鹿龙再生汤Ⅱ号方对化疗后骨髓抑制的作用机制

目的探讨鹿龙再生汤Ⅱ号方对荷瘤裸鼠骨髓抑制的干预作用机制。方法肠癌荷瘤裸鼠随机分为5组:对照组、化疗组、化疗加利可君片组,化疗加鹿龙再生汤Ⅱ号方高、低剂量组,连续灌胃给药10 d。d 4-10,除对照组外,均腹腔注射氟尿嘧啶(5-Fu)25 mg·kg^(-1)。d 11检测外周血白细胞、骨髓有核细胞数,流式细胞仪检测骨髓细胞周期、凋亡率及CD34阳性率,荧光定量PCR检测骨髓粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)、粒细胞巨噬细胞刺激因子受体(granulocyte-macrophage colony stimulating factor receptor,GM-CSFR)以及淋巴细胞刺激因子白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素3(interleukin-3,IL-3)的mRNA水平,Western blot考查血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和血管细胞黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)的表达。结果鹿龙再生汤Ⅱ号方能明显升高荷瘤化疗裸鼠的外周血白细胞及骨髓有核细胞数、增加骨髓细胞S期百分率、降低凋亡率并升高CD34阳性率,上调GM-CSF、GM-CSFR、IL-1β以及IL-3的mRNA表达,升高VEGF和VCAM-1蛋白水平。结论鹿龙再生汤Ⅱ号方可明显缓解化疗所致骨髓抑制,其机制与调控细胞周期、阻止细胞凋亡、促进造血生长因子的分泌以及改善骨髓造血微环境等密切相关。

鹿龙再生汤对再障小鼠外周血单个核细胞及脾teff细胞T-bet和GATA-3基因表达的影响

目的探讨鹿龙再生汤对再生障碍性贫血(简称再障)模型小鼠外周血单个核细胞以及脾CD4+CD25-细胞(teff细胞)中T-bet、GATA-3基因表达的影响。方法通过IFN-γ腹腔注射加白消安灌胃的方法建造40只再障小鼠模型,分别予同体积的生理盐水、一般浓度、5倍浓度和10倍浓度的鹿龙再生汤进行灌胃治疗,分别归为再障组、再障小剂量组、再障中剂量组和再障大剂量组(n=10);另取40只正常小鼠按上述方法进行分组处理,分别归为正常组、正常小剂量组、正常中剂量组和正常大剂量组(n=10)。通过骨髓活检病理学检查观察用药后各组小鼠的骨髓造血变化,免疫磁珠分选各组小鼠脾teff细胞,利用RT-PCR技术检测各组小鼠外周血单个核细胞以及脾teff细胞T-bet、GATA-3基因mRNA的表达情况。结果 (1)与再障组相比,再障中剂量组和再障大剂量组小鼠的骨髓造血有所恢复,尤其是再障大剂量组。(2)再障大剂量组小鼠的外周血单个核细胞以及脾teff细胞T-bet基因mRNA的表达、T-bet/GATA-3的比值较再障组均明显下降(P<0.05),而GATA-3基因mRNA的表达明显上调(P<0.05)。结论大剂量鹿龙再生汤可改善再障小鼠骨髓造血功能,可能是通过调节再障小鼠外周血单个核细胞及脾teff细胞的T-bet、GATA-3基因的表达来实现。

鹿龙再生汤对重型再生障碍性贫血小鼠模型BFU-E和CFU-GM的影响

目的 :研究鹿龙再生汤对重型再生障碍性贫血(severe aplastic anemia,SAA)小鼠模型外周血象及红系爆式集落形成单位(burst-forming unit-erythroid,BFU-E)和粒单系集落形成单位(colony-forming unit-granulocyte macrophage,CFU-GM)的影响,探讨鹿龙再生汤促进造血作用的机制。方法 :BALB/c小鼠40只通过干扰素(interferon,IFN-γ)腹腔注射联合白消安灌胃,连续用药10 d,成功诱导建立了SAA模型,然后被随机分为4组(n=10),分别设为SAA组、SAA中药小剂量组(一般浓度)、SAA中药中剂量组(正常剂量的5倍浓度)、SAA中药大剂量组(正常剂量的10倍浓度),并分别予以生理盐水及3个不同剂量的鹿龙再生汤灌胃;另取10只正常BALB/c小鼠作为正常组,予以生理盐水灌胃和腹腔注射。5 d后收集各组小鼠眼眶血检测外周血象,取小鼠骨髓单个核细胞用甲基纤维素培养,培养7 d后观察并计数的BFU-E、CFU-GM。结果 :造模后SAA小鼠外周血的白细胞、血红蛋白、血小板、网织红细胞均有降低(P<0.05),经过不同剂量的鹿龙再生汤治疗后SAA小鼠的外周血均有不同程度升高,其中中剂量的鹿龙再生汤可以明显升高SAA模型小鼠外周血白细胞和网织红细胞的计数(P<0.05)。SAA组BFU-E和CFU-GM的集落形成较正常组明显下降(P<0.05),而SAA中药中剂量组BFU-E和CFU-GM的集落形成较SAA组明显上升(P<0.05)。结论 :中剂量的鹿龙再生汤可能通过促进SAA小鼠骨髓单个核细胞BFU-E、CFU-GM的生成,从而改善外周血象,相关实验结果可能为SAA的中药治疗提供理论依据。

鹿龙再生汤对肺癌裸鼠化疗骨髓抑制期骨髓的保护作用

目的:探讨鹿龙再生汤对肺癌裸鼠化疗骨髓抑制期骨髓的保护作用。方法:采用人肺鳞癌细胞株Eca109进行肺癌肿瘤造模,再腹腔注射环磷酰胺(CTX)进行肿瘤化疗骨髓移植造模。造模成功后分为4组。空白对照组10只,模型组、西药组、中药组各15只。西药组予利可君片灌胃,重组人粒细胞刺激因子一次性皮下注射;中药组予鹿龙再生汤灌胃,空白对照组和模型组不予药物干预。观察各组的白细胞(WBC)、血小板(PLT)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HB)水平和骨髓有核细胞数(BMNC);骨髓活检观察骨髓增殖情况;流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫组织化学技术检测细胞凋亡因子FAS抗体表达水平。结果:模型组、西药组、中药组WBC、PLT、RBC、HB水平及BMNC与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);西药组、中药组给药3、5 d WBC、PLT、RBC水平及BMNC与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。中药组较模型组显示出较好的骨髓增殖效果;中药组骨髓单个核细胞生存比例及FAS抗体表达水平较模型组升高。结论:鹿龙再生汤对肺癌裸鼠化疗骨髓抑制期骨髓粒细胞系统、巨噬细胞系统、红细胞系统抑制均有促进细胞增殖的作用,其作用机制可能与调控细胞凋亡因子FAS抗体表达有关。

中西医结合治疗再生障碍性贫血17例临床观察

目的:研究鹿龙再生汤治疗慢性再生障碍性贫血的疗效及药理机制。方法:将再障患者分为鹿龙再生汤配合西药治疗组(治疗组)和单纯西药治疗组(对照组),分别观察其临床疗效及治疗前后患者外周血清造血抑制活性和诱导细胞凋亡活性的变化情况。结果:治疗组总有效率明显高于对照组。再障患者经有效治疗后其外周血清的造血抑制活性和凋亡诱导活性明显降低,加服鹿龙再生汤可增强此种作用。结论:鹿龙再生汤配合西药治疗慢性再障效果明显优于单纯西药治疗组。通过降低再障患者血清造血抑制活性从而改善骨髓造血功能可能是鹿龙再生汤治疗再障的药理机制之一。