鹿角脱盘物质基础及药理研究进展

鹿角脱盘作为鹿茸、鹿角的附属产物,一直以来未得到有效的开发利用,浪费较大。历年来其被《中华人民共和国药典》按中药材鹿角收载,但实际二者之间的物质基础、药理毒理等差别较大,不能混为一谈。鹿角脱盘的主要活性成分为多肽类,未来的研究方向为靶向生物小分子多肽方向。此研究认为鹿角脱盘多肽对乳腺癌、乳腺增生、乳腺炎及骨质疏松等疾病的治疗效果较佳。目前市面上尚无鹿角脱盘相关产品,根据乳腺疾病及骨质疏松症治疗药物的发展现状及前景分析,尤其建议研发鹿角脱盘多肽缓释乳房透皮吸收制剂及相关医疗器械等,市场潜力较大。

鹿角与鹿角脱盘显微鉴定研究

目的:利用显微特征参数,分析比较鹿角与鹿角脱盘显微结构差异,为鹿角粉与鹿角脱盘粉鉴别,以及两者质地差异性提供显微结构基础。方法:采用光学显微镜观察鹿角脱盘、鹿角及鹿骨粉末显微特征,并测定和比较三者的骨陷窝长/短径比值和骨陷窝面积占比显微特征数。结果:鹿角脱盘骨陷窝长/短径比值为2.04~2.38、骨陷窝面积比为35.04%~45.82%;鹿角的骨陷窝长/短径比值为1.69~2、骨陷窝面积比为40.60%~61.77%;鹿骨骨陷窝长/短径比值为1.54、骨陷窝面积比为71.8%。结论:鹿角、鹿角脱盘及鹿骨中三者显微鉴定参数均具有明显的差异性;表明骨陷窝长/短径比与骨陷窝面积比,不仅可作为鹿角与鹿角脱盘显微鉴定参数;也阐释了鹿角脱盘角质地比鹿角更为坚硬的组织结构基础,即随着骨陷窝形态由圆变长、骨陷窝面积比降低,其骨化程度增加、质地更加坚硬。

鹿角脱盘对辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤Notch2基因表达和免疫功能的影响

目的:观察鹿角脱盘对辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤Notch2基因的表达和免疫功能的影响,探讨其在辐射致癌过程中的作用。方法:将90只近交系BALB/c小鼠随机分成对照组、照射组和照射给药组,每组30只。照射组和照射给药组小鼠采用X射线照射,建立胸腺淋巴瘤动物模型,照射后给予照射给药组小鼠喂饲含鹿角脱盘超微粉的鼠粮。6个月后,取全血和胸腺,采用RT-PCR和Western blotting法分别检测胸腺淋巴瘤组织中Notch2mRNA和蛋白表达水平;采用ELISA法检测血清免疫球蛋白(IgG、IgA和IgM)水平,应用SOD试剂盒检测血清中SOD活性。结果:照射组和照射给药组小鼠胸腺瘤发生率分别为53.33%(16/30)和36.67%(11/30);照射组小鼠胸腺瘤组织中Notch2mRNA和蛋白表达水平较对照组小鼠正常胸腺组织均明显升高(P<0.05),而照射给药组小鼠胸腺瘤组织中Notch2 mRNA和蛋白表达水平均低于照射组(P<0.05);照射组小鼠血清中IgG、IgA和IgM水平均低于对照组(P<0.05),而照射给药组小鼠血清中IgG、IgM和血红蛋白水平及SOD活性均高于照射组(P<0.05)。结论:电离辐射激活Notch2基因和蛋白的高表达及降低小鼠免疫功能可能是辐射诱发胸腺淋巴瘤的发生机制之一;鹿角脱盘可通过抑制Notch2基因和蛋白的表达及提高小鼠免疫功能而降低辐射致癌的发生率,起到抑制肿瘤的作用。

梅花鹿鹿角脱盘总肽的分离纯化及其抗肿瘤活性研究

目的分离纯化梅花鹿鹿角脱盘总肽,以小鼠乳腺癌细胞系MA782为体外研究对象,初步研究鹿角脱盘总肽的抗肿瘤活性。方法采用酸提醇沉、真空旋转蒸发及冷冻干燥提取鹿角脱盘总肽,再经Sephadex G-25凝胶过滤层析除盐,BCA法测定总肽的蛋白质浓度,SDS-PAGE电泳分析总肽中的蛋白质,MTT法和流式细胞仪检测鹿角脱盘总肽对小鼠乳腺癌细胞系MA782增殖的影响和细胞周期的变化。结果分离纯化出鹿角脱盘总肽粗提物,其蛋白质含量为91.800%;SDS-PAGE分析显示,鹿角脱盘总肽中主要含有11 kDa,18 kDa,40 kDa,64 kDa和80 kDa 5种多肽,总肽对小鼠乳腺癌细胞的增殖具有明显抑制作用,细胞周期各期细胞比例变化明显,当总肽浓度为30 mg/L时,作用72 h后细胞抑制率最高为69.200%,G0/G1期细胞百分比为81.621%,S期细胞百分比为8.983%。结论鹿角脱盘总肽对乳腺癌细胞具有抑制作用,为深入研究鹿角脱盘的抗肿瘤活性提供了实验依据。

梅花鹿角脱盘多肽的分离纯化及对乳腺癌细胞端粒酶活性的影响

目的分离纯化梅花鹿鹿角脱盘多肽;以小鼠乳腺癌细胞系MA782为体外研究对象,初步研究鹿角脱盘多肽对肿瘤细胞端粒酶活性的影响。方法采用酸提醇沉法提取鹿角脱盘多肽,再经Sephadex G-25凝胶过滤层析除盐,BCA法测定的多肽蛋白质含量,TRAP-银染法分析MA782细胞端粒酶活性的变化,再利用相对荧光定量PCR技术检测MA782细胞端粒酶催化亚基TERT基因的表达水平。结果分离纯化出鹿角脱盘多肽粗提物,其蛋白质含量为91.800%;TRAP-银染法检测MA782细胞端粒酶的活性发现,与对照组细胞比较,多肽使细胞端粒酶活性有所下降,典型的重复序列条带数依次减少,多肽处理24 h、48 h、72 h、96 h、120 h后,MA782细胞中相对端粒酶活力分别为91.4、78.3、66.5、47.8、29.2、20.5,呈时间依赖性;相对荧光定量PCR法分析结果表明,与对照组比较,TERT基因的表达水平降低。结论鹿角脱盘多肽对乳腺癌细胞端粒酶活性有一定的抑制作用,可为深入研究鹿角脱盘多肽抗肿瘤活性提供依据。

鹿角脱盘5种提取部位对H_(22)荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的评价鹿角脱盘5种提取部位对肝癌H_(22)荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法将90只SPF级昆明种小鼠随机分成正常阴性对照组、模型组、阳性对照组、鹿角脱盘酸(盐酸)、碱(氢氧化钠)、盐(氯化钠)、醇(乙醇)和水5种提取部位组和鹿角脱盘原粉组共9组,每组10只。分别以脾脏组织病理变化、外周血和脾脏CD4^+和CD8^+T淋巴细胞百分比、血清中细胞因子IL-6、IL-12和抗体IgE、IgG、IgM水平为指标,评价鹿角脱盘的盐酸、氢氧化钠、氯化钠、乙醇和水5种提取部位提高荷瘤小鼠免疫功能的作用。结果与模型组比较,鹿角脱盘5种提取部位能够保护荷瘤小鼠脾脏结构;提高脾脏和外周血CD4^+/CD8^+比值(P<0.05);提高荷瘤小鼠血清中细胞因子IL-6、IL-12和抗体IgE、IgG、IgM的水平(P<0.05)。结论鹿角脱盘碱溶液提取部位效果最好;鹿角脱盘可能通过提高荷瘤小鼠体液免疫和细胞免疫的功能,逆转肿瘤发生发展对机体免疫功能的抑制作用,发挥抗肿瘤作用。

组织脱钙液对鹿角脱盘、鹿角柄的脱钙效果比较分析

为了明确鹿角脱盘和鹿角柄的较优脱钙方法,试验采用9种不同组织脱钙液对鹿角脱盘及鹿角柄进行脱钙,比较脱钙效果及组织形态和H.E.染色效果,综合分析筛选适合于鹿角脱盘、鹿角柄的脱钙方法。结果表明:在脱钙时间方面,采用脱钙液Ⅸ时间最短,脱钙液Ⅶ较短,采用脱钙液Ⅰ脱钙时间最长;在组织外观完整性方面,采用脱钙液Ⅰ脱钙后鹿角脱盘和鹿角柄外观最完整,脱钙液Ⅸ对组织损伤最大,脱钙液Ⅶ取相对完整的碎块组织制作了石蜡切片,切片视野清晰;在显微组织完整性方面,采用脱钙液Ⅰ和脱钙液Ⅶ脱钙后鹿角脱盘和鹿角柄组织较为完整;在H.E.染色效果方面,脱钙液Ⅰ的染色效果最好,脱钙液Ⅱ和脱钙液Ⅶ染色效果也较好。说明脱钙液Ⅶ对组织损伤小,脱钙效果好且脱钙时间短,切片染色效果较好,适合于常规条件下鹿角脱盘及鹿角柄脱钙;在脱钙时间充裕的情况下建议选择脱钙液Ⅰ对鹿角脱盘和鹿角柄进行脱钙,对组织损伤最小,脱钙效果最好,切片染色效果也好。

鹿角脱盘5种提取部位对H22荷瘤小鼠抗肿瘤作用研究

目的：评价鹿角脱盘5种提取部位对肝癌H22荷瘤小鼠抗肿瘤作用。方法：以抑瘤率、脾脏指数、胸腺指数、肿瘤组织病理变化、细胞因子水平和肿瘤细胞的凋亡为评价指标,评价鹿角脱盘的盐酸、氢氧化钠、氯化钠、乙醇和水5种提取部位对肝癌H22荷瘤小鼠抗肿瘤作用。结果：与模型组比较,鹿角脱盘5种提取部位均提高了荷瘤小鼠脾脏指数、胸腺指数以及血清中IL-2、TNF-α、IFN-γ的水平,均促进了肿瘤细胞凋亡;并显著降低了血清中TGF-β的水平。结论：鹿角脱盘5种提取部位均有抗肿瘤作用,其中碱提取部位效果最好;鹿角脱盘可能通过调整T细胞的分化和促进相关细胞因子分泌诱导肿瘤细胞凋亡来发挥抗肿瘤作用。

梅花鹿鹿角脱盘化学成分的研究

对梅花鹿鹿角脱盘的主要化学成分分别进行了含量测定。结果表明:鹿角脱盘中含有16种氨基酸,其中含有7种人体必需氨基酸;鹿角脱盘中粗蛋白含量为32.800%,水溶性蛋白质含量为12.800%;总糖、还原糖和可溶性糖含量分别为1.682%、0.575%和1.143%;而总粗脂肪、游离脂肪酸和磷脂含量分别为1.910%、0.067%和0.300%;鹿角脱盘中含有钙、钾、锌、锰、铁、镁、钠等矿质元素。

鹿角脱盘活性物质的研究与开发利用

鹿角脱盘为传统名贵中药鹿茸的副产品,其药用价值一直被忽视。随着科学技术的进步,对鹿角脱盘中生物活性物质的研究逐渐引起了人们的重视,文章综述了近年来鹿角脱盘的活性成分和药理作用的研究进展以及开发利用情况。

鹿角脱盘及其5种提取部位21种氨基酸含量对比分析

目的:建立RP-HPLC法同时检测鹿角脱盘及其提取部位中21种水解氨基酸含量,分析鹿角脱盘5种提取部位氨基酸含量和组成。方法:采用RP-HPLC法,异硫氰酸苯酯(PITC)作为衍生剂,乙腈-水(4∶1)为流动相A,0.1 mol·L^(-1)乙酸钠溶液(乙酸调pH 6.5)-乙腈(97∶3)为流动相B,检测波长254 nm,流速1 mL·min^(-1),柱温36℃,以梯度洗脱的方法(0 min,100%B;11 min,98.5%B;21.7 min,92.4%B;23.9 min,89%B;27 min,86.6%B;39 min,70%B;42 min,30%B;45 min,0%B;52 min,0%B;55 min,100%B;70 min,100%B)检测鹿角脱盘及其5种提取部位中水解氨基酸含量。结果:21种氨基酸质量浓度在0.001 9~2.700 0μmol·mL^(-1)范围内线性关系良好,R2均>0.992 0,水解氨基酸的加样回收率在93.2%~102.8%,RSD在0.65%~2.6%之间;5种提取部位的氨基酸含量均显著高于鹿角脱盘粉(P<0.05),但水提取部位、碱提取部位和醇提取部位间氨基酸含量无显著性差异(P>0.05);药用氨基酸的比例达60%以上;鹿角脱盘碱提取部位中必需氨基酸与总氨基酸的含量比值和必需氨基酸与非必需氨基酸的含量比值为各组最高。结论:本方法适合鹿角脱盘及其提取部位水解氨基酸含量的测定;5种提取部位较鹿角脱盘有更高的医学和营养学价值。

鹿角脱盘治疗乳腺增生症的理论依据分析

乳腺增生症困扰多数育龄期女性。该文从乳腺增生症的中医学认识、鹿角脱盘的药用历史与现代研究,分析鹿角脱盘治疗乳腺增生症的可行性,为其以后的药用开发、机制研究提供理论依据。

鹿角脱盘胶原蛋白对去卵巢所致骨质疏松大鼠的治疗作用

目的研究鹿角脱盘胶原蛋白对去卵巢大鼠骨质疏松的治疗作用。方法 Wistar大鼠,♀,随机分为6组:假手术组,模型对照组,阳性对照组和鹿角脱盘胶原蛋白高、中、低剂量组。采用摘除双侧卵巢法建立骨质疏松模型,术后7 d开始给药,连续给药90 d,检测大鼠骨密度、血清碱性磷酸酶(ALP)活性和羟脯氨酸(Hyp)含量,骨组织形态计量学参数、骨力学、体重和脏器系数等。结果与模型对照组比较,鹿角脱盘胶原蛋白治疗后大鼠骨密度显著增加、血清中ALP活性降低、Hyp含量升高,骨组织形态计量学参数及骨力学指标显著改善。体重和脏器系数无显著影响。结论鹿角脱盘胶原蛋白对去卵巢所致的骨质疏松大鼠有一定的治疗作用。

梅花鹿鹿角脱盘提取物抗疲劳作用研究

目的:探讨梅花鹿鹿角脱盘提取物的抗疲劳作用。方法:选用雄性小鼠分为3个剂量组和空白对照组,灌胃给药不同剂量的梅花鹿鹿角脱盘提取物30 d后,测定小鼠力竭游泳时间、血乳酸含量、肝糖原储备以及血清尿素氮等指标。结果:与对照组比较,实验组小鼠负重游泳时间延长,血乳酸水平降低,肝糖原和血清尿素氮含量与空白组无明显差异。结论:梅花鹿鹿角脱盘提取物具有抗疲劳的作用。

鹿角及鹿骨中总多糖含量比较分析

目的:通过比较鹿角、鹿角脱盘、鹿骨中总多糖含量,为鹿角与鹿角脱盘同用,以及鹿骨的药用提供依据。方法:分别采用苯酚一硫酸法和蒽酮一硫酸法,测定鹿角、鹿角脱盘、鹿骨中总多糖含量。结果:两种测定方法中,三者总多糖含量由高到低依次为:鹿角脱盘,鹿角,鹿骨;两种测定方法中,蒽酮一硫酸法测定结果,各样品总多糖含量均高于苯酚一硫酸法测定结果。结论:从总多糖角度,鹿角及鹿角脱盘含量具有显著差异,不宜作同一药材使用;同为鹿的骨化部分的鹿骨,与鹿角总多糖含量差异较大,应分别药用。

复方麦鹿芪人参制剂主要成分变化及其在肝癌H22荷瘤小鼠体内的抗肿瘤作用

目的:分析复方麦鹿芪人参制剂配伍后主要成分的变化,探讨其对肝癌H22荷瘤小鼠的体内抗肿瘤作用。方法:采用HPLC法测定复方麦鹿芪人参制剂中人参皂苷和氨基酸的含量,苯酚硫酸法测定复方麦鹿芪人参制剂中多糖的含量。将144只雌性昆明小鼠随机分为正常对照组,模型组,阳性药组,低、中、高剂量复方麦鹿芪人参组,人参羹组,人参原粉组和鹿角脱盘原粉组,每组16只。除正常对照组外,其余8组构建肝癌H22荷瘤小鼠模型,造模后次日给药,连续给药10d后测定各组小鼠瘤质量,计算各组小鼠肿瘤抑制率、脾脏指数和胸腺指数,HE染色法观察肿瘤组织和脾脏组织的形态表现,流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡率。结果:以人参和鹿角脱盘单味生药量计,复方麦鹿芪人参制剂中人参皂苷、多糖和氨基酸含量明显高于单味药(P<0.05)。与模型组比较,各剂量给药组小鼠肿瘤抑制率明显增加(P<0.01),各剂量复方麦鹿芪人参组小鼠脾脏指数和胸腺指数明显升高(P<0.01),肿瘤细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。与模型组比较,各剂量复方麦鹿芪人参组小鼠肿瘤组织被破坏,细胞排列疏松,形状不规则,可见坏死灶;脾脏组织白髓结构逐渐趋于正常,边缘区可辨,淋巴细胞排列密集。结论:复方麦鹿芪人参制剂中皂苷、多糖和氨基酸含量与单味药相比均明显增加,且其抗肿瘤作用较单味药更强。

2015年版《中华人民共和国药典》收载的鹿源药材中硫酸软骨素含量分析

目的:研究2015年版《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)收载的鹿源药材中硫酸软骨素的含量差异。方法:采用稀碱-浓盐法提取,硫酸软骨素ABC酶酶解样品中的硫酸软骨素,应用高效液相色谱法对样品中的总硫酸软骨素及硫酸软骨素A、B、C含量进行测定;色谱条件:Hypersil SAX强阴离子硅胶色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以2 mol·L^(-1)的氯化钠溶液(盐酸调pH至3.5)和水(盐酸调pH至3.5)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长232 nm,柱温40℃。结果:梅花鹿鹿茸、鹿角(鹿角脱盘)、鹿角胶(鹿角脱盘胶)、鹿角霜(鹿角脱盘霜)中硫酸软骨素含量分别为2.06、0.46(0.42)、0.93(1.10)、0.22(0.17)g·kg^(-1);马鹿鹿茸、鹿角(鹿角脱盘)、鹿角胶(鹿角脱盘胶)、鹿角霜(鹿角脱盘霜)中硫酸软骨素含量分别为1.83、0.41(0.34)、0.91(0.87)、0.19(0.15)g·kg^(-1)。结论:《中国药典》收载的鹿源药材中硫酸软骨素的含量差异很大,鹿茸中的最高,鹿角胶、鹿角、鹿角霜中的依次递减。