新型麦芽四糖酶及其应用

麦芽四糖属麦芽低聚糖,与蔗糖相比,它具有低甜度,高粘度,低渗透压,耐强酸等特性,因此在食品行业有特别的应用。目前虽然能够产生麦芽四糖的酶不少,但真正工业化生产的却很少,且被报道的大部分麦芽四糖酶须在中性或偏碱性条件下进行反应,这对实际生产操作带来很多不便,影响产品质量并导致生产成本较高。作者采用一种新型的由嗜糖假单胞菌改造得到的耐热耐酸的麦芽四糖酶,对其生产麦芽四糖的工艺条件进行了研究及优化。实验表明,该酶可以在pH4.0~8.0,温度55~70℃,与普鲁兰酶协同作用生产质量分数在50%以上的麦芽四糖糖浆。

嗜糖假单胞菌麦芽四糖酶基因在地衣芽孢杆菌中的异源表达

为了考察重组地衣芽孢杆菌的异源表达特性,进一步提高麦芽四糖酶的发酵水平,以适用于工业化生产,研究构建了木糖诱导型的重组地衣芽孢表达系统,表达了来源于嗜糖假单胞菌的麦芽四糖酶基因,并进行了初步发酵优化。结果显示,构建的表达系统经过核酸电泳以及十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)鉴定均正确,该系统在发酵过程中经过木糖诱导,重组酶能够成功地分泌至发酵液中,然后通过对诱导剂添加时间、诱导温度和发酵时间优化后,摇瓶水平的最大酶活力可达(168. 2±9. 41) U/m L。最佳的发酵条件为,在24 h添加诱导剂,诱导温度30℃,发酵至稳定期结束停止发酵。该研究为重组地衣芽孢杆菌的异源表达研究以及麦芽四糖酶的工业化应用提供了参考。

麦芽四糖研究新进展

麦芽四糖一般是由麦芽四糖淀粉酶水解淀粉而得,因其独特的理化特性,被誉为最有希望的麦芽低聚糖,有着很广的应用和开发前景.对麦芽四糖的性质、研究意义、制备方法及鉴定分析作了全面论述,并对麦芽四糖的前景进行展望,为今后新产品的开发提供了有力的依据.

聚丙烯酰胺凝胶固定化酶法制备麦芽四糖的研究

采用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAEG)对麦芽四糖淀粉酶粗酶液进行分离纯化,经质谱分析确定了麦芽四糖酶条带,然后切胶回收获得高纯度的麦芽四糖酶。将获得的含有麦芽四糖酶的凝胶制成颗粒通过甲醛链接固定,获得固定化麦芽四糖酶。经薄层色谱和液相色谱分析发现:使用固定化酶生产的麦芽四糖纯度高于粗酶液,尤其是单糖杂质含量显著减少。此外,固定化麦芽四糖酶的比活力升高。

麦芽四糖生产工艺的研究

麦芽四糖是一种新型麦芽低聚糖,具有易消化吸收、低甜度、高黏度、保湿性好、吸湿性低、抗龋齿、增稠作用强、冰点作用小、低渗透压、防止食品中蛋白质变性等特点,广泛应用于食品行业、饲料行业、造纸行业及及生化试剂分析行业等。以本公司自制的淀粉液化液为原料,通过对液化液DE值、糖化温度、糖化p H、糖化时间、普鲁兰酶添加量及麦芽四糖酶添加量的研究发现,普鲁兰酶与麦芽四糖酶协同作用效果比较明显,它们的共同使用可以明显提高麦芽四糖含量。通过对DE值、糖化温度、糖化p H作正交试验表明,影响麦芽四糖含量各因素的主次关系依次是DE值、糖化温度、糖化p H;在底物浓度27%,普鲁兰酶添加量为0.5ml/L,麦芽四糖酶添加量为0.4ml/L,DE值为5,糖化温度为55℃,糖化p H 5.5时,麦芽四糖含量最高,为57.42%。