梅花鹿茸胶原酶解物对去势大鼠骨质疏松症防治作用的实验研究(英文)

观察梅花鹿茸胶原酶解物(CSDV)对去势大鼠骨质疏松症防治作用的实验研究。通过对模型组、给药组和假手术组在形态计量学指标,生物力学指标和血清生化指标的评价,考察鹿茸胶原酶解物的作用。结果表明CSDV能够明显提高去势骨质疏松症大鼠骨密度,调节血清碱性磷酸酶水平和骨钙素水平。说明鹿茸胶原酶解物在防治去势大鼠骨质疏松症方面具有明显作用。

梅花鹿茸胶原酶解物对维甲酸致大鼠骨质疏松防治作用的实验研究

目的:观察梅花鹿茸胶原酶解物(CSDV)对维甲酸诱导大鼠骨质疏松症的影响。方法:大白鼠50只,随机分为5组:对照组,模型组和CSDV高、中、低剂量组(0.4,0.2,0.1 g.kg-1.d-1)。通过灌胃给予维甲酸70 mg.kg-1.d-1,连续14d,建立大鼠骨质疏松模型。造模同时灌胃给予鹿茸胶原酶解物治疗30 d后,处死动物。取血分离血清,测定血清钙、磷、碱性磷酸酶含量;取左侧股骨称重,计算骨重系数,做骨生物力学强度测定;取右侧股骨,做骨组织形态计量测定。结果:与模型组比较,CSDV能明显改善对维甲酸诱导大鼠的骨密度降低,血清碱性磷酸酶升高,钙、磷含量降低;改善骨病理形态发生的明显改变;骨小梁个数减少、平均骨小梁宽度变窄、平均骨小梁间距变大、骨体积降低、平均骨皮质厚度变薄;改善骨生物力学强度指标;股最大载荷降低、最大挠度变短、骨应力减小、骨应变量降低等骨质疏松改变。但上述功能随鹿茸胶原酶解物给药剂量变化而不同。结论:鹿茸胶原酶解物中剂量组能使骨量增加,骨组织显微结构趋于正常,骨生物力学强度增加,对大鼠骨质疏松有防治作用。

梅花鹿鹿茸I型胶原诱导骨髓基质干细胞成骨分化及其分子机制的研究

目的 探讨梅花鹿鹿茸Ⅰ型胶原诱导骨髓基质干细胞向成骨细胞分化及其分子机制.方法 采用CCK-8法选择诱导分化和促成骨的最佳浓度;采用分光光度法检测ALP活性,并用改良Gomori法进行ALP染色,采用茜素红法进行钙化结节染色.采用RT-PCR法检测成骨分化的关键因子RunX2 mRNA的表达,成骨标志物ALP mRNA的表达,并进行半定量分析.结果 2.5g·L-1的鹿茸Ⅰ型胶原促进BMSCs的增殖使ALP活性降低,5～40 g·L-1的鹿茸Ⅰ型胶原抑制BMSCs的增殖,呈时间、剂量依赖性,5g·L-1的鹿茸Ⅰ型胶原使ALP活性增加显著且促进钙化结节的形成.RT-PCR检测5g·L-1的鹿茸Ⅰ型胶原上调RunX2、ALP基因的表达,而2.5g·L-1的鹿茸Ⅰ型胶原则下调RunX2、ALP基因的表达.结论 梅花鹿鹿茸Ⅰ型胶原可以通过上调RunX2基因的表达诱导BMSCs向OB分化,且与浓度密切相关.

鹿茸Ⅰ型胶原对骨髓间充质干细胞增殖的影响及其与Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖表达的关系

目的:观察鹿茸Ⅰ型胶原(VACTⅠ)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖及细胞周期的影响,探讨其与Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖表达的关系。方法:选取健康雄性4周龄SD大鼠,差时贴壁法提取BMSCs并传代培养。实验分为空白对照组、转化生长因子β3(TGF-β3)(10μg·L^-1)组和不同浓度(1.25、2.50、5.00、10.00和20.00 g·L^-1)VACTⅠ组,CCK-8法检测各组BMSCs增殖率,ELISA法检测各组细胞上清液中骨形态生成蛋白4(BMP-4)和转录因子Sox9水平,流式细胞术检测各组不同细胞周期BMSCs百分率,RT-PCR法和Western blotting法分别检测各组细胞中Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖mRNA和蛋白表达水平。结果:与空白对照组比较,2.50~20.00 g·L^-1 VACTⅠ组大鼠BMSCs增殖率明显降低(P<0.05或P<0.01);ELISA法,与空白对照组比较,TGF-β3组和不同浓度VACTⅠ组细胞上清液中BMP-4和Sox9水平明显升高(P<0.05或P<0.01);流式细胞术,与空白对照组比较,TGF-β3组和不同浓度VACTⅠ组不同细胞周期BMSCs百分率差异无统计学意义(P>0.05);RT-PCR法,与空白对照组比较,TGF-β3组和不同浓度VACTⅠ组细胞中Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖mRNA表达水平明显升高(P<0.05);Western blotting法,与空白对照组比较,TGF-β3组和不同浓度VACTⅠ组细胞Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论:VACTⅠ可促进BMSCs释放BMP-4和Sox9,提高Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖表达水平,抑制BMSCs增殖,是一种潜在的成软骨分化诱导剂。

梅花鹿鹿茸Ⅰ型胶原对大鼠成骨样细胞(ROS1728)的影响及其分子机制的研究

该文研究梅花鹿鹿茸I型胶原(SPC-I)对大鼠成骨样细胞ROS1728的影响,为SPC-I抗骨质疏松的治疗提供理论依据。采用贴壁法培养大鼠成骨样细胞ROS1728,通过CCK-8法检测SPC-I对ROS1728细胞增殖的影响,利用RT-PCR法检测成骨相关基因Runx2,osernix,ALP,Coll-I,OC的表达,利用Western-bolt法检测Runx2蛋白的表达。结果表明SPC-I质量浓度5g·L^(-1)组轻度抑制ROS1728细胞的增殖,但能够明显促进ROS1728细胞特异性转录因子Runx2,osterix m RNA的表达,Runx2蛋白的表达,以及标志基因ALP,Coll-I,OC m RNA的表达(P<0.01),并且呈现出时间依赖性。SPC-I质量浓度2.5,10 g·L^(-1)组均明显抑制ROS1728细胞的增殖(P<0.01),并抑制相关基因的表达。该实验证明质量浓度5 g·L^(-1)组轻度抑制ROS1728细胞的增殖,但可以明显增强ROS1728细胞的功能,通过调控Runx2基因的表达,促进ROS1728细胞的分化、成熟。