麦考酚酸及其代谢物血药浓度的HPLC法简介

麦考酚吗乙酯是麦考酚酸的2-乙基酯前体药物,临床广泛应用于器官移植后的抗排斥治疗。本文查阅国内外相关的HPLC分析方法文献,对麦考酚酸总浓度、游离药物浓度及其葡萄糖苷酸代谢物的检测方法进行了归纳和总结,为研究麦考酚酸药动学及其个体化给药提供参考。

HPLC/MS/MS法测定人血浆中麦考酚酸浓度

目的建立测定人血浆中麦考酚酸(免疫抑制剂)含量的HPLC/MS/MS方法。方法血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,以15mmol·L-1醋酸铵-甲醇梯度洗脱,用Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱,通过电喷雾离子化三重四极杆串联质谱,经多反应监测模式检测,m/z321.2→m/z303.0(麦考酚酸),m/z237.0→m/z194.0(卡马西平,内标)。结果血浆中麦考酚酸的线性范围为0.1～10μg·mL-1,方法回收率为104.1%～106.6%,日内、日间精密度均小于7%。结论本法简便、快速、灵敏、准确,已应用于肾移植后患者麦考酚酸酯的治疗药物监测。

麦考酚酸酯及其临床应用进展

目的:麦考酚酸酯(MMF)是一种新型的免疫抑制剂。在临床应用中,MMF的使用也越来越广泛,已不仅仅局限于器官移植,还涉及到系统性红斑狼疮(SLE)、自体免疫风湿性疾病的治疗,以及在糖尿病,肺部血管高压的辅助治疗等诸多方面。肠包衣麦考酚酸钠,是一种新的可抵抗胃溶作用的麦考酚酸肠包衣剂型,药物在肠内释放,可以降低胃肠道(G I)不良反应的发生。

人血浆中麦考酚酸的HPLC法测定

建立人血浆中麦考酚酸酯活性代谢物麦考酚酸的 HPL C测定法。以 10 %三氯乙酸的乙醇溶液直接沉淀血浆蛋白 ,色谱柱为 L ichrom sorb RP- 18(2 0 0× 3.9mm ,5μm) ,预柱为岛津 ODS(5× 3.9m m,10μm ) ,流动相为乙腈 -0 .0 5 %磷酸溶液 (4 0∶ 6 0 ) ,检测波长 2 5 0 nm ,以尼群地平为内标。麦考酚酸的保留时间为 6 .85 min,血浆定量线性范围 0 .2 36～ 2 3.6 0μg/m l,方法回收率为 99%～ 10 5 % ,日内、日间 RSD小于 7%。本法简便快速 。

肾移植患者中麦考酚酸及其葡萄糖苷酸代谢物的稳态药动学

目的探讨肾移植患者中麦考酚酸(MPA)及其葡萄糖苷酸代谢物(MPAG)的药动学特征。方法12名肾移植患者口服麦考酚酸酯0.75g bid。采集术后第7-10天12h内11个时间点的血浆样本。HPLC法测定血浆中游离和总的MPA和MPAG浓度。计算MPA和MPAG的游离分数和药动学参数。结果MPA和MPAG的游离分数分别为96.50%±2%和65.40%±8%。总的和游离的MPA稳态主要药动学参数分别为tmax均为(1.92±0.95)h;cmax分别为(9.35±3.35)mg/L,(0.54±0.48)mg/L;AUC0-12分别为(20.24±6.54)mg.h.L-1,(0.73±0.52)mg.h.L-1;MRT0-12分别为(3.22±0.90)h,(3.13±0.99)h。总的和游离的MPAG稳态药动学参数:tmax均为(3.33±1.72)h;cmax分别为(97.33±32.56)mg/L,(29.92±8.46)mg/L;AUC0-12分别为(656.40±148.20)mg.h.L-1,(222.10±58.08)mg.h.L-1;MRT0-12分别为(5.52±0.42)h,(5.44±0.46)h。结论MPA个体间药动学差异大,以监测其游离浓度为佳。

肾移植患者中麦考酚酸游离分数的影响因素

目的:探讨肾移植患者中影响麦考酚酸(MPA)游离分数的因素。方法:采集23名肾移植术后3个月内患者12h内11个时间点的血浆样本,HPLC法测定血浆中游离和总的MPA及其代谢物葡萄糖醛酸结合物(MPAG)浓度。多元线性回归法考察受试者生理、病理特征和MPA游离分数(FUMPA)的相关性。结果:MPA游离分数的自然对数[ln(FUMPA)]与白蛋白(ALB),血红蛋白的自然对数[ln(Hb)]呈负相关,与MPA游离浓度AUC(MPAfAUC0-12),MPAG的游离分数(FUMPAG)呈正相关,相关系数r分别为-0.552,-0.459,0.781和0.458;P值分别为0.006,0.028,0.000和0.028。其关系式为:ln(FUMPA)=-0.055 4(ALB)-1.924,r=-0.552;ln(FUMPA)=1.128MPAf+2.181FUMPAG-5.171,r=-0.850。结论:ALB升高,可致FUMPA呈指数增加;MPAG可与MPA竞争性结合蛋白。

麦考酚酸酯在中国健康受试者体内的药动学

目的研究麦考酚酸酯在中国健康人体内的药动学。方法12名健康受试者口服麦考酚酸酯1．0g后，用HPLC法测定血浆中麦考酚酸浓度；用3P97药动学程序拟合计算药动学参数。结果口服麦考酚酸酯后麦考酚酸的药-时曲线符合一级吸收二室模型，药动学参数Tmax为（0．75±0．18）h，Cmax为（30．81±10．75）mg·L^-1，t1／2β为（16．3±11．7）h，AUC0-12h和AUC0-∞分别为（41．16±10．45）、（69．42±20．62）mg·h·L^-1。结论麦考酚酸个体间药动学差异大，与国外文献报道基本一致。

高效液相色谱法测定人血浆中麦考酚酸的含量

[目的]建立人血浆中麦考酚酸的高效液相色谱定量方法.[方法]色谱柱为安捷伦C18(150.0mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为0.05mol/L磷酸钠(pH值为2.88)-乙腈(65∶35),流动速度为1.0mL/min,柱温为30℃,检测波长为240nm,以卡马西平为内标物.[结果]麦考酚酸在0.5～50.0mg/L血药质量浓度范围内时血药质量浓度与峰面积比值呈良好的线性关系(r=0.999 7);低、中、高质量浓度的提取回收率分别为89.77%,99.43%,100.39%,方法回收率分别为102.33%,104.62%,107.39%;日内、日间精密度RSD均小于7%,样品在室温24h内、-20℃冰冻及冻融等条件下稳定性良好.[结论]利用高效液相色谱法测定麦考酚酸的血药质量浓度具有简便、快速、准确、重现性好等特点,可用于临床服用吗替麦考酚酸酯后麦考酚酸血药质量浓度监测及其药物代谢动力学研究.

柱后衍生化HPLC测定人血浆中总的和游离麦考酚酸及其葡糖苷酸代谢物

目的建立HPLC测定人血浆中总的和游离麦考酚酸(MPA)及其代谢物葡糖苷酸结合物(MPAG)含量的方法。方法游离和总的药物含量测定的预处理方法分别采用超滤法和乙腈蛋白沉淀法。色谱条件:KromasilC8(4.6mm×150mm,5μm);柱温:30℃。流动相:乙腈-0.1%三氟醋酸(55:45,pH2.2),流速:1.2mL·min-1。柱后添加0.2mol·L-1NaOH溶液,流速0.15mL·min-1。MPAG采用紫外检测,检测波长为295nm;MPA采用荧光检测,荧光激发波长342nm,发射波长425nm。结果血浆内源性杂质和常用合并用药对样品测定无干扰,MPA,MPAG的总质量浓度分别在0.1-40和10-250mg·L-1,游离质量浓度分别在0.010-1.0和2.5-100mg·L-1内线性关系良好。MPA,MPAG的日内、日间RSD均小于10%,样品提取后在24h内及3次冻融后稳定性良好。结论本方法简便快速、结果准确可靠,可用于MPA和MPAG的药动学研究及常规的血药浓度监测。

固相萃取反相高效液相色谱法测定人血浆麦考酚酸浓度

目的 建立固相萃取反相高效液相色谱法测定人血浆麦考酚酸 (MPA)浓度 ,探讨MPA与其代谢产物间的转化。方法 用固相萃取法处理样品 ,以泼尼松为内标物 ,C18硅胶键合相为固定相 ,甲醇 四氢呋喃 水 (6 0∶2∶5 0 )作流动相 ,在波长 2 5 4nm处紫外定量检测。结果 MPA浓度在 0 .2～ 40 μg·mL-1范围内与色谱峰高呈良好线性关系 ,血浆MPA回收率为 92 .3%～10 3.1% ,绝对回收率为 5 0 .2 %～ 5 3.7%。最低检测极限为 0 .2 μg·mL-1,批内与日间 (n =5 )RSD为 3.34%和 4.70 %。结论 本法用于MPA测定具有准确、灵敏、简便等特点 。

高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中麦考酚酸的浓度

目的:建立高效液相色谱(HPLC)荧光检测法测定人血浆中麦考酚酸浓度的方法。方法:以萘普生为内标,血浆用甲醇蛋白沉淀后直接进样。采用KromasilC8(150mm×4.6mm,5μm),柱温:25°C;流动相∶乙腈:0.04mol·L-1甘氨酸缓冲液,pH9.2(20∶80);流速:1.0mL·min-1,荧光激发波长342nm,发射波长425nm。结果:血浆内源性杂质和常用合并用药对样品测定无干扰,麦考酚酸在0.05～40mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9999)。麦考酚酸的日内、日间RSD均小于7%,样品3次冻融及提取后在24h内稳定性良好。结论:HPLC法快速、灵敏、准确,可用于麦考酚酸的体内分析及常规的治疗药物监测。

大孔吸附树脂提取麦考酚酸的研究

目的研究大孔吸附树脂提取麦考酚酸(mycophenolic acid)的工艺条件。方法比较了D290,D303,D312,HZ802 4种大孔吸附树脂对发酵液中的麦考酚酸吸附性能,并研究了动力学过程,同时对发酵液中的麦考酚酸在D312吸附柱上的动态吸附解吸过程进行了研究。结果同其他树脂相比,大孔吸附树脂D312能更好地从发酵液中提取麦考酚酸,其吸附量在28400 mg.L-1左右,用体积分数85%乙醇和稀盐酸可以将吸附在树脂柱上的麦考酚酸有效解吸,解吸收率达95%。结论大孔吸附树脂D312是从发酵液中分离和提纯麦考酚酸的一种适宜吸附剂,该工艺简捷,并可向工业化发展。

高效液相色谱法测定人血浆中麦考酚酸的血药浓度

目的 :建立测定麦考酚酸 (MPA)血药浓度的方法并对肾移植病人给药后的血药浓度进行测定。方法 :采用高效液相色谱 (HPLC)法测定血药浓度 ,检测波长 30 3nm。乙腈 (含有 0 .1mol·L- 1磷酸 )作为血样的蛋白沉淀剂。色谱柱 :AgilentXDBC18(15 0mm× 4 .6mm ,5 μm) ;流动相 :乙酸钠缓冲液 (pH =3.0 ,30mmol·L- 1)∶乙腈 =5 7∶4 3(V/V) ;流速 :1mL·min- 1。结果 :MPA血药浓度线性范围为 0 .6～ 30mg·L- 1(r =0 .9995 ,n =6 ) ,其血浆最低检测浓度为 0 .2mg·L- 1;低、中、高 3种浓度MPA的方法回收率为 (98.9± 1.5 ) % ,提取回收率为 (10 6 .73± 0 .2 7) % ;相应 3种浓度MPA的精密度RSD均小于 5 %。结论 :HPLC法能快速、准确对MPA进行血药浓度测定 ,可以用于MPA的临床血药浓度监测和药动学研究。

高效液相色谱法测定人血浆中麦考酚酸的浓度

目的 :建立高效液相色谱法测定人血浆中麦考酚酸的药物浓度。方法 :色谱柱为SupelcosilTM LC18( 5 μm ,4 .6mm×15 0mm) ;流动相为甲醇 0 .0 2 5moL·L-1磷酸二氢钠溶液 (含 1%的醋酸 ,pH5 .0 ) ( 4 5∶5 5 ) ;柱温 :2 5℃ ;流速为 1.2mL·min-1;检测波长为 2 18nm。结果 :本测定方法的线性范围 :0 .2 5～ 5 0mg·L-1,r =0 .9998。平均回收率为 ( 10 2 .4± 5 .8) % ,日内RSD≤ 7.0 % ,日间RSD≤ 7.9%。结论 :本方法简单、灵敏、重现性好 ,适用于临床血药浓度监测 ,以及人体药动学的研究。

有限采样法对麦考酚酸进行血药浓度监测

目的:制订肾移植病人中麦考酚酸(MPA)的血药浓度监测的有限采样法方案。方法:采用高效液相色谱法测定13例肾移植病人服用麦考酚酸酯后不同时间点的总的和游离的MPA血药浓度。线性梯形法计算0～12 h药时曲线下面积(AUC0-12),逐步回归法建立多元回归模型,并与文献报道进行比较。结果:服药后1,2,4 h的MPA血药浓度(c1,c2,c4)预测总的和游离MPA浓度AUC0-12最佳。总的和游离浓度的回归模型分别为2．135+1．186·c1+1．217·c2+4．191·c4和0．194+1．149·c1+0．819·c2+2．759·c4。结论:c1,c2,c4估算 AUC0-12的有限采样法可用于麦考酚酸的临床血药浓度监测。

肾移植患者麦考酚酸的群体药动学研究

目的建立国人肾移植患者在移植初期3个月的群体药动学模型。方法研究对象为52例采用环孢素、吗替麦考酚酯(MMF)和糖皮质激素三联免疫抑制治疗方案的肾移植患者。收集其服药后不同时相的血样560份以及相应的生理、病理和实验室检查数据。运用非线性混合效应模型建立麦考酚酸的群体药动学模型,考察身高、体重、年龄、性别、剂量、血清肌酐、移植术后天数、合并用药、UGT1A9启动子11个单核苷酸基因多态性等对药动学参数的影响。模型验证采用200次bootstrap。结果以一级吸收和消除的二房室模型拟合麦考酚酸的药动学过程为佳,一级速率条件算法计算。体重和移植术后时间是麦考酚酸清除率的影响因素。麦考酚酸清除率的群体药动学公式为:CL/F(L.h-1)=0.554.TBW(kg).(1-e-1.14.POD)。MPA平均清除率为31 L.h-1,与白种人的文献报道值相吻合。Bootstrap法的验证结果与模型计算值也相符。结论建立的麦考酚酸群体药动学模型有一定代表性,为采用Bayesian法进行个体化给药奠定基础。

固相萃取-高效液相色谱法测定肝移植病人血清中麦考酚酸浓度

目的 建立血清中麦考酚酸 (霉酚酸 )的高效液相色谱检测法 ,并监测肝移植病人霉酚酸血药浓度。方法 应用OASIS固相萃取小柱提取血清中霉酚酸 ,采用反相高效液相色谱法二极管阵列检测器检测 ,色谱柱为SymmetryC1 8(2 5 0mm× 4 6mm ,5 μm) ,流动相为乙腈 2 5mmol·L- 1 KH2 PO4 缓冲液 (5 0∶5 0 ) ,pH为 4 5 ,流速为 1 0mL·min- 1 ,柱温 2 5℃ ,检测波长 2 10nm。结果 霉酚酸在 0 1～ 10 0 μg·mL- 1 内定量线性良好 (r=0 9999) ,精密度和回收率均良好 ,成功用于肝移植病人霉酚酸血药浓度测定。结论 本方法适用于肝移植病人霉酚酸血药浓度的测定 ,但临床测定结果较文献报道的肾移植病人口服麦考酚酸酯后MPA血药浓度数据低 ,有待进一步研究。

麦考酚酸肠肝循环药动学模型的建立

目的建立麦考酚酸肠肝循环的药动学模型。方法20名健康志愿者单剂量口服吗替麦考酚酯500mg,在服药前及服药后48 h内的不同时间点取血。HPLC法测定血药浓度。非线性混合效应模型进行模型拟合和参数计算。结果麦考酚酸肠肝循环模型包括一肠道室、一胆囊室和一中央室。模型对于血药浓度的经时过程和主要药动学参数AUC0-t,Cm ax和Tm ax预测效果良好。结论模型具有代表性,可为进一步的临床研究奠定基础。

麦考酚酸酯分散片在健康志愿者体内的生物等效性评价

目的:评价麦考酚酸酯(MMF)分散片与其胶囊(商品名:骁悉)的生物等效性。方法:20名健康志愿者按随机双周期交叉试验方案设计,单剂量口服MMF分散片或其胶囊各500mg,采用RP-HPLC荧光检测法测定MMF的活性代谢产物麦考酚酸(MPA)的血药浓度。用非房室模型计算MPA药动学参数,用方差分析和双单侧t检验评价两者之间的生物等效性。结果:MMF分散片与其胶囊的主要药动学参数AUC0-48分别为(32.7±6.6)与(30.6±9.9)mg.L-1.h,AUC0-∞分别为(35.8±7.4)与(33.3±10.2)mg.L-1.h,Cmax分别为(17.0±4.5)与(15.8±4.8)mg.L-1,tmax分别为(0.45±0.29)与(0.6±0.3)h,t1/2β分别为(13.4±4.7)与(12.7±4.4)h。MMF分散片相对于其胶囊的生物利用度F为(111.6±24.0)%,经统计学检验,两者差异无显著性(P>0.05)。结论:MMF分散片与其胶囊具有生物等效性。