温度和冻存液体积与冷冻液接触时间对双层麦管法冻存小鼠卵子的影响

目的探讨温度和冻存液体积与冷冻液接触时间对双层麦管法冻存小鼠卵子的影响。方法90只KM品系雌鼠注射激素,使其超数排卵,以获得形态良好的带放射冠的卵子,采用双麦管法玻璃化冷冻与复苏带放射冠的卵子。根据不同操作温度(22℃、37℃)、冷冻液接触时间(>30~40、>40~90、90~180 s)、冻存液体积(>0.1~0.5μl、>0.5~1.0μl)分别冷冻,比较各种冷冻条件下的卵子存活率。结果操作时间为40~90 s,冻存液体积为0.1~0.5μl时,22℃卵子存活率高于37℃,差异有统计学意义(P<0.05)。22℃环境下,冻存液体积为>0.1~0.5μl时,>40~90 s操作时间小鼠卵子存活率高于>30~40、>90~180 s,>90~180 s操作时间小鼠卵子存活率高于>30~40 s,差异有统计学意义(P<0.05)。在22℃环境下,操作时间为>40~90 s时,>0.1~0.5μl冻存液体积小鼠卵子存活率高于>0.5~1.0μl,差异有统计学意义(P<0.05)。结论应选择22℃环境温度,>40~90 s的操作时间,>0.1~0.5μl的冻存液体积冻存带有放射冠的小鼠卵子,效果最佳,存活率最高。

稀少精子麦管法不同冷冻方法的实验研究

目的优化稀少精子冷冻方法,缓解临床治疗无精子症或少、弱精子症患者的不育问题。方法使用麦管容器和改良甘油-卵黄-枸橼酸钠(GYC)型冷冻保护剂,利用上游法将密度调整至(3～5)×106/ml,以液氨熏蒸方式冷冻。结果利用麦管液氮熏蒸法,平均精子复苏率为(47. 81±14. 32)%,冷冻复苏后正常形态率为(4. 58±2. 32)%,冷冻复苏后DNA碎片率为(9. 27±5. 10)%,高于其他方案,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论应用麦管加保护剂液氮熏蒸冷冻模式冷冻复苏后,稀少精子的各项特征参数均较优,是一种行之有效的方法。

封闭式麦管玻璃化冷冻法用于人早期胚胎冷冻效果观察

目的探讨封闭式麦管玻璃化法用于人早期胚胎(以下简称胚胎)冷冻的效果。方法将接受体外受精—胚胎移植(IVF-ET)患者移植后第3天的胚胎分别采用封闭式麦管玻璃化法(玻璃化组)及程序化慢速冷冻法(程序化组)冷冻,比较两组胚胎存活率、完全胚胎存活率、继续卵裂率及植入率、妊娠率和流产率等。结果玻璃化组的胚胎存活率、完全胚胎存活率、植入率明显高于程序化组,周期取消率明显低于程序化组(P均<0.05);继续卵裂率、临床妊娠率、流产率,两组比较均无显著性差异(P>0.05)。结论封闭式麦管玻璃化法用于人早期胚胎冷冻可简化冷冻程序,更好地保存胚胎复苏后的发育潜能。

Ammonia Volatilization Losses from Urea Applied to Wheat on a Paddy Soil in Taihu Region, China

Ammonia volatilization losses from urea applied as a basal fertilizer and a top dressing at tillering stage in a wheat field of Taihu Region, China, were measured with a micrometeorological technique. Urea as fertilizer was surface broadcast at 81 (low N) and 135 (high N) kg N ha-1 as basal at the 3-leaf stage of the wheat seedling on December 2002, and 54 (low N) and 90 (high N) kg N ha-1 as top dressing on February 2003. Ammonia volatilization losses occurred mainly in the first week after applying N fert…

自制冷冻片微型载体(Strawtop)微量精液冻存效果的实验研究

目的对自制冷冻片微型载体(Strawtop)法与麦管法冷冻保存人微量精液的冻存效果进行系统评价。方法采用前瞻性研究分析2018年5月1日至2018年6月30日期间于同济大学附属东方医院生殖医学中心行卵胞质内单精子显微注射(ICSI)助孕治疗的患者捐献的部分精液样本,比较自制Strawtop法与麦管法冷冻人精子复苏后的冷冻复苏率、DNA碎片指数(DNA fragmentation index,DFI)、超显微结构和受精能力与胚胎发育情况。结果Strawtop法冻存人精子的冷冻复苏率(46.8%±17.1%)显著高于麦管法(23.1%±13.7%,P=0.001);与冷冻前(18.9%±11.6%)相比,麦管法(33.5%±15.0%)冷冻精子复苏后的DFI显著增加(P=0.019),而Strawtop法冻融入精子的DFI(23.4%±11.7%)与冷冻前相比差异无统计学意义(P=0.375);Strawtop法对冷冻精子超显微结构的损伤低于麦管法;Strawtop法冻融精子、麦管法冻融精子和新鲜精子的正常受精率、卵裂率和受精后48 h(第2日)的优质胚胎率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论Strawtop法冷冻人微量精液冷冻复苏率高于麦管法,复苏精子的损伤较小,且复苏后无需离心洗涤即可直接用于ICSI,具有较高的临床应用价值。