不同处理对鹿茸草盆栽种植的影响

为探索一种可产业化人工栽培鹿茸草的技术路径,以鹿茸草组培生根苗为材料,研究不同组合基质配方、松针不同腐熟处理和不同覆盖厚度以及不同覆盖时间、与不同伴生植物生长对鹿茸草生长的影响。结果表明,松针、草炭土、河沙按照1︰1︰3体积比混合最适合鹿茸草生长,20 d后成活率达83%,2个月后成活率73%,苗高6.3 cm,萌发数5个,单株重3.1 g;在35℃,含水量50%条件下,发酵10 d后松针覆盖效果更佳,2月后苗高6.3 cm,萌发数5个,单株重3.1 g;种植后5 cm松针覆盖7 d薄膜覆盖保湿,7 d后去掉薄膜保留松针在表面对鹿茸草后期成活率及生长量效果最佳,2个月后成活率达73%,苗高6.3 cm,萌发数5个;几种不同的伴生植物中,选择黄栀子作为伴生植物生长状态最好,1年后成活率可达92%,株高12.5 cm,冠幅15.4 cm,分枝数8个。

鹿茸草的本草考证

中药鹿茸草性平,味微苦涩,具有清热解毒、祛风止痛、凉血止血的功效,是炎宁糖浆的主要药味之一,具有较好的抗炎、抗菌效果。通过查阅本草著作、地方标准、不同版本《中华人民共和国药典》及已发表论文,对鹿茸草的基原、名称、性味、功效及研究进展进行梳理,结果表明,中药鹿茸草的基原植物为沙氏鹿茸草Monochasma savatieri Franch.ex Maxim.,其与鹿茸草M.sheareri Maxim.ex Franch.et Savat.存在混用情况。沙氏鹿茸草中的苯乙醇苷类成分具有较好的抗氧化、抗炎活性。沙氏鹿茸草已实现人工种植,其具有半寄生的生物学特性,施加外源激素、控制土壤含水量等方法可以促进沙氏鹿茸草吸器的形成,提高其存活率。

“根际土-沙氏鹿茸草-寄主植物”连续体碳氮磷生态化学计量特征及其耦合关系

以半寄生药用植物沙氏鹿茸草各器官、寄主白花檵木各器官以及沙氏鹿茸草根际土壤为研究对象,采用异速生长分析、冗余分析等方法研究“根际土-沙氏鹿茸草-寄主植物”连续体的碳氮磷化学计量特征及耦合关系,以期揭示连续体中养分流动规律、沙氏鹿茸草及其寄主的养分限制情况及养分利用策略。结果表明:(1)沙氏鹿茸草根际土壤具有高C、高N而缺P的特征,养分有效性低。根据N/P阈值假说,推测沙氏鹿茸草及其寄主主要受P限制。(2)异速生长分析显示沙氏鹿茸草各器官营养元素累积速度表现为C<N<P,沙氏鹿茸草繁殖器官及寄主叶比其他器官养分含量和利用效率更高,符合生长速率假说。(3)与寄主相比,沙氏鹿茸草具有较高的N、P含量和较低的C/N、C/P,属于资源获取利用型;寄主在固C上具有优势,属于资源保守利用型。(4)连续体碳氮磷化学计量特征耦合关系中,沙氏鹿茸草与其根际土壤的养分相关性比与寄主更紧密。冗余分析显示沙氏鹿茸草根际土壤全N含量及C/P,寄主根N/P是影响沙氏鹿茸草各器官碳氮磷化学计量特征的重要因子。综上,沙氏鹿茸草N和P养分来源主要来自于土壤而非寄主;在沙氏鹿茸草生产中,应注意种植土壤中氮磷肥尤其磷肥的合理补施。

鹿茸草全长转录组测序与次生代谢产物生物合成相关基因的挖掘

为获得鹿茸草的全长转录组信息,挖掘鹿茸草次生代谢化合物生物合成途径相关酶的基因,该文基于单分子测序技术,利用Pacbio高通量测序平台,对鹿茸草进行全长转录组测序,共获得48005条去冗余的高质量转录本,与NR、Swiss-Prot、GO、KEGG等8个数据库进行BLAST比对,共有45362个转录本被成功注释,注释率为94.50%.其中有389条转录本被注释到KEGG的10条标准次生代谢生物合成通路中.对转录组数据进一步分析发现:参与鹿茸草苯丙素类生物合成的转录本有194条,参与生物碱类生物合成的转录本有115条,参与类黄酮化合物生物合成的转录本有23条,参与其他次生代谢产物的转录本有57条,参与次生代谢后氧化与糖基化修饰的转录本有204条.鹿茸草全长转录组的获得极大地丰富了鹿茸草的遗传信息,初步揭示了参与鹿茸草次生代谢产物合成相关的基因通路,为深入研究鹿茸草次生代谢产物合成途径关键酶的功能及其调控机制奠定了基础.

鹿茸草抗炎、止咳作用的初步研究

目的初步考察鹿茸草的抗炎、止咳作用。方法采用二甲苯致小鼠耳肿胀、角叉菜胶致小鼠足肿胀实验观察鹿茸草的抗炎作用,采用25%氨水引咳法观察其对小鼠的止咳作用。结果鹿茸草水提液对角叉菜胶致小鼠足肿胀有抑制作用,其中中剂量组作用最强(P<0.01);鹿茸草水提液对延长小鼠咳嗽潜伏期有作用,高剂量组对氨水致小鼠咳嗽次数有显著抑制作用(P<0.01)。结论鹿茸草具有明显的抗炎和止咳等药理作用。

不同产地沙氏鹿茸草全株中黄酮类和苯乙醇苷类成分含量的比较

沙氏鹿茸草(Monochasma savatieri Franch.ex Maxim.)的干燥全草可药用,具有抑菌、抗炎和抗病毒等功效[1-2]。目前,已从沙氏鹿茸草中分离出黄酮类(木犀草素)、苯乙醇苷类(类叶升麻苷、异类叶升麻苷和torenoside B等)、酚酸类和三萜类化合物[3-5],其中,苯乙醇苷类是其全草的代表性化学成分,对治疗呼吸道感染或肺炎有意义[6];类叶升麻苷,具有抗骨质疏松、抗炎和抗衰老等药理活性[7-9];木犀草素是主要的黄酮类成分之一,具有抗氧化、抗菌、抗炎和抗肿瘤等药理作用[10]。药用植物的活性成分含量除与其本身的遗传因子有关外,还受生境条件显著影响[11]。因此,了解不同产地沙氏鹿茸草全株中有效成分含量的差异有助于评价其药材质量。

绵毛鹿茸草的次生代谢产物含量与抑菌活性分析

[目的]绵毛鹿茸草的次生代谢产物含量与抑菌活性分析。[方法]对绵毛鹿茸草不同提取液的总黄酮、总绿原酸、总生物碱、总皂甙、游离蒽醌等次生代谢产物含量和抑菌活性进行测定。[结果]显示:70%乙醇提取液、60%丙酮提取液对肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌有中等抑制作用,水提取液有弱抑制作用;70%乙醇提取液是肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌的良好抑制剂,60%丙酮提取液是大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的良好抑制剂。[结论]绵毛鹿茸草提取掖对大肠杆菌的抑菌活性与绿原酸的含量具有显著的正性关,对枯草芽孢杆菌的抑菌活性与蒽醌之间存在极显著的相关性。

鹿茸草种子的休眠与萌发

将新收获的鹿茸草种子在25℃和30℃恒温条件下或20～30℃室内变温条件下做发芽试验均未能发芽,但TTC染色试验结果表明其具有生活力,由此证明该种子具有休眠特性。打破休眠试验结果表明:2～5℃低温湿藏处理80 d可使其发芽率达67.5%,用200 mg/L GA3浸泡48 h可使其发芽率达86.9%。干种子在-18℃的密封条件下贮存2年后,仍保持有52%的发芽能力。

鹿茸草中木犀草素含量测定

目的:建立高效液相色谱法测定鹿茸草中木犀草素的含量方法。方法:采用Agilent XDB C18(5μm,250×4.6mm)色谱柱,以甲醇-0.1%磷酸(55:45)为流动相,检测波长350nm,流速1.0mL.min-1。结果:在25.02～150.12μg.mL-1质量浓度范围内线性关系良好,平均加样回收率为103.1%,RSD为1.27%(n=6)。结论:所建立的含量测定方法简便可行,重复性良好,可用于鹿茸草药材的质量监控。

绒毛鹿茸草多糖提取工艺优化及多糖体外抗氧化研究

用正交试验法优选绒毛鹿茸草多糖的提取工艺及多糖体外抗氧化研究。在对温度、时间、料水比进行单因素试验的基础上,通过正交试验确定了提取绒毛鹿茸草多糖的最佳工艺条件;通过清除羟基自由基(.OH)和超氧阴离子自由基(O2-.)试验,及模拟胃液条件下清除NO2-试验,研究绒毛鹿茸草多糖体外抗氧化活性。提取最佳工艺条件为:料水比1:20,在100℃下浸提3h,浸提2次;醇沉采用3.5倍体积95%乙醇3h。绒毛鹿茸草多糖浓度在0.4～2.0mg/mL之间时,清除羟基自由基(.OH)呈增长趋势,当浓度达到2.0mg/mL时清除率达45%;多糖浓度在0.1～0.3mg/mL之间时,清除超氧阴离子自由基(O2-.)呈负增长趋势,当浓度达到0.3mg/mL时清除率达-6.39%;多糖浓度在1～5mg/mL之间时清除NO2-呈增长趋势,当浓度达到5mg/mL时清除NO2-能力达到14.3%。对绒毛鹿茸草多糖提取工艺进行研究,可知绒毛鹿茸草多糖清除羟基自由基(.OH)活性较强,有一定清除NO2-能力,能促进超氧阴离子(O2-.)形成。

不同消毒剂和不同浓度激素对鹿茸草外植体诱导研究

以江西赣州信丰县野生鹿茸草茎段和种子为材料,研究了75%酒精、0.1%升汞、2%次氯酸钠等不同消毒剂在不同处理时间对外植体的消毒效果,以及用不同浓度的6-BA和NAA组合对外植体诱导率的影响。结果表明:(1)用75%酒精消毒30s后再用2%次氯酸钠处理10min,对种子消毒效果最好,其污染率只有6%,存活率高达96%;(2)用75%酒精消毒30s后再用0.1%升汞处理7min,对茎段消毒效果较好,其污染率为26%,存活率达35%;(3)最适合江西野生鹿茸草外植体诱导的培养基为MS+6-BA2.5g/L+N AA 0.1mg/L,诱导率高达98%。

鹿茸草的物候与生长更新特征

[目的]阐明鹿茸草物候期和生长更新特征。[方法]采用野外观测和室内试验相结合的方法,对其物候期、营养和生殖生长动态进行调查分析。[结果]在1年中,鹿茸草2月上旬开始萌芽,9月下旬后逐渐停止生长,每株植株平均萌发新枝数量为31.67个,枝条平均长度为19.44 cm。鹿茸草花期自3月上旬开始至6月上旬结束,种子成熟期晚于花期15 d。鹿茸草每植株平均结种数1 053个,年均更新幼苗3.42株;鹿茸草种子25℃培养条件下7 d开始种子萌发,12 d时达到萌发峰值,萌芽率为12.76%。[结论]该研究结果可为鹿茸草的人工育苗栽培提供依据。

鹿茸草组织培养技术研究

以诱导的野生鹿茸草组培苗为材料,研究了鹿茸草分化、壮苗及生根培养基。研究表明:最适合江西野生鹿茸草增值培养的培养基是1/2MS+6BA2.5mg/L+NAA0.2mg/L+白糖30g/L+琼脂粉3.8g/L,增值倍率达3.5倍,壮苗培养基为1/2MS+牛肉蛋白胨1g/L+白糖30g/L+琼脂粉3.8g/L,生根培养基为1/2MS+NAA0.2mg/L+白糖30g/L+琼脂粉3.8g/L。

赤霉素浓度和温度对沙氏鹿茸草种子萌发影响研究

目的:为了揭示沙氏鹿茸草种子萌发适宜条件,为沙氏鹿茸草人工栽培提供科学依据。方法:以当年沙氏鹿茸草种子为材料,研究不同赤霉素浓度(0、100、200、400、600、800、1 000和1 500 mg/L)和发芽温度(20℃恒温、25℃恒温和30℃/20℃变温)对其发芽率、发芽势和发芽指数等萌发特性的影响。结果:沙氏鹿茸草采收一个月内在无赤霉素条件下发芽率亦可达到86%。赤霉素浓度和温度对沙氏鹿茸草种子萌发存在显著作用,除发芽率外,温度对其他萌发参数的影响大于赤霉素浓度。800 mg/L赤霉素+25℃处理的种子萌发时滞和平均萌发历期最短,且发芽率、发芽势、萌发指数、发芽值和峰值最高。结论:沙氏鹿茸草种子在一个月内不存在休眠现象;种子在800 mg/L赤霉素浸泡24 h后25℃条件下发芽快、发芽率高、出苗整齐,可为优化播种育苗技术提供依据。

人为干扰对野生沙氏鹿茸草群落结构的影响

目的:研究不同人为干扰程度下野生沙氏鹿茸草Monochasma savatieri Franch.ex Maxim.群落结构特点,为该物种野生抚育提供参考。方法:采用样地调查法对不同人为干扰程度的3个野生沙氏鹿茸草分布点进行调查,分析其群落的种群组成、结构特征和物种多样性。结果:在调查样地中共计有46科84属95种植物,其中1号地人为干扰最小,乔木层种类较其他两地丰富,主要为马尾松、栎树、黄檀、山矾等,灌木层种类丰富,以白花檵木、柃木、盐肤木、金樱子等植物为优势种;2号地人为干扰程度适中,乔木层植物主要为马尾松,灌木层以白花檵木和臭鸡矢藤为主;3号地人为砍伐最为严重,乔木层主要为马尾松和栎树,灌木层以白花檵木和栀子为主。3个调查样地土壤均以腐殖土为主,草本植物较少,草本层伴生植物主要以抗逆性强的一年蓬、沿阶草等为优势种。3个样地沙氏鹿茸草种群相对密度差别较大,1号地沙氏鹿茸草相对密度最少,仅为39.7%;2号地最多为64.1%;3号地为57.1%。2号地Shannon-Wiener指数、Simpson指数与Pielou指数均为最低,物种丰富度随着人工干扰强度增加而增加。结论:不同人为干扰强度影响沙氏鹿茸草伴生群落结构,人为干扰过少,群落郁闭度高,会抑制沙氏鹿茸草种群的正常繁殖;过度的人为干扰,会造成土壤水分蒸发过快、寄主植物减少,同样也不利于沙氏鹿茸草生长发育;适当人为干扰则能创造有利生境,可促进沙氏鹿茸草种群密度增加。

不同生境沙氏鹿茸草种群结构与动态

目的:分析不同生境条件下沙氏鹿茸草Monochasma savatieri Franch.ex Maxim.种群年龄结构、静态生命表及存活曲线,预测未来种群结构变化,以期对引种驯化及保护其野生资源提供参考。方法:采用样地调查法对不同地区(湖北黄石、江西吉安、江西庐山)沙氏鹿茸草进行调查,记录相关信息,绘制种群静态生命表、期望寿命图、年龄结构图、存活曲线、死亡率曲线及时间序列预测。结果:三个地区的沙氏鹿茸草年龄结构均为“金字塔型”,种群存活曲线均趋于Deevey-Ⅲ型,在1~3龄级单位样地内种群数量最大,到第3龄级后种群数量急剧减少,江西庐山相对于其他两地缺少中高龄级(4龄级后)野生沙氏鹿茸草,并且江西庐山沙氏鹿茸草死亡高峰期相对于其他两地早,3龄级后湖北黄石地区沙氏鹿茸草期望寿命大于其他两地。结论:环境因素影响着沙氏鹿茸草种群年龄结构,其种群自然更新主要取决于种群3龄级前幼株存活率。沙氏鹿茸草种群保护主要应通过控制环境因子,来增加其幼株存活率,促进种群的繁衍。

生根粉对沙氏鹿茸草幼苗生长和吸器形成的影响研究

目的:探究生根粉对沙氏鹿茸草幼苗生长和吸器形成的影响,为沙氏鹿茸草规范化生产提供依据。方法:设置4组生根粉浓度(CK:0 mg/L;T1:10 mg/L;T2:15 mg/L;T3:20 mg/L),对播种30 d后的沙氏鹿茸草幼苗进行处理,统计沙氏鹿茸草根长、苗高、侧根数、鲜重、吸器数、叶片几何形状、叶绿体色素含量、抗氧化酶活性以及生长素相关基因表达量。结果:生根粉对沙氏鹿茸草幼苗生长和吸器形成呈现低浓度促进、高浓度抑制的效应,T2处理根长、侧根数、苗高、叶片数和叶片大小显著高于CK和T3处理(P<0.05);施加生根粉后沙氏鹿茸草幼苗叶绿体色素含量增加;沙氏鹿茸草和寄主的超氧化物歧化酶(SOD)活性持续升高,过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性则先升后降,吸器数量与POD活性呈极显著正相关;ARF19和IAA14表达量上调,LAX3表达量仅在T2时上调。结论:施加适宜浓度生根粉促进沙氏鹿茸草幼苗生长和提高沙氏鹿茸草吸器形成率,可能与其提高沙氏鹿茸草叶绿素含量,并上调POD活性及根系生长素相关基因表达量有关。

鹿茸草化学成分研究

目的:研究鹿茸草的化学成分。方法:鹿茸草用95%的乙醇提取,提取物依次经石油醚和乙酸乙酯萃取,再经硅胶柱色谱法、聚酰胺柱色谱法反复进行分离纯化,并通过波谱技术及理化性质鉴定化合物结构。结果:从鹿茸草中分离得到3个化合物,分别为胆甾醇(1)、芹菜素(2)、木犀草素(3)。结论:此3个化合物均为首次从该植物中分离得到。

鹿茸草蜡状物中的化学成分

目的研究玄参科植物棉毛鹿茸草(MonochasmasavatieriFranch.)腊状物中的化学成分。方法鹿茸草全草乙醇提取物用石油醚萃取,萃取物用硅胶柱色谱分离,石油醚洗脱,得白色腊状物,GC-MS方法分离、鉴定了其中的化学成分。结果鹿茸草蜡状物中得到12个化合物,属于饱和脂肪酸,不饱和脂肪酸,芳香酸以及它们的酯类,以棕榈酸为主。结论首次采用GC-MS方法从鹿茸草蜡状物中确定了12个化合物的结构。

中药鹿茸草的研究进展

鹿茸草始见于《植物名实图考》,是玄参科植物绵毛鹿茸草(Monochasma savatier Franch.)或沙氏鹿茸草(Monochasma sheareri Franch.ex Maxim.)的全草,具有清热解毒、祛风止痛、凉血止血等多种功效。本文利用CNKI、PubMed和SciFinder以鹿茸草(Monochasma savatier Franch.或Monochasma sheareri Franch.ex Maxim.)为主题词进行检索,对鹿茸草的品种、药材标准、化学成分以及生物活性与药理作用等文献进行综述,为鹿茸草的研究、开发、应用以及临床合理使用提供基础。