,并引入化学、数学、分子生物学等方法对药材质量进行系统评价。但各种鉴定方法均有一定的局限性。要解决鹿茸及鹿源系列中药真伪鉴别与质量控制等实际问题,必须进行管理、市场和技术部门的综合治理。

鹿源多杀巴氏杆菌荚膜分型及免疫原性

采用 Carter荚膜群鉴定法将分离于我国鹿的 38株多杀巴氏杆菌进行鉴定 ,结果显示 :B型占 6 8.4%(2 6 / 38) ,A型占 18.4%(7/ 38) ,D型占 5 .3%(2 / 38) ,3株未能确定型占 7.9%(3/ 38)。并从 2 6株荚膜 B型巴氏杆菌中选出荧光典型的 8株菌制备免疫原给健康兔注射 ,30 d后用间接血凝法测定各株菌抗体效价 ,选出效价最高的 2株菌 D1 PM和D2 PM用小鼠增毒 ,当毒力稳定后用兔测得 D1 PM ML D为 8个菌 ,D2 PM ML D为 17个菌 ,为疫苗的制造筛选出了优良的菌株。

鹿源狂犬病野毒8202株基因型的研究

为了从基因水平确定鹿源狂犬病野毒8202株与其它狂犬病病毒的进化关系,应用RT-半嵌套式PCR技术,利用3条引物对病毒的核蛋白基因进行扩增、克隆及序列测定,并与已发表的狂犬病病毒株3aG、PV、CVS、HEP-Flury、RC-HL、Nishigahara、SADB19的核蛋白基因进行了比较分析。结果表明,8202株与其它7个病毒株均来源于同一个进化枝,属于基因Ⅰ型。

中国鹿源致病性大肠杆菌的分离鉴定及毒力基因分析

目的对中国东北地区鹿源致病性大肠杆菌血清型及携带毒力基因情况进行研究。方法根据大肠杆菌的不同毒力基因,设计了9对引物,应用单一PCR及多重PCR扩增,对85株大肠杆菌进行毒力基因检测。结果对中国东北地区患病鹿进行大肠杆菌的分离和鉴定,分离出85株鹿源大肠杆菌,通过血清学分类,鉴定出55株大肠杆菌,分别属于37个不同血清型,其中,EAST1基因阳性菌61株(71.76%),VT1基因阳性菌31株(36.47%),VT2基因阳性菌22株(25.88%),eae A阳性菌1株(1.18%),flich7基因阳性菌6株(7.06%),STb阳性菌1株(1.18%),LT阳性菌2株(2.36%),未检到STa、SLT-2e阳性菌。结论本研究初步阐明了我国东北地区鹿大肠杆菌病的主要血清型及主要致病基因,在临床治疗上应予重视。

鹿源肠道致病性大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

对吉林省敦化及双阳两地区腹泻鹿进行了大肠杆菌的分离和鉴定,分离出68株鹿大肠杆菌,经过肠道致病性大肠杆菌血清学鉴定,其中10株为致病性大肠杆菌(EPEC),通过对耐药性监测,发现分离的菌株对多粘菌素B、红霉素、克林霉素、头孢氨苄、复方新诺明、青霉素G呈现不同程度的耐药;而对头孢唑啉、环丙沙星、阿莫西林、卡那霉素、庆大霉素、依诺沙星较为敏感,可以做为临床用药的参考。

吉林省鹿源牛分枝杆菌MIRU分型研究

为了解鹿源牛分枝杆菌(M.bovis)基因多态性,初步建立适合吉林省鹿源M.bovis的基因分型方法,本研究利用12个分枝杆菌散在重复单位(MIRU)位点,对96株鹿源M.bovis吉林分离株进行MIRU基因分型研究。结果显示,12个位点中有8个位点(MIRU2、4、16、23、27、31、39及40)具有多态性,可以将96株菌株分为11个基因型,分辨力指数(H)为0.893,其中6个中度多态性位点的分辨力为0.877。其余4个位点(MIRU10、20、24及26)未显示多态性。研究结果表明,鹿源M.bovis与其他宿主来源的M.bovis在基因分型上存在差异。MIRU位点对鹿源M.bovis具有良好的分辨力,该分型方法可以作为鹿结核病分子流行病学研究的有效方法。

鹿源枯草芽孢杆菌对小鼠生长性能、细菌易位、血清生化指标和血液学指标的影响

对鹿瘤胃内分离鉴定的枯草芽孢杆菌D-12菌株的安全性进行评价,以确定其是否能作为安全、可食用的益生菌,并用于后续产品研发。通过小鼠连续口服枯草芽孢杆菌D-12株28 d喂养毒性试验,观察小鼠行为、活动、饮食、粪便等体征,统计小鼠体重和采食量,计算脏器指数,并对其血液生化指标、细菌易位、血液学指标进行检测。结果显示,小鼠无异常表现;各组小鼠体重、采食量、内脏指数和血清生化指标均无显著差异,血液学指标正常,无细菌易位现象。枯草芽孢杆菌D-12对小鼠安全、无毒副作用。

鹿源中药材的DNA条形码鉴定研究进展

鹿源中药材的来源复杂多样,鉴定方法也有很多,如基原鉴定、性状鉴定、显微鉴定和理化鉴定等。但在实际应用中,鹿源中药材的鉴定难度极大,一般的鉴定方法很难满足其鉴定要求,因此需要一种快速有效的鉴定方法来鉴定鹿源的真伪和质量。本文以网络文献检索与手工检索相结合的方法,梳理了近20年的文献进行综述。

鹿源药材保健食品研发现状与方向

随着人们生活水平提高及保健意识的增强,传统的滋补保健名品鹿源药材倍受人们青睐,对鹿源药材保健食品市场需求不断增加,使新产品研发进入快速发展期。文中通过统计已批准的鹿源药材保健食品的各项指标(分类及分布情况;功效成分;保健功能;剂型选择;原料配伍),总结分析了新形势下鹿源药材保健食品研发的现状和存在的问题,提出了未来的研发方向和应对措施。以期对鹿源药材保健食品产业的发展提供一定的借鉴和参考。

鹿源食品生产现状及发展对策分析

随着市场需求的增加和我国食品工业的发展,鹿源食品的生产应运而生。文中通过统计已获证鹿源食品企业的区域分布、注册年份、规模、生产经营范围等,了解到近年来我国鹿源食品行业的发展状况,并总结分析了新形势下鹿源食品发展的现状和存在的问题,提出了鹿源食品未来的发展对策和研发方向。

我国鹿源产品质量控制评价标准体系的建立现状及展望

本文就鹿源产品在食品、保健食品及药品等领域的开发应用进展,对各领域的相关质量控制评价标准体系的建立现状进行了整理,并对标准体系中存在的问题进行分析和展望,以供行业内人士及相关监管部门参考,从而促进鹿源产业体系的发展。

鸭、马、鹿源性成分实时等温扩增检测方法的建立

建立了一种快速检测鸭、马、鹿动物源性成分的实时荧光环介导等温扩增法。针对鸭、马、鹿物种COXIII,atpase6,COXⅠ特异性基因分别设计LAMP引物,反应加入荧光染料SYTO-9,在63℃条件下反应40min,通过实时检测荧光强度判断反应结果,结果显示鸭、鹿源性成分的检测灵敏度为1pg,马源性成分的检测灵敏度为100fg。对模拟掺杂肉制品检测时,掺杂鸭肉、马肉、鹿肉的检出限为0.01%。本文所建立的LAMP法特异性强、灵敏度高,能有效的对肉制品掺杂的鸭、马、鹿源性成分进行检测,可作为肉类鉴别的一种快速检测方法。

2015年版《中华人民共和国药典》收载的鹿源药材中硫酸软骨素含量分析

目的:研究2015年版《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)收载的鹿源药材中硫酸软骨素的含量差异。方法:采用稀碱-浓盐法提取,硫酸软骨素ABC酶酶解样品中的硫酸软骨素,应用高效液相色谱法对样品中的总硫酸软骨素及硫酸软骨素A、B、C含量进行测定;色谱条件:Hypersil SAX强阴离子硅胶色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以2 mol·L^(-1)的氯化钠溶液(盐酸调pH至3.5)和水(盐酸调pH至3.5)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长232 nm,柱温40℃。结果:梅花鹿鹿茸、鹿角(鹿角脱盘)、鹿角胶(鹿角脱盘胶)、鹿角霜(鹿角脱盘霜)中硫酸软骨素含量分别为2.06、0.46(0.42)、0.93(1.10)、0.22(0.17)g·kg^(-1);马鹿鹿茸、鹿角(鹿角脱盘)、鹿角胶(鹿角脱盘胶)、鹿角霜(鹿角脱盘霜)中硫酸软骨素含量分别为1.83、0.41(0.34)、0.91(0.87)、0.19(0.15)g·kg^(-1)。结论:《中国药典》收载的鹿源药材中硫酸软骨素的含量差异很大,鹿茸中的最高,鹿角胶、鹿角、鹿角霜中的依次递减。

桂中坳陷下石炭统鹿寨组页岩气研究

桂中坳陷石炭系发现多处油气苗及沥青，具有良好的页岩气储集条件。对桂中坳陷下石炭统鹿寨组(C J )烃源岩进行了研究，认为烃源岩主要为台前盆地相暗色炭质页岩，鹿寨组下部页岩具有良好的生烃条件。烃源岩有机质丰度高，平均TOC含量为3.08°% ，干酪根类型为IIi 型和II2,来源于水生浮游生物和菌藻类母质，烃源岩最高热解峰温度460~560°C ，处于高成熟阶段，现今以生成天然气为主。页岩中脆性矿物含量为35.6% ~75.2%，粘土矿物含量为3.1%~62.1%，页岩硅质来源中生物成因硅质具有较大贡献，鹿寨组底部富有机质页岩段发育的有机质微孔隙和纳米级一微米级微裂缝是页岩气富集的主要空间。桂中坳陷经历多期叠加构造改造，抬升剥蚀对页岩气保存有重要影响，断层和岩浆热液活动对页岩气保存也不利。断层影响相对较小、盖层厚度超过1 8 0 m 的桂中坳陷西北部地区是下石炭统页岩气勘探的有利方向。

Velvet antler polypeptide is able to induce differentiation of neural stem cells towards neurons in vitro

OBJECTIVE: To investigate the neural differentiation capacity of water extraction of velvet antler.METHODS: Velvet antler(Cervus Nippon Temminck) polypeptide(VAP) was used to differentiate neural stem cells(NSCs) towards neurons in the study. Firstly, we obtain the polypeptides of VAP by water extraction. Secondly, we observed the morphology, assayed the factors in the media by enzyme-linked immunosorbent assay, and detected the special neural molecules by immuno fl uorescence staining. NSCs were cultured on the cell climbing film. After neuronal differentiation, differentiated NSCs were mounted for immunocytochemistry with immunofluorescence technique.RESULTS: The differentiating cells look like neuron,some special factors, such as Glial cell line-derived neurotrophic factor, nerve growth factor, in the media can be detected while differentiated neuron-like cells can express the special neural molecules.CONCLUSION: Differentiation of NSCs towards neurons can be induced by velvet antler polypeptide.