鹿药药学研究概况

在广泛文献检索基础上,对鹿药的成分、药理作用和临床应用等研究进展进行概述,为深入开发和利用鹿药提供科学资料。

高速逆流色谱分离与鉴定鹿药中黄酮类化合物

采用高速逆流色谱(HSCCC)与其它色谱联用的方法分离纯化鹿药中的化学成分,得到5个黄酮类化合物:5,7,3′,4′-四羟基-3-甲氧基-8-甲基黄酮(1)、8-甲基木犀草素(2)、3′-甲氧基木犀草素(3)、木犀草素(4)和槲皮素(5),它们均为首次自该种及该属植物中分离得到。HSCCC以V(氯仿):V(甲醇):V(水)=4:3:2混合液为溶剂,上相为固定相,下相为流动相,分离纯化得到3个分别含化合物1,4和5的主要部分,经HPLC检验纯度分别为98.3%,96.7%和95.3%;还有1个含有化合物2和3的较纯部分,通过SephadexLH-20柱色谱,以V(甲醇):V(水)=1:1混合液洗脱将二者分离。通过理化性质及紫外、红外、质谱、核磁等波谱分析确定化合物结构。

鹿药提取物清除羟基自由基的研究

采用浸提、索氏提取、大孔吸附树脂分离等技术制备鹿药提取物，包括：鹿药水提液、醇提液、醇提水溶液，醇提液浓缩后经大孔树脂柱水洗后依次用妒为30％、50％、70％、90％的乙醇洗脱分离得到Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ4部分干物质，从Ⅲ中分离得到5个黄酮类化合物：3-甲氧基-8-甲基槲皮素（A）、8-甲基木犀草素（B）、3L甲氧基木犀草素（C）、木犀草素（D）和槲皮素（E）．采用邻二氮菲-Fe^2＋-H2O2氧化法测定鹿药提取物抗氧化清除羟基自由基（HO·）的能力，结果表明，在试验浓度范围内，除鹿药醇提液之外，其他提取物制备液都具有清除HO·的作用，清除率23．30％～98．07％，其中5个黄酮单体化合物清除HO·的能力较强，且随浓度增大清除作用增强，并且作用强度明显好于对照维生素C．可见鹿药中具有较好的抗氧化活性成分．

鹿药属植物叶表皮特征及其系统学意义

采用光学显微镜和扫描电镜对鹿药属12种植物的叶表皮进行了观察,首次报道了12种鹿药属(Sm ilaci-na)植物叶表皮的微形态特征。结果表明:气孔器普遍存在于叶的下表皮,少数种的上表皮也有分布,均为不规则形。叶表皮细胞形状为多边形或不规则形,垂周壁式样可区分为近平直、浅波状和波状。在扫描电镜下,叶表皮气孔器外拱盖内缘为近平滑、浅波状或波状;角质膜条纹状,有的条纹隆起,有的条纹上附有颗粒和晶簇。气孔器的分布、气孔器外拱盖内缘形态以及角质膜等特征对该属部分种的区分具有一定的参考价值。

鹿药游离氨基酸提取工艺

以鹿药为试验材料,采用超声波辅助浸提法,通过单因素试验和正交试验,分别对料液比、提取时间、提取温度及超声功率等因素进行考察,优选鹿药游离氨基酸的最佳提取工艺条件。同时,利用氨基酸自动分析仪对鹿药游离氨基酸进行组分及含量测定分析。结果表明:料液比1∶30、提取时间30 min、提取温度40℃、超声功率80 W,超声提取鹿药游离氨基酸的提取率最高。鹿药由16种不同氨基酸组成,其中必需氨基酸占总氨基酸含量的47.93%。料液比对游离氨基酸提取率影响较显著,且游离氨基酸含量随鹿药采收期的延长呈下降趋势。

鹿药化学成分及其抗肿瘤活性

目的研究鹿药Smilacina japonica A.Gray根茎及根的的化学成分及其抗肿瘤活性。方法鹿药乙醇提取物采用大孔吸附树脂、硅胶、凝胶色谱柱和重结晶等方法分离纯化,根据波谱数据及理化性质鉴定所得化合物的结构。然后,MTT法考察其对人结肠癌细胞株Caco-2、人乳腺癌细胞株MCF-7、人胃癌细胞株BGC-823和人肺腺癌细胞株SPC-A1的抑制作用。结果从中分得3个化合物,分别鉴定为26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25R)-呋甾-5-烯-3β,12,17α,22ξ,26-五醇-12-O-乙酰基-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、薯蓣皂苷(2)、(25R)-海柯皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-[β-D-吡喃木糖基(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷(3)。其中,化合物1对SPC-A1细胞、化合物3对Caco-2和MCF-7细胞增殖有较强的抑制作用,化合物2对Caco-2细胞有抑制作用。结论首次从鹿药中分离得到3个甾体皂苷均具有一定的抗肿瘤活性。

Sevag法脱鹿药多糖蛋白工艺条件优化

为了优化Sevag法脱鹿药粗多糖蛋白工艺条件,以牛血清白蛋白为标准品测定蛋白质含量,以葡萄糖为标准品测定多糖含量,以蛋白质脱除率、多糖保留率及综合评分为指标,通过正交试验考察氯仿与正丁醇的比例、多糖液与Sevag液的比例、振荡时间、洗脱次数四因素对脱蛋白效果的影响,确定鹿药多糖脱蛋白的最佳工艺条件。结果表明Sevag法脱鹿药多糖蛋白的最佳条件为氯仿∶正丁醇=4∶1,多糖溶液(2 mg/mL)∶Sevag试剂=2∶1,振荡时间15 min,洗脱6次,从综合评分来看,主要的影响因素是脱蛋白次数和振荡时间。Sevag法脱鹿药多糖蛋白的方法简便,工艺稳定且可有效提高多糖的纯度。

大孔吸附树脂纯化鹿药总皂苷和总黄酮的研究

目的优化鹿药总皂苷和总黄酮成分的大孔吸附树脂分离纯化最佳工艺。方法以总皂苷和总黄酮为考察指标,对大孔吸附树脂的类型以及样品溶液的质量浓度、pH值、洗脱剂的体积分数、用量进行了优化,同时对大孔吸附树脂的重复性、使用周期进行考察。结果优选出D101大孔吸附树脂作为富集、纯化总皂苷和总黄酮的上柱树脂;获得D101大孔吸附树脂柱层析各项优化参数,即上样液质量浓度为1.5g生药.mL-1(其中皂苷质量浓度为6.52mg.mL-1,黄酮质量浓度为4.81mg.mL-1),上样液pH为4.0～5.0,依次用8BV水、4BV体积分数30%乙醇和4BV体积分数70%乙醇以2BV.h-1的流速洗脱,收集体积分数70%乙醇洗脱液。结论优选出的工艺稳定可行。

鹿药的生药鉴定研究

目的：通过对该药的生药鉴定研究，为开发利用这一药物资源提供鉴定依据。方法：应用了原植物形态鉴定、药材性状鉴定、显微鉴定（包括各不同部位的组织、粉末特征）及纸层析鉴定方法。结果：可为该药的使用提供鉴定方法并为制定鉴定指标提供依据。

响应面分析法优选鹿药总皂苷提取工艺

目的利用响应面法优化鹿药总皂苷的提取工艺。方法采用中心组合设计方法,研究乙醇浓度、提取次数、提取时间及其交互作用对鹿药总皂苷提取率的影响。结果最佳提取工艺条件为:70%乙醇、回流提取2次、每次110 min。结论在最佳工艺条件下,鹿药总皂苷的提取率为4.63%,高于其他条件下的提取率,该工艺条件可为鹿药总皂苷的工业生产提供依据。

星点设计-响应面法优选鹿药总黄酮提取工艺

目的利用响应面法优选鹿药总黄酮的提取工艺条件。方法以乙醇体积分数、溶媒用量、提取时间为主要影响因素,以总黄酮提取率为评价指标,用响应面法选择提取工艺的最佳条件。结果响应面法筛选的最佳提取工艺为:82.6%乙醇,溶媒用量11.4倍量,提取时间1.91h,理论提取率为2.31%,实际测得值为2.26%。结论星点设计-响应面法优选鹿药中总黄酮提取工艺,方法简单,结果可靠。

鹿药总皂苷的提取工艺及含量测定

目的建立中药鹿药总皂苷的提取工艺及含量测定方法。方法通过正交试验确立超声提取鹿药总皂苷的最佳工艺条件;以薯蓣皂苷为标准品,用紫外分光光度计,高氯酸显色,在最大吸收波长412 nm下测定总皂苷含量。结果最佳提取工艺为提取剂50%乙醇,料液比1∶50,浸泡30 min,超声提取50 min。含量测定在0.04∽0.28 mg范围内线性关系良好（r=0.999 7）,稳定性、精密度、重复性、回收率的RSD分别为1.10%、0.43%、1.92%、1.89%。结论该工艺提取率高,操作及仪器设备要求简单;含量测定方法学考察结果良好,简便可行,可为鹿药的质量控制及开发利用提供参考。

鹿药属植物研究进展

鹿药属植物在我国分布广泛,资源丰富,既有很高食用价值,又有药用价值。文章从鹿药属植物的植物学特性、资源分布状况、化学成分研究、药理研究等方面总结其研究概况,并对进一步研究提出展望,以期为鹿药属植物资源的开发利用提供参考。

鹿药属新种——南川鹿药

本文发表了鹿药属一新种,即分布于四川省南川县金佛山的南川鹿药Maianthemnm nanchnanense H.Ll et J.L.

滇西北野生长柱鹿药的资源分布与保护利用

报道了滇西北野生长柱鹿药的资源分布状况、开发利用现状及存在的问题,提出了开发与保护可持续发展的措施。

鹿药中总黄酮含量的测定

[目的]建立鹿药Smilacina japonica A.Gray中活性成分——黄酮类化合物含量的测定方法。[方法]采用铝盐络合显色分光光度法,以芦丁为对照品,NaNO2-Al（NO3）3-NaOH为显色剂,采用正交试验确定显色剂各组分的最佳用量,在505 nm波长处测定光密度,计算鹿药中的总黄酮含量。[结果]正交试验结果表明,最佳显色剂各组分用量为50 mg/ml NaNO22.0 ml,100 mg/ml Al（NO3）30.5 ml,40mg/ml NaOH15.0 ml。该测定方法在浓度为0.004-0.028 mg/ml时,芦丁光密度与浓度的线性关系良好,R^2=0.999 6。鹿药植株不同部位总黄酮的含量,以鹿药茎叶中较高,为1.8%,根茎中为0.43%,种子中含量极低;不同采收时期中,以9月中旬采收的根茎中总黄酮含量较高。[结论]该方法操作简便、快速、可行,可用于测定鹿药不同部位及不同采收期根茎中总黄酮含量,研究结果为鹿药的质量评价及开发利用提供了理论依据。

基于P38MAPK通路的复方参鹿颗粒含药血清对TNF-α诱导的正常骨髓CD34^+细胞凋亡的影响

目的基于P38MAPK途径探讨复方参鹿颗粒含药血清对TNF-α诱导的正常骨髓CD34+细胞凋亡的影响。方法 Wistar大鼠随机分为空白组和复方参鹿颗粒低、中、高剂量组,分别制备空白血清和不同浓度的含药血清。收集并分离8例正常的骨髓单个核细胞(BMMC),分别加入空白血清和10%不同浓度含药血清,与20 ng/ml人重组TNF-α共同培养。流式细胞术检测CD34^+细胞凋亡率,Western blot检测骨髓单个核细胞P38、p-P38、P53、p-P53、Bcl-xl、Bcl-2蛋白表达,荧光定量PCR检测P38、P53、Bcl-xl、Bcl-2mRNA表达。结果与空白组相比,复方参鹿颗粒中、高剂量组CD34^+细胞凋亡率以及p-P38、p-P53蛋白表达显著下降,Bcl-xl蛋白和mRNA表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论复方参鹿颗粒含药血清可有效抑制TNF-α诱导的正常骨髓CD34^+细胞凋亡,下调p-P38和p-P53蛋白表达,上调Bcl-xl表达。其机制可能与P38MAPK通路介导的凋亡途径有关。

鄂西鹿药化学成分研究

目的研究鄂西鹿药的化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20等色谱技术进行分离纯化,理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果从该植物中共分离鉴定了8个化合物:槲皮素(1)、二氢槲皮素(2)、木犀草素(3)、山柰酚(4)、β-谷甾醇(5)、胡萝卜苷(6)、henryioside A(7)、henryioside B(8)。结论化合物1~6为首次从鄂西鹿药植物中分离得到。

鹿药生长发育特性、繁殖特性及生态特征的初步研究

采用野外踏查与野生鹿药移栽观察相结合的方式,对鹿药的生长发育特性、繁殖特性及生态特征进行了初步研究。结果表明,鹿药整个生育期约160d,从4月中旬到10月上旬划分为出苗期、茎叶生长期、现蕾期、开花期、果期和枯萎期6个生长发育时期;鹿药主要是通过根茎进行繁殖,由根茎前1年形成的顶芽萌发为地上茎,而根茎每年伸长生长1节,根茎的寿命为6年;在灌木丛和林下两个生境条件下,地上部分株高、茎粗、鲜重和地下部分根茎长、根茎鲜重的动态变化规律基本一致,都是随生长时间的增长而增加,且灌木丛优于林下生境。

鹿药的生药鉴定

就陕西产鹿药的性状、组织及粉末特征了进行了系统研究,为该中药的生药鉴定提供依据。