RP-HPLC法研究鹿角缩酮B在新西兰兔体内的药代动力学

目的:建立测定新西兰兔血浆中鹿角缩酮B的反相高效液相色谱方法,并测定静脉给药后新西兰兔血浆中鹿角缩酮B浓度及药动学参数。方法:血浆样品经酸化后用乙酸乙酯进行液液萃取,化合物1为内标,色谱柱为Phenomenex C18,流动相为甲醇-乙腈-水(30∶30∶40),流速0.8 mL.min-1,检测波长220 nm。结果:本方法中内源性物质不干扰测定,鹿角缩酮B在0.4～50μg.mL-1范围内线性良好(r=0.9995),检测限为0.2μg.mL-1;高中低浓度平均回收率为85.2%～105.5%,日内和日间精密度RSD均小于10%。结论:首次建立了鹿角缩酮B在新西兰兔体内的分析方法,为鹿角缩酮B的体内分析奠定了方法学基础。本方法专属、准确、灵敏,适用于测定新西兰兔的血药浓度;静脉给药后鹿角缩酮B在体内药代动力学符合二室模型。

鹿角缩酮B与人CYP450主要亚型的对接研究

目的利用分子对接方法从人体内7种重要的P450酶筛选出与鹿角缩酮B亲和力强的药物代谢酶。方法通过SYBYL-X 2.0软件系统对鹿角缩酮B和7种CYP450酶进行模拟对接评价,按照对接打分分数的高低预测鹿角缩酮B-CYP450蛋白的亲和度;分析人类4种重要CYP450亚型与鹿角缩酮B的对接结果。结果对接打分表明CYP3A4、CYP11B2、CYP2D6、CYP2C9四种酶得到了3分以上的分数,预示酶与鹿角缩酮B二者空间结构上的互补性较高,而CYP1A2、CYP2E1和CYP2A6分数为负分,提示两者空间结合差。预测了人类4种重要CYP450亚型的活性位点,得到了4种重要CYP450亚型与鹿角缩酮B的作用模型的理论信息。结论鹿角缩酮B与CYP3A4的结合最牢固,与CYP2D6的结合较牢固并结合于酶的活性位点,故选择CYP3A4与CYP2D6为进一步的研究提供依据。