基于Notch1-Jagged1通路探讨鹿鹅鼻炎方对变应性鼻炎小鼠Th17/Treg的影响

目的 探讨鹿鹅鼻炎方对变应性鼻炎(AR)小鼠Notch1-Jagged1通路及辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)免疫失衡的影响。方法 将30只BALB/c小鼠随机分为空白组、模型组、鹿鹅鼻炎方低、中、高剂量组,每组6只。以卵清蛋白(OVA)为致敏原诱导建立AR模型小鼠,鹿鹅鼻炎方低、中、高剂量组每天分别给与鹿鹅鼻炎方0.5、1、2 g/kg灌胃。通过行为学观察评估各组小鼠鼻部症状(打喷嚏、流鼻涕)改变;进行鼻灌洗液(NLF)细胞计数;观察各组小鼠鼻黏膜组织形态学变化并计算嗜酸性粒细胞、杯状细胞和肥大细胞数;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组小鼠血清中OVA特异性IgE(OVA-sIgE)、OVA特异性IgG(OVA-sIgG)水平以及NLF中白细胞介素(IL)-10、IL-17水平;Western Blot检测各组小鼠鼻黏膜中Notch1、Jagged1、视黄酸相关孤儿受体γt(RORγt)及叉头状螺旋转录因子3(Foxp3)蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组小鼠可观察到鼻黏膜上皮细胞显著增生和化生,纤毛脱落不完整,黏膜下层血管扩张明显,出现以嗜酸性细胞为主的炎性细胞浸润;经鹿鹅鼻炎方干预后,黏膜上皮损伤好转。与空白组比较,模型组小鼠末次滴鼻激发后10 min内喷嚏和抓鼻次数、鼻黏膜上皮厚度、嗜酸性粒细胞数、杯状细胞数、肥大细胞数、血清OVA-sIgE及OVA-sIgG水平、NLF IL-17水平、鼻黏膜RORγt、Notch1、Jagged1蛋白表达增加(P<0.05),NLF IL-10水平、鼻黏膜Foxp3蛋白表达降低(P<0.05)。与模型组比较,鹿鹅鼻炎方低、中、高剂量组小鼠末次滴鼻激发后10 min内喷嚏和抓鼻次数、鼻黏膜上皮厚度、嗜酸性粒细胞数、血清OVA-sIgE及OVA-sIgG水平、NLF、IL-17水平、鼻黏膜RORγt、Notch1、Jagged1表达降低,鼻黏膜Foxp3表达水平升高(P<0.05);鹿鹅鼻炎方中、高剂量组鼻黏膜杯状细胞数、鼻黏膜RORγt蛋白表达降低,NLF IL-10水平升高(P<0.05);鹿鹅鼻炎方高剂量组鼻黏膜肥大细胞数降低(P<0.05)。结论 鹿鹅鼻炎方干预AR小鼠的机制可能是通过抑制Notch1-Jagged1表达,恢复Th17/Treg免疫平衡实现的。

鹿鹅鼻炎方对过敏性鼻炎大鼠Treg/Th17细胞及相关细胞因子的影响

目的:基于Treg/Th17细胞及相关细胞因子探讨鹿鹅鼻炎方治疗过敏性鼻炎(AR)大鼠的作用机制。方法:45只AR大鼠随机分为空白组,模型组,西药组,低、高剂量中药组。观察大鼠鼻黏膜病理改变,检测鼻黏膜白细胞介素(IL)-17、IL-10表达,RT-PCR检测Foxp3 mRNA、RORγt mRNA的表达,ELISA检测大鼠血清IL-17、IL-10,TGF-β1的浓度。结果:与空白组比较,模型组大鼠鼻黏膜连续性中断,结构破坏,纤毛脱落,杯状细胞增生;药物干预组病理改变较模型组均有不同程度的减轻。与空白组比较,模型组大鼠鼻黏膜IL-10、Foxp3mRNA及血清中IL-10、TGF-β1含量显著降低(P<0.05),而大鼠鼻黏膜IL-17、RORγt mRNA、RORγt mRNA/Foxp3 mRNA及血清中IL-17含量显著升高(P<0.05)。与模型组比较,经药物干预后大鼠鼻黏膜IL-10、Foxp3mRNA及大鼠血清IL-10、TGF-β1均有不同程度的升高(P<0.05),鼻黏膜RORγt mRNA、RORγt mRNA/Foxp3mRNA及血清IL-17水平显著降低(P<0.05)。西药组、高剂量中药组大鼠鼻黏膜IL-17表达量较模型组显著下降(P<0.05)。结论:鹿鹅鼻炎方可改善大鼠鼻部过敏症状,通过调节体内Th17/Treg平衡而调节机体免疫状态,最终实现控制炎症反应达到治疗的目的。