甾醇C-4脱甲基多酶体系中Erg28p蛋白的关键作用位点分析

酿酒酵母细胞膜中含有丰富的甾醇类活性物质,是活性维生素D及激素类药物的重要中间体。生物甾醇合成反应中,甾醇C-4位脱甲基反应过程复杂,是甾醇活化的关键步骤,涉及了三步连续的氧化还原反应。通过生物信息学分析预测Erg28p蛋白的关键作用位点,构建了一组Erg28p蛋白的截短突变表达载体,分别检测其麦角甾醇合成代谢途径中的中间代谢物,发现并证实了Erg28p蛋白的关键作用残基63-72位氨基酸对酿酒酵母甾醇合成代谢的影响。

烟曲霉Afssn3缺失菌株对伊曲康唑耐药的转录组学分析

在烟曲霉Afssn3缺失菌株和野生型对照菌株中分别加入伊曲康唑进行处理,并应用Illumina二代测序技术对两组样本进行转录组学测序和生物信息学分析.结果发现:经伊曲康唑处理后,Afssn3敲除菌株类固醇生物合成通路中cyp51A(erg11A)、erg24B、mes01(erg25)、smt1(erg6)、sc5dl(erg3)等基因表达显著上调,外排泵ABC转运蛋白相关的mdr4基因也显著上调;烟曲霉Afssn3敲除后,菌株可通过上调麦角固醇合成通路的药靶基因cyp51A(erg11A)和药物外排泵的转录水平等导致耐药.该研究揭示了烟曲霉Afssn3基因敲除菌株和野生型对照菌株经伊曲康唑刺激后,会出现表达差异的信号通路和相应的基因.这为烟曲霉耐药分子调控机制的研究提供了新的线索和依据.