鹿筋活性成分及其应用研究进展

作为传统中药材,梅花鹿鹿筋具有强筋健骨、养肝补肾、滋阳祛风除湿的功效,富含多种活性成分,是制备生物活性肽的优质资源。鹿筋活性成分的研究发展迅速,因其具有选择性生理功能、易于消化吸收和不会产生毒副作用等显著优势在食品和药品领域广泛应用。目前,对其有效成分的提取、分离、提纯以及功能评估等方面是热点话题。介绍了鹿筋活性成分及其应用研究进展,总结了鹿筋中胶原蛋白和活性肽的作用。有效利用鹿筋这一宝贵资源,将会提高我国鹿筋产品的利用率和增值效益,挖掘出鹿筋的特殊功能价值,为鹿筋产品的医药、保健品等领域的扩大以及未来研究的发展奠定基础。

鹿筋胶原蛋白提取工艺优化研究

以梅花鹿鹿筋为试材,采用单因素试验和正交试验优化鹿筋胶原蛋白的提取工艺,经过试验获得最佳工艺条件为A_(1)B_(2)C_(2)D_(2),即醋酸浓度为0.5 mol/L,料液比为1∶40 g/mL,浸泡时间为30 h,胃蛋白酶与底物比例为1∶700,在此工艺条件下,鹿筋胶原蛋白回收率可达59%。

鹿筋胶原对维甲酸所致大鼠骨质疏松的治疗作用

目的:研究鹿筋胶原对维甲酸所致大鼠骨质疏松的治疗作用。方法:雄性Wistar大鼠,随机分为正常对照组、模型组及鹿筋胶原高、中、低剂量组,采用维甲酸诱导大鼠骨质疏松的模型,观察经鹿筋胶原治疗前后大鼠体质量、骨质量、骨密度、骨组织形态计量学及血浆中磷、钙、碱性磷酸酶(ALP)及骨力学指标的变化。结果:与模型组比较,经鹿筋胶原治疗后,维甲酸所致骨质疏松大鼠体质量、骨密度、骨质量均有不同程度的升高,骨组织形态计量学参数变化均有显著性差异,血浆中ALP显著降低,Ca、P含量升高,骨力学各指标显著升高。结论:鹿筋胶原对维甲酸诱导的大鼠骨质疏松有一定的防治作用。

梅花鹿鹿筋胶原蛋白提取工艺条件优化

为应用胃蛋白酶酶解法从鹿筋中提取制备胶原蛋白。采用单因素试验和正交试验筛选出鹿筋胶原蛋白提取的最佳条件为醋酸体积分数5.5%、料液比1:7(mL/g)、浸提时间14h,胃蛋白酶与底物比1:1000(g/g)、酶解时间24h。验证实验结果表明,采用本方法提取的鹿筋胶原蛋白收率为74.56%,蛋白含量为65.54%。本实验优选所得梅花鹿鹿筋胶原蛋白提取工艺,方法简便,提取率高。

鹿筋胶原抗炎镇痛作用研究

目的:探讨鹿筋胶原的抗炎镇痛作用。方法:通过小鼠足肿胀、耳廓肿胀、皮肤毛细血管通透性的实验研究鹿筋胶原的抗炎作用;采用热板法和醋酸扭体法研究鹿筋胶原的镇痛作用。结果:鹿筋胶原能有效的抑制角叉菜胶引起的足肿胀和二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀;改善毛细血管的通透性,降低腹腔因醋酸导致的炎性渗出;同时提高热板法、扭体法所致的小鼠痛阈,延长疼痛潜伏期。结论:鹿筋胶原具有明显抗炎、镇痛作用。

鹿筋胶原抗炎免疫作用研究

目的研究鹿筋胶原的抗炎免疫作用。方法通过大鼠足肿胀模型和大鼠棉球肉芽肿模型研究鹿筋胶原的抗炎作用;通过观察小鼠对2,4二硝基氯苯(DNCB)所致的迟发型超敏反应(DTH)的影响和网状内皮系统吞噬功能的影响研究鹿筋胶原的免疫调节作用。结果鹿筋胶原能有效地抑制角叉菜胶引起的足肿胀;减轻棉球肉芽肿产生的炎症反应;提高二硝基氯苯所致小鼠迟发型超敏反应和小鼠巨噬细胞吞噬功能。结论鹿筋胶原具有明显的抗炎、免疫调节作用。

高压脉冲电场法提取鹿筋蛋白质和浸膏的工艺研究

目的考察快速提取鹿筋蛋白质和浸膏的最佳工艺。方法用正交试验法,以电场强度、脉冲数、料液比等3项因素设计3个水平进行正交试验。结果鹿筋蛋白质最佳提取工艺为电场强度20 kV/cm,脉冲数8,料液比1:25。鹿筋浸膏最佳提取工艺为电场强度16 kV/cm,脉冲数10,料液比1:25。结论此提取工艺可行,经济、省时、回收率高。

鹿筋及其炮制品化学成分的初步研究

用50％乙醇浸出物、氯仿浸出物、总氮、总灰分、10种氨基酸、20种无机元素和2种激素作指标,对鹿筋及其炮制品成分作了初步分析,鹿筋炮制前后多数成分无明显差异,炮制后能达到便于粉碎和浸出目的。

鹿筋及其混伪品的性状鉴别

本文对鹿科鹿属动物梅花鹿、马鹿、水鹿;非鹿属动物驼鹿和牛、羊、猪的四肢干燥筋及进口新西兰鹿筋进行性状比较鉴别。

鹿筋胶原蛋白提取条件优化

为对鹿筋胶原蛋白提取条件进行优化,该试验采用单因素分析及正交试验筛选出鹿筋胶原蛋白提取条件,以及提取产物对体外培养MC3T3成骨细胞的增殖作用。结果表明:最佳提取条件为醋酸体积分数5%,浸泡时间48 h,煎煮时间1.5 h,胃蛋白酶用量1∶1000,酶解时间6 h,鹿筋胶原蛋白回收率58.56%,蛋白质含量48.4%。优化后的条件下提取的鹿筋胶原蛋白对MC3T3细胞具有显著的增殖作用,其增殖作用呈量效关系,当浓度为8 mg/mL时,增殖作用最为显著。因此,鹿筋胶原蛋白提取条件优化后,回收率增加;鹿筋胶原蛋白对体外培养的成骨细胞具有明显的增殖作用,为其产品的开发提供理论依据。

响应面法优化鹿筋蛋白提取工艺及体外抗类风湿性关节炎活性

目的:优化鹿筋蛋白提取工艺,探究其对类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞(MH7A)增殖及炎症因子分泌的影响。方法:以料液比、提取温度、提取时间为自变量,鹿筋蛋白含量为因变量,进行单因素实验,结合Box-Behnken试验设计,获得鹿筋蛋白最佳提取工艺。采用60 ng/mL肿瘤坏死因子-α(TNF-α)体外诱导MH7A细胞,MTT法测定不同浓度的(25、50、100、200μg/mL)鹿筋蛋白对MH7A细胞增殖抑制活性的影响;酶联免疫法测定细胞上清液中NO(一氧化氮)、白细胞介素-6(IL-6)、TNF-α含量。结果:鹿筋蛋白最佳提取条件为料液比1∶21 g/mL、提取温度88℃、提取时间8.6 h,此条件下测得鹿筋蛋白含量为12.53%。体外活性实验结果表明,与模型组比较,不同浓度(25、50、100、200μg/mL)的鹿筋蛋白均可显著(P<0.05)抑制MH7A细胞的增殖和NO、IL-6、TNF-α的释放(P<0.05),模型组的NO、IL-6、TNF-α释放量分别为:4.07、21.95、16.31 pg/mL,在100μg/mL质量浓度下,鹿筋蛋白对上述三种炎症因子释放的抑制作用最显著(P<0.05),其释放量分别为:1.60、13.60、7.29 pg/mL。结论:鹿筋蛋白通过抑制TNF-α诱导的MH7A细胞增殖,同时减少炎症因子NO、IL-6、TNF-α的释放,发挥其抗类风湿性关节炎的作用。本研究为研究鹿筋蛋白的制备工艺提供参考,并证明鹿筋蛋白具有较好的体外抗类风湿性关节炎活性。

鹿筋与狍筋的比较鉴别

狍属鹿科美洲鹿亚科动物,第2、5侧掌骨仍留远端,而梅花鹿、马鹿的相应第2、5侧掌骨留近端,故商品狍筋可见此骨,而梅花鹿、马鹿筋商品见不到此骨,两者有较大的区别。

鹿筋及其伪充品的性状鉴别

鹿筋为常用的贵细药材,具有补劳续绝,强筋健骨之功能;常用于治肾虚足膝无力,腰痛,劳损绝伤,转筋等症.鹿筋常有伪充品,近年市场开放更为多见.我们经过了近三年对几十批次鹿筋商品的检验,积累了性状鉴别鹿筋及其伪充品的经验,现介绍于下,供鹿筋鉴别时参考。一、鹿筋的性状特征药材鹿筋主要来源于鹿科动物梅花鹿Cervus nippon Temminck或马鹿C.elaphusLinnaeus的四肢干燥筋。

砂炒鹿筋砂温范围探讨

鹿筋为鹿科动物梅花鹿或马鹿的四肢干燥筋。具有壮筋骨,补虚劳,填精益髓之功。为了便于粉碎和煎煮,常用砂炒法炮制。在加工炮制中,其质量不稳定,难以控制。我们在摸索中发现影响质量的关键因素主要是砂温,为此笔者试对砂炒鹿筋砂温范围进行探讨。结果认为145℃～175℃最为适宜。

酶解前后鹿筋体外抗炎活性与其氨基酸组成的相关性

目的:分析酶解前后鹿筋对TNF-α诱导的MH7A细胞抗炎作用的影响。方法:采用MTT法检测鹿筋天然蛋白(DSNP)和鹿筋酶解蛋白(DSEP)不同分子量的超滤组分的增殖抑制活性,筛选增殖抑制活性最佳的组分,测定活性组分对MH7A细胞分泌炎症因子(NO、IL-6)的影响,分析鹿筋酶解前后活性组分中氨基酸组成及含量。采用多元统计分析找出酶解前后鹿筋的差异性氨基酸与抑制MH7A细胞分泌炎症因子之间的关系。结果:酶解前后鹿筋不同的超滤组分中,DSNP-5、DSEP-5对MH7A细胞增殖抑制的作用最强(P<0.05),且能够抑制细胞炎症因子NO、IL-6的分泌。质量浓度为25~200μg/mL时,DSNP-5给药组炎症因子(NO、IL-6)的释放量均低于DSEP-5给药组,具有显著差异(P<0.05),说明DSNP-5抑制能力更强。酶解前后鹿筋的氨基酸组成基本一致,但含量存在明显差异,其中甘氨酸既是特征性差异成分,又与抑制MH7A细胞分泌炎症因子NO、IL-6密切相关,且DSNP-5的甘氨酸含量(31.01%)高于DSEP-5的甘氨酸含量(28.91%)。结论:甘氨酸为鹿筋酶解前后与抗炎活性相关的差异氨基酸,初步探究酶解对鹿筋抗炎活性的影响,为鹿筋的开发应用提供可靠依据。

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鹿筋化学成分初步分析

鹿筋为鹿科动物梅花鹿Cerrus nippon Te mmincR或马鹿C．elaphusL，的四肢干燥筋。鹿筋有效成分不清，在制订本品卫生部部颁标准时，对梅花鹿筋和马鹿筋的化学成分作了初步分析。现将结果报道如下：