麦角甾苷治疗帕金森病的作用机制研究进展

麦角甾苷(acteoside,AS;verbascoside,VER)是一种苯乙烷糖苷类化合物,具有多种的药理功能,其广泛存在于多种植物中。近年来,研究者在实验性帕金森病(Parkinson disease,PD)模型中,发现麦角甾苷具有神经保护作用,可以通过抗氧化应激、抑制乙酰胆碱酯酶活性、抗神经系统炎症、抑制α-突触核蛋白聚集、诱导自噬和抗凋亡在PD治疗中发挥重要作用。本文对麦角甾苷在PD中的作用机制进行了归纳和总结,以期对PD的药物治疗提供新的依据。

RP－HPLC法测定不同寄主和不同产地肉苁蓉中松果菊苷和麦角甾苷的含量

目的：测定不同寄主和不同产地肉苁蓉中松果菊苷和麦角甾苷含量。方法：采用反相高效液相色谱法，SUPELCOSIL LC-18色谱柱(250mm×4．6mm，5μm)。测定松果菊苷用流动相A：乙腈-水-冰醋酸(13：86：1)；测定麦角甾苷用流动相B：甲醇-水-冰醋酸(32：67：1)。流速：1．0mL·min^-1，检测波长分别为335nm、334nm。柱温：40℃。结果：松果菊苷和麦角甾苷分别在0．04-0．28μg(r=0．9998)和0．04-0．40μg(r=0．9992)内呈良好线性关系，平均加样回收率分别为97．6％和99．1％，RSD均为1．2％。结论：方法准确可靠，重现性好，可用于肉苁蓉的质量评价。

HPLC测定地黄中麦角甾苷的含量

目的：建立用高效液相色谱法测定生地黄和熟地黄中麦角甾苷含量的方法。方法：采用C18柱，以乙腈-0．1％醋酸为流动相，梯度洗脱，检测波长334nm，流速1．0mL·min^-1。结果：麦角甾苷在10～500μg·mL^-1时，呈良好的线性关系（r=0．9990），平均回收率为100．1％，RSD 3．7％。结论：本法可作为地黄质量控制方法。

肉苁蓉生品及不同炮制品麦角甾苷含量比较研究

目的：对肉苁蓉生品及不同炮制品中麦角甾苷的含量进行比较研究。方法：采用高效液相色谱法测定麦角甾苷含量，使用ＹＷＧ－Ｃ１８色谱柱，甲醇－１０ｍｌ／Ｌ乙酸（３５６５）为流动相，ＵＶ检测波长为３３２ｎｍ，麦角甾苷在０．１～０．８μｇ范围内与峰面积呈良好的线性关系（回归方程Ｙ＝２９９４９２Ｘ＋１１６５，ｒ＝０．９９９９，平均回收率为９８．８３％，ＲＳＤ为１．６８％）。结果：生品含量高于炮制品，为０．３３７８％，高压酒炖品含量最低，为０．０５９６％，炮制品中炮制的温度越高，时间愈长，含量愈低。结论：以助阳活性成分麦角甾苷为考察指标时，肉苁蓉药材不宜高温、高压长时间炮制。本法操作简便，结果准确，可作为评价肉苁蓉质量的方法。

HPLC法测定金龙蛇口服液中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、麦角甾苷和甘草苷的含量

目的建立同时测定金龙蛇口服液中5种主要有效成分的HPLC法。方法色谱柱为SunFireTM C18柱（4.6mm×250mm,5μm）,以乙腈（B）-0.2%甲酸（A）为流动相进行梯度洗脱（0-10min,10%-19%B;10-32min,19%B）,流速为1.0mL/min,柱温40℃,进样量10μL,检测波长为285nm。结果柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、麦角甾苷和甘草苷的质量浓度分别在2.00-60.00、2.12-63.60、1.68-50.40、2.00-60.00和2.00-60.00μg/mL范围内呈良好的线性关系（r≥0.999 9）。5种成分的日内精密度和日间精密度RSD分别小于2.30%和3.82%,24h内稳定性RSD〈4.47%;平均加样回收率分别为95.11%、93.73%、96.39%、98.02%和95.12%;RSD分别为2.08%、4.05%、4.02%、6.01%和4.56%。结论该方法简便、准确、灵敏度高、重现性好,适用于金龙蛇口服液的质量控制和评价。

麦角甾苷调节HIPK2-P53通路对人大肠癌裸鼠移植瘤的治疗作用

目的:研究肉苁蓉提取物麦角甾苷对人大肠癌裸鼠移植瘤模型肿瘤生长的作用,及对人大肠癌细胞HIPK2-P53通路的影响,探讨麦角甾苷抑制人大肠癌的作用机制.方法:通过腋下接种人结肠癌HCT-116细胞,建立人大肠癌裸鼠移植瘤模型,随机分为:模型组(生理盐水)、麦角甾苷低[20mg/(kg·d)]、中[40 mg/(kg·d)]、高[80 mg/(kg·d)]剂量组和5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)组[1 mg/(kg·d)],经腹腔分别给药0.2mL,连续给药2 wk.2 wk后处死裸鼠,分别检测裸鼠瘤体体积、瘤质量,采用免疫组织化学法检测瘤组织中凋亡相关蛋白同源结构域相互作用蛋白激酶2(homeodomain-interacting protein kinase 2,HIPK2)、P53、Bax和Bcl-2的表达情况.结果:麦角甾苷低、中、高剂量及5-F U对裸鼠瘤体大小抑制率分别为:48.41%、61.04%、63.75%和75.14%,瘤体质量抑制率分别为:42.79%、53.90%、60.99%、66.19%.免疫组织化学结果显示,裸鼠大肠癌肿瘤组织中麦角甾苷低、中、高剂量及5-FU组HIPK2的表达量分别为:4.83±0.62、8.46±0.99、11.90±1.21、13.50±0.94;P53的表达量分别为:14.59±0.90、17.60±1.40、23.10±2.10、22.44±2.05;B a x表达量分别为14.41±0.38、15.84±0.54、26.28±0.55、26.34±2.33;Bcl-2的表达量分别为14.08±1.04、11.93±0.93、7.48±0.86、5.46±0.67.结论:麦角甾苷能够抑制人大肠癌裸鼠移植瘤生长,上调凋亡相关蛋白HIPK2、P53、Bax的表达,下调Bcl-2表达,其抑制大肠癌的作用与促进肿瘤细胞凋亡密切相关.

高效液相色谱法测定毛泡桐花中麦角甾苷(毛蕊花糖苷)的含量

目的:建立毛泡桐花中麦角甾苷(毛蕊花糖苷)的高效液相色谱分析方法。方法:采用Kromasil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-1%冰醋酸溶液(20:80)为流动相,流速1.0 mL·min-1,检测波长331mm,在10 min内分离检测该化合物。结果:麦角甾苷在0.006-10μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),最低检出限0.002μg(S/N=3);日内和日间精密度RSD分别为0.6%和2.9%(n=5);加样回收率为95.8%-103.1%。结论:所建立的方法简便、快速、准确,可用于毛泡桐花的质量控制,并为泡桐属其它植物中苯丙素苷类化合物的分离分析提供一定的参考。

麦角甾苷及松果菊苷对体外培养大鼠成骨细胞BMP2基因表达的影响

为了观察麦角甾苷和松果菊苷对体外培养大鼠成骨细胞BMP2基因表达的影响。本试验采用酶消化法分离得到大鼠颅骨成骨细胞,在第3代成骨细胞中分别加入含有不同浓度麦角甾苷和松果菊苷的培养液进行培养,在培养的不同时间收集细胞、提取细胞总RNA,采用实时荧光定量PCR方法观察对成骨细胞BMP2基因表达的影响。结果表明,麦角甾苷和松果菊苷均能促进大鼠成骨细胞BMP2基因的表达。

高效液相色谱法测定蜜桶花颗粒及其原植物来江藤中的麦角甾苷

建立了用高效液相色谱法测定蜜桶花颗粒及其原植物来江藤中麦角甾苷含量的方法。实验采用C18柱,以甲醇 0 5%醋酸水(体积比为42∶58)为流动相,在334nm检测波长处检测。结果表明:麦角甾苷的进样量为0 029～2 038μg时,进样量与色谱峰面积有良好的线性关系(r=0 9998);回收率为90 2%～93 8%;方法的精密度好,相对标准偏差(RSD)为0 34%(n=5)。方法快速、简便、准确,所测结果稳定、重现性好,可作为蜜桶花颗粒质量控制的一个检测方法。

麦角甾苷眼用固体脂质纳米粒制备及其体外释药的研究

[目的]研究麦角甾苷眼用固体脂质纳米粒的制备方法及其体外释放的情况。[方法]采用乳化蒸发-低温固化法制备麦角甾苷固体脂质纳米粒,超滤离心法测其包封率,并对其粒径、电位、进行进一步考察,用差示扫描量热仪(DSC)表征其性质,采用透析法考察固体脂质纳米粒中麦角甾苷的体外释放行为。[结果]麦角甾苷固体脂质纳米粒的平均粒径为85.56 nm,Zeta电位约为-20.97 m V,药物平均包封率为88.31%,DSC表明其理化性质稳定可靠,体外12 h累计释放率62.46%。[结论]制备的麦角甾苷固体脂质纳米粒包封率较高,粒径小且分布均匀,有良好的缓释作用。

熟地黄麦角甾苷对小鼠肾毒血清肾炎治疗作用的研究

目的:观察麦角甾苷对小鼠肾毒血清肾炎的作用,以期将麦角甾苷开发成治疗肾炎的新药。方法:采用小鼠肾毒血清肾炎模型,给予麦角甾苷10、30、90mg／kg口服,给药5天和10天后作肾功能及肾组织学检测。结果:给药5天和10天后,麦角甾苷三个剂量都能明显降低尿蛋白、尿素氮、总胆固醇(p值分别<0．05,<0．01,<0．001);明显升高白蛋白(p值分别<0．05,<0．01,<0．001)。肾组织学检测发现三个给药组肾小球基底膜增厚程度均轻于模型组,肾小管蛋白管型亦比模型组轻。结论:麦角甾苷对小鼠肾毒血清肾炎有良好的治疗作用,提示麦角甾苷对于人类免疫性肾炎可能具有一定的临床意义和应用前景。

藏药短管兔耳草中松果菊苷和麦角甾苷的RP-HPLC分析

建立了藏药短管兔耳草中松果菊苷和麦角甾苷含量的高效液相色谱分析法。采用Waters XTerra RP18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),以甲醇-1%冰醋酸溶液(28:72,V:V)为流动相,流速1.0mL/min,检测波长330nm,柱温30℃,在20min内分离检测了该两种化合物。松果菊苷和麦角甾苷进样量分别在0.077~4.950μg(r=0.9999)和0.085~5.450μg(r=0.9999)内呈良好线性,平均加样回收率分别为98.35%和92.50%,RSD分别为2.35%和2.86%。所建立的方法简便、快捷、结果准确可靠,重现性好,可用于藏药短管兔耳草的质量控制,并为兔耳草属植物中苯丙素苷类化合物的分离分析提供一定的参考。

HPLC法同时测定新止骨增生丸中麦角甾苷、柚皮苷和芒柄花素的含量

目的w建立同时测定新止骨增生丸中麦角甾苷、柚皮苷和芒柄花素含量的方法。方法w采用HPLC法。色谱柱为KromasilwC18柱（250wmm×4.6wmm,5μm）;流动相为甲醇-体积分数为0.1%的磷酸水溶液,梯度洗脱;流速为1.0wmwL·min^-1;检测波长为283wnm;柱温为35℃。结果w麦角甾苷、柚皮苷和芒柄花素的质量浓度分别在36.00-360.0wmg·L^-1、14.30-143.0wmg·L^-1和13.00-130.0wmg·L^-1内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为0.999w7、0.999w9和0.999w8,平均回收率分别为98.9%、98.7%和99.1%（n=9）,RSD分别为1.1%、1.9%和1.4%。结论w本方法简便、准确、重复性良好,可作为新止骨增生丸的质量控制方法之一。

高效液相色谱法测定康力宝口服液中麦角甾苷含量

目的 建立康力宝口服液中麦角甾苷的高效液相色谱含量测定方法。方法 采用Shim-pack vp-ODS柱（4．6mm×150mm，5μm），以甲醇-乙腈-四氢呋喃-0．1mol·L^-1醋酸钠缓冲液（冰醋酸调pH至4．0）（8：8：7：77）为流动相，流速为1．0ml／min，检测波长为334nm，灵敏度为0．05AUFS。结果 麦角甾苷在4．05～64．80μg·ml^-1范围内呈良好的线性关系，r=0．9998。平均回收率99．65％，RSD为2．10％（n=5）。结论 方法简便、准确、重现性好，可用于该制剂的质量控制。

松果菊苷及异麦角甾苷对神经细胞尼古丁受体表达的影响

目的研究肉苁蓉活性成分松果菊苷及异麦角甾苷对神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞神经型尼古丁受体表达的影响及其对抗β淀粉样蛋白(Aβ)神经毒性作用机制,以了解其神经保护作用机制。方法比色法测定细胞MTT还原率筛选松果菊苷及异麦角甾苷安全浓度范围,并用Aβ25-35处理细胞后,测定MTT还原率,蛋白质印迹法(Western blot)测定尼古丁受体α3、α7蛋白表达的变化。结果松果菊苷及异麦角甾苷能提高细胞α3及α7神经型尼古丁受体亚单位蛋白质表达水平,呈剂量依赖关系;并能对抗Aβ25-35引起的α3和α7受体亚单位蛋白质水平降低,减弱Aβ25-35引起的细胞损伤。结论松果菊苷及异麦角甾苷可能通过上调神经型尼古丁受体亚单位蛋白来发挥神经保护作用,在阿尔茨海默氏病的治疗中可能起到一定作用。

正交设计优化肉苁蓉中麦角甾苷提取工艺

目的:优选肉苁蓉最佳提取工艺。方法:根据肉苁蓉中各药物化学成分及药理作用,在单因素考察影响提取物出膏率和有效成分含量基础上,采用正交试验设计,以提取物麦角甾苷含量为考察指标,对影响麦角甾苷提取因素的工艺溶剂乙醇浓度、液料比及提取时间进行试验。结果:最佳提取工艺为药材中加入10倍量60%的乙醇回流提取,提取2h。结论:该工艺下的肉苁蓉中麦角甾苷含量提取可达0.397%。

肉苁蓉中麦角甾苷对照品的制备及含量测定

目的:研究肉苁蓉中麦角甾苷标准品的制备及含量测定方法。方法:运用半制备高效液相色谱法分离纯化麦角甾苷,采用薄层色谱法和高效液相色谱面积归一化法检测纯度,波谱法鉴定其结构,反相高效液相色谱法测定肉苁蓉药材中麦角甾苷的含量。结果:制备的化合物鉴定为麦角甾苷,纯度为98%以上;含量测定在0.094～0.940μg范围内呈良好线性关系,r=0.9998,平均回收率为102.2%,RSD为2.31%(n=6)。结论:该制备方法效率高,所得化合物纯度高,可用于大量制备;含量测定方法准确、简便、可靠、重复性好。

HPLC法测定苁黄补肾胶囊中麦角甾苷的含量

目的建立苁黄补肾胶囊中麦角甾苷的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Hypersil ODS2柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-甲醇-1%冰醋酸(13∶9∶78),流速1.0mL/min,柱温40℃,进样量为10μL,检测波长为334nm。结果麦角甾苷在0.1085μg～0.6507μg范围内与其峰面积呈良好的线性关系,r=0.9991,平均回收率为98.42%,RSD=1.89%(n=5)。结论该方法测定苁黄补肾胶囊中麦角甾苷的含量简便、快速、可行,可用于苁黄补肾胶囊的质量控制。

高效液相色谱法测定肉苁蓉中麦角甾苷的含量

目的:建立了肉苁蓉中麦角甾苷的含量测定方法.方法:采用Kromasil C18.(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流速1ml/min.流动相:甲醇-水(含磷酸0.04%)为35:65;检测波长为331nm;柱温35℃.结果:麦角甾苷在0.068-2.72μg范内与峰面积呈良好线性关系(回归方程为A=192.57C-2.896,r=0.9999),平均回收率为98.7%,RSD为1.41%(n=5).结论:本方法简便、重现性良好、结果准确可靠.