鹿筋胶原蛋白多肽透皮吸收试验研究

研究2种酶解法制备得到的鹿筋胶原蛋白多肽对体外皮肤吸收的影响。采用单酶法和双酶法制备得到2种鹿筋胶原蛋白多肽DSCP-1和DSCP-2,以离体小鼠的皮肤为透皮屏障,应用透皮吸收仪,分别于不同时间取样,测定透皮液中蛋白质的透皮率和分子量分布。结果表明,鹿筋胶原蛋白多肽经透皮试验后,透皮液中分子质量主要分布在5~26 k Da之间,约占80%以上;DSCP-1的透皮率为3.83%,DSCP-2的透皮率为6.15%。2种酶解方法制备得到的胶原蛋白多肽均可透过皮肤,双酶法制备得到的鹿筋胶原蛋白多肽更易于透过皮肤。

响应面法优化鹿筋胶原蛋白酶解工艺及其氨基酸含量

对鹿筋进行深入加工、开发、利用,采用响应面法优化鹿筋胶原蛋白酶解工艺。以酶解温度、酶解时间、pH为自变量,鹿筋胶原蛋白水解度为因变量,进行单因素试验,采用Box-Behnken法进行响应面试验设计,确定鹿筋胶原蛋白的最佳酶解工艺。通过氨基酸分析,初步研究鹿筋胶原蛋白的特征性质。结果表明,最佳酶解工艺为pH 9.4,酶解时间5 h,酶解温度53℃(初始底物浓度3%、酶底比1%)。在此条件下,水解度为31.07%。氨基酸分析结果表明,鹿筋胶原蛋白的氨基酸组成中,甘氨酸含量最高,约占氨基酸总含量的30.25%,同时脯氨酸和羟脯氨酸含量也较高,分别占氨基酸总含量的8.24%和6.05%,符合胶原蛋白特征性质。