基于Hippo信号通路探讨鹿茸提取液对BMSCs成骨分化的影响

目的观察鹿茸提取液对SD大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向成骨分化及Hippo信号通路的影响。方法将3、4代BMSCs随机分为正常组、诱导组以及鹿茸组。酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法分别检测6、12 d以及18 d碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的活性及水平;茜素红染色法检测3组BMSCs钙结节生长增殖情况;qRT-PCR法和蛋白质印迹法(Western blot)检测RUNX2及Hippo信号通路MST1和YAP的转录表达与蛋白表达水平。结果ELISA实验结果表明,鹿茸提取液可以提高ALP的活性,12 d鹿茸组ALP的活性达到最高,18 d鹿茸组ALP的活性显著上调(P<0.01);茜素红实验结果显示,鹿茸组观察到大量且密集的钙结节形成,提示鹿茸提取液可有效促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞转化;qRT-PCR的实验结果表明,与正常组相比,鹿茸组YAP和RUNX2 mRNA显著上调(P<0.01);Western blot法检测结果显示,鹿茸提取液可显著上调YAP蛋白表达水平(P<0.01),并且明显上调RUNX2蛋白表达水平(P<0.05)。结论鹿茸提取液能够影响RUNX2以及Hippo信号通路中MST1和YAP相关蛋白进而推进骨髓间充质干细胞向成骨细胞的转化。