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C端柔性区域对多糖降解菌来源的麦芽五糖生成酶冷适性的调控
1
作者
丁宁
李才明
+2 位作者
班宵逢
顾正彪
李兆丰
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第10期67-76,共10页
冷适麦芽五糖生成酶在低温下具有较高的催化活力,同时能够在室温下快速水解淀粉并特异性地生成具有营养功效的麦芽五糖,因此在食品、医药等领域具有广阔的应用前景。作者以来源于Saccharophagus degradans的两种麦芽五糖生成酶(SdG5A和S...
冷适麦芽五糖生成酶在低温下具有较高的催化活力,同时能够在室温下快速水解淀粉并特异性地生成具有营养功效的麦芽五糖,因此在食品、医药等领域具有广阔的应用前景。作者以来源于Saccharophagus degradans的两种麦芽五糖生成酶(SdG5A和SdG5A-CD)为研究对象,将其分别表达于Bacillus subtilis中,并分析比较了重组酶的冷适性。结果表明,重组SdG5A在0℃下可以保持27.8%的酶活力,在室温下生产麦芽五糖的得率高达48.6%,具有较强的冷适性;而不含有linker和淀粉结合域(SBD)的SdG5A-CD不具有冷适性。为了探究SdG5A的冷适性机理,利用RoseTTAFold构建了结构模型,并利用分子动力学模拟等方法分析了结构柔性。结果表明,位于SdG5A C端的linker-SBD区域具有极高的柔性,且在0℃下的均方根涨落与45℃保持一致,说明linker-SBD结构高柔性的分子特征是影响SdG5A冷适性的关键因素。
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关键词
麦芽五糖生成酶
冷适性
柔性
分子动力学模拟
淀粉结合域
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职称材料
源于Bacillus megaterium STB10的直链麦芽五糖生成酶酶学性质及其产物合成规律
2
作者
韩煦
班宵逢
+2 位作者
李才明
顾正彪
李兆丰
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2022年第10期73-80,共8页
构建来源于巨大芽孢杆菌STB10直链麦芽五糖生成酶(Bacillus megaterium maltopentaose-forming amylase,BmMFA)的食品级枯草芽孢杆菌表达系统,实现了该酶的分泌表达,分析了其酶学性质,并对其产物合成规律进行了探究。结果显示,BmMFA具...
构建来源于巨大芽孢杆菌STB10直链麦芽五糖生成酶(Bacillus megaterium maltopentaose-forming amylase,BmMFA)的食品级枯草芽孢杆菌表达系统,实现了该酶的分泌表达,分析了其酶学性质,并对其产物合成规律进行了探究。结果显示,BmMFA具有较强的催化活力,枯草芽孢杆菌发酵后上清液中酶活力可达196.57 U/mL;该酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH值为7.0,且具有相对较宽的pH值应用范围;BmMFA倾向于内切酶作用机制,且具有较好的产物特异性,水解麦芽糊精24 h后产物中直链麦芽五糖质量分数42%以上,当以支链淀粉为底物时,其转化率及主产物直链麦芽五糖比例均优于直链淀粉。本研究为直链麦芽五糖的酶法制备提供了一定的理论依据。
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关键词
直链
麦芽
五
糖
直链
麦芽五糖生成酶
酶
学性质
产物合成
产物特异性
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职称材料
题名
C端柔性区域对多糖降解菌来源的麦芽五糖生成酶冷适性的调控
1
作者
丁宁
李才明
班宵逢
顾正彪
李兆丰
机构
江南大学食品学院
食品科学与技术国家重点实验室
江南大学食品安全与质量控制协同创新中心
出处
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第10期67-76,共10页
基金
国家重点研发计划项目(2019YFD0901901)。
文摘
冷适麦芽五糖生成酶在低温下具有较高的催化活力,同时能够在室温下快速水解淀粉并特异性地生成具有营养功效的麦芽五糖,因此在食品、医药等领域具有广阔的应用前景。作者以来源于Saccharophagus degradans的两种麦芽五糖生成酶(SdG5A和SdG5A-CD)为研究对象,将其分别表达于Bacillus subtilis中,并分析比较了重组酶的冷适性。结果表明,重组SdG5A在0℃下可以保持27.8%的酶活力,在室温下生产麦芽五糖的得率高达48.6%,具有较强的冷适性;而不含有linker和淀粉结合域(SBD)的SdG5A-CD不具有冷适性。为了探究SdG5A的冷适性机理,利用RoseTTAFold构建了结构模型,并利用分子动力学模拟等方法分析了结构柔性。结果表明,位于SdG5A C端的linker-SBD区域具有极高的柔性,且在0℃下的均方根涨落与45℃保持一致,说明linker-SBD结构高柔性的分子特征是影响SdG5A冷适性的关键因素。
关键词
麦芽五糖生成酶
冷适性
柔性
分子动力学模拟
淀粉结合域
Keywords
maltopentaose-forming amylase
cold adaptation
flexibility
molecular dynamics simulation
starch-binding domain
分类号
Q [生物学]
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职称材料
题名
源于Bacillus megaterium STB10的直链麦芽五糖生成酶酶学性质及其产物合成规律
2
作者
韩煦
班宵逢
李才明
顾正彪
李兆丰
机构
江南大学食品学院
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2022年第10期73-80,共8页
基金
国家自然科学基金面上项目(31571882)
国家食品科学与工程一流学科建设项目(JUFSTR20180204)。
文摘
构建来源于巨大芽孢杆菌STB10直链麦芽五糖生成酶(Bacillus megaterium maltopentaose-forming amylase,BmMFA)的食品级枯草芽孢杆菌表达系统,实现了该酶的分泌表达,分析了其酶学性质,并对其产物合成规律进行了探究。结果显示,BmMFA具有较强的催化活力,枯草芽孢杆菌发酵后上清液中酶活力可达196.57 U/mL;该酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH值为7.0,且具有相对较宽的pH值应用范围;BmMFA倾向于内切酶作用机制,且具有较好的产物特异性,水解麦芽糊精24 h后产物中直链麦芽五糖质量分数42%以上,当以支链淀粉为底物时,其转化率及主产物直链麦芽五糖比例均优于直链淀粉。本研究为直链麦芽五糖的酶法制备提供了一定的理论依据。
关键词
直链
麦芽
五
糖
直链
麦芽五糖生成酶
酶
学性质
产物合成
产物特异性
Keywords
maltopentaose
maltopentaose-forming amylase
enzymatic properties
product synthesis
product specificity
分类号
Q814 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
C端柔性区域对多糖降解菌来源的麦芽五糖生成酶冷适性的调控
丁宁
李才明
班宵逢
顾正彪
李兆丰
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
0
下载PDF
职称材料
2
源于Bacillus megaterium STB10的直链麦芽五糖生成酶酶学性质及其产物合成规律
韩煦
班宵逢
李才明
顾正彪
李兆丰
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2022
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
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