大鼠颌下腺黄体生成素及其受体的定位、核心片段的克隆及序列分析

目的探讨大鼠颌下腺组织中是否表达黄体生成素(LH)及其受体(LHR),为进一步研究LH对颌下腺的功能调节提供理论依据。方法采用免疫组织化学SABC和原位杂交方法进行定位研究;应用RT-PCR方法克隆获得LH及LHR基因的cDNA核心序列,并进行序列分析。结果大鼠颌下腺浆液性腺泡上皮细胞呈LH和LHR免疫反应阳性。阳性物质分布于胞浆,胞核呈阴性反应。上述细胞同样含有LH和LHR mRNA杂交信号,信号物质亦分布于胞浆内,胞核呈阴性反应。从大鼠颌下腺组织中扩增的LH及LHR基因的特异性条带经序列分析发现,扩增产物的LH基因序列与文献报道的大鼠腺垂体的完全一致;扩增产物的LHR基因序列与大鼠睾丸组织的完全一致。结论大鼠颌下腺浆液性腺泡上皮细胞既能产生LH,又能表达LHR,提示LH对颌下腺浆液性腺泡上皮细胞的作用可能是通过自分泌或旁分泌来实现的。

季节因素对大鼠睾丸黄体生成素受体影响的实验研究

目的 探索季节变化对大鼠睾丸细胞膜黄体生成素 ( L H)受体的影响及其生理机制。 方法 采用大鼠松果体摘除模型 ,运用放射配体结合分析 ( RBA)方法测定冬夏季节大鼠睾丸细胞膜 LH受体变化。 结果 正常组睾丸细胞膜 L H受体最大结合量和结合力在冬夏季节存在明显差异 ( P<0 .0 1 ) ,表现出冬高夏低的变化 ;松果体摘除模型组睾丸细胞膜 L H受体最大结合量和结合力在冬夏季节无明显差异 ;正常组和模型组之间睾丸细胞膜 L H受体数目存在显著差异。 结论 季节因素对 L H受体蛋白的表达有调节作用 ;松果体可能是 L

大鼠下颌下腺卵泡刺激素、黄体生成素的分布及与促性腺激素释放激素受体的共定位研究

目的 研究卵泡刺激素 (FSH)和黄体生成素 (LH)在大鼠下颌下腺中的定位、分布及与促性腺激素释放激素受体 (GnRHR)共定位的关系。 方法 采用邻片免疫组织化学共定位方法。 结果 大鼠颌下腺浆液性腺泡上皮细胞、分泌管、排泄管及颗粒曲管上皮细胞均呈FSH和LH免疫反应阳性 ,阳性颗粒分布在细胞质内 ,细胞核阴性。邻片共定位结果显示颌下腺GnRHR免疫反应阳性细胞同样呈FSH免疫反应阳性 ,大部分的GnRHR免疫反应阳性细胞呈LH免疫反应阳性 ,小部分呈免疫反应阴性。两种免疫反应阳性物质均分布在细胞质内 ,细胞核阴性。 结论 大鼠下颌下腺浆液性腺泡上皮细胞、分泌管、排泄管和颗粒曲管上皮细胞可能以自分泌或旁分泌的GnRH调节自身合成与分泌FSH和LH。

发情周期不同阶段牦牛子宫中黄体生成素受体的表达变化

为研究发情周期不同阶段牦牛子宫中黄体生成素受体(LHR)的定位及表达变化,笔者利用免疫组织化学SP法分别检测发情期、发情后期、间情期和发情前期牦牛子宫中LHR的表达,并进行光密度值分析。结果表明,LHR免疫阳性产物在牦牛子宫腺上皮细胞、基质细胞、血管内皮细胞、血管平滑肌细胞和肌层平滑肌细胞中均有表达;腺上皮细胞、基质细胞和肌层平滑肌细胞中LHR在发情前期和发情期表达最弱,发情后期表达增加,间情期表达最强(P<0.05);子宫内膜血管平滑肌细胞中LHR的表达在发情期最强,间情期最弱(P<0.05);血管内皮中LHR在发情期和发情前期表达很强,发情后期和间情期显著下降(P<0.05)。结果表明LHR参与了发情周期不同阶段牦牛子宫功能变化的调控。

黄体生成素受体基因在牦牛发情周期不同阶段生殖系统中的表达模式

旨在检测黄体生成素受体(Luteinizing hormone receptor,LHR)基因在牦牛发情周期不同阶段生殖系统中的表达。实验选取青海健康的处于卵泡期和黄体期的2岁龄雌性牦牛各3头,根据黄牛LHR基因序列5'端和3'端的保守序列设计特异性引物,利用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)法分析牦牛发情周期不同阶段,生殖系统中LHR基因的相对表达量。结果显示,LHR基因在牦牛发情周期不同阶段生殖系统中的表达量存在差异,卵巢和输卵管中卵泡期LHR基因的表达量高于黄体期,黄体期子宫中LHR基因的表达量高于卵泡期。研究表明牦牛在发情周期不同阶段生殖系统中LHR基因的表达量存在差异,提示LHR在牦牛的繁殖过程中对生殖系统具有重要的调节作用。

补肾促排方对大鼠卵巢颗粒细胞黄体生成素受体和卵泡刺激素受体的影响

目的通过体外实验阐述补肾促排方治疗多囊卵巢综合征的药理学作用机制。方法提取与鉴定大鼠卵巢颗粒细胞,提取补肾促排方水溶液。实验分为补肾促排方低、中、高剂量组和空白对照组,分别相应处理分离与鉴定的大鼠卵巢颗粒细胞24 h后提取mRNA,48 h后提取蛋白。通过RT-PCR和Wester-blot法分别检测各组黄体生成素受体(LHR)和卵泡刺激素受体(FSHR)mRNA和蛋白表达水平。结果补肾促排方水溶液能够显著上调大鼠卵巢颗粒细胞LHR和FSHR mRNA和蛋白表达水平(P均<0.05),且呈现显著的浓度梯度依赖效应。结论补肾促排方通过上调卵巢颗粒细胞LHR和FSHR的表达,促进卵泡的发育与排出,从而起到治疗多囊卵巢综合征的作用。

促黄体生成素受体在雌性山羊背根神经节中的表达分析

采用免疫组织化学SP法检测雌性山羊颈-4、胸-6、腰-2节段背根神经节(DRG)中促黄体生成素受体(LHR)的表达水平及分布特征,研究DRG中是否有促黄体生成素(LH)作用的靶细胞以及LHR在DRG中的分布特点。结果显示:在颈-4、胸-6DRG中,LHR免疫反应阳性物质主要分布在中小型神经元胞体中,LHR为强阳性或中等阳性;而大型神经元胞体不着色,LHR为阴性反应。在腰-2DRG中,LHR免疫反应阳性物质在中小型神经元胞体中的分布特征与在颈-4、胸-6DRG中的分布特征相似;但LHR在大型神经元胞体上为弱阳性反应。图像分析结果显示:颈-4、胸-6、腰-2DRG内神经元胞体上LHR的相对表达量极显著高于节内其它阳性结构(P<0.01)。另外,在颈-4、胸-6、腰-2DRG三节段之间,节内阳性神经元胞体上LHR的相对表达量也存在显著性差异(P<0.01或0.05)。研究表明,雌性山羊DRG中存在LHR,且中小型神经元胞体是LH发挥作用的主要靶细胞,揭示LH可能会通过作用于躯体-内脏感觉DRG内中小型神经元胞体上的LHR来参与调节动物机体各器官的温度觉、痛觉和触觉的传递以及与伤害性刺激等有关的感觉神经活动。

围着床期小鼠卵巢黄体生成素受体和血管内皮生长因子表达的免疫组织化学研究

目的探讨黄体生成素受体（LHR）和血管内皮生长因子（VEGF）在围着床期小鼠卵巢中的生物学作用。方法应用免疫组织化学SABC法和图像分析,检测LHR与VEGF在昆明小鼠（n=28）动情期、孕1d、孕4d和孕6d卵巢中的分布状况和变化规律。结果LHR与VEGF免疫阳性细胞具有相似的分布和变化规律。在动情期,较大的卵泡周围的基质细胞呈强阳性着色,与其他组相比,差异显著（P＆lt;0.05）。随着妊娠的继续,颗粒黄体细胞的着色逐渐增强,在孕6d时表达最强。在动情期和孕1d,部分血管内皮和血细胞分别呈VEGF和LHR强阳性着色。从孕1d开始,卵泡膜细胞呈LHR阳性着色。结论LHR和VEGF的表达与围着床期小鼠卵巢中卵泡的发育、排卵和黄体形成过程密切相关。

特发性性早熟女童黄体生成素受体基因Asp^(578)Gly激活突变的研究

目的 研究黄体生成素受体 (LHR)基因Asp578Gly突变与女童特发性性早熟的关系。 方法 选择 5名特发性性早熟女童 ,口腔拭子提取DNA ,用 5’ -CACTGCTGGCTTTTTCACTGTATT -3’和 5’ -TGAAGGCAGCTGAGATGGCAAAAA -3’作引物 ,经常规PCR扩增后 ,用限制性内切酶MspI消化 ,以检测LHR基因是否存在A173 3G的单碱基突变。 结果 5名性早熟女童的黄体生成素受体基因均未检测到Asp578Gly突变。 结论 Asp578Gly突变不是女童特发性性早熟的主要病因。

胰岛素对卵巢颗粒细胞黄体生成素/绒毛膜促性腺激素受体表达的影响

目的 :研究胰岛素 ( INS)对猪卵巢颗粒细胞黄体生成素 /绒毛膜促性腺激素( L H/ CG)受体表达的影响 ,探讨高胰岛素血症可能在多囊卵巢综合征 ( PCOS)卵泡发育停滞中的作用。方法 :采用逆转录聚合酶链反应 ( RT-PCR)及其蛋白免疫印迹 ( Westernblot)法分别对加药处理的 4组猪卵巢颗粒细胞检测 LH/ CG受体的 m RNA及其蛋白表达。结果 :RT-PCR结果表明卵泡刺激素 ( FSH) +INS组 ( 0 .2 47± 0 .0 44)与 FSH组( 0 .1 61± 0 .0 2 3 )相比 L H/ CG受体 m RNA表达明显增强 ( P<0 .0 5) ;FSH+L H+INS组( 0 .2 40± 0 .0 3 0 )与 FSH+L H组 ( 0 .1 2 1± 0 .0 1 3 )相比 ,L H/ CG受体 m RNA表达明显增强 ( P <0 .0 1 )。 Western blot结果表明 FSH +INS组 ( 570 2 .3± 81 5.9)、与 FSH组( 3 81 3 .0± 3 48.5)相比 L H/ CG受体蛋白表达明显增强 ( P<0 .0 5) ;FSH+L H+INS组( 5898.8± 93 3 .8)与 FSH+L H组 ( 2 42 1 .0± 3 41 .5)相比 L H/ CG受体蛋白表达明显增强 ( P<0 .0 1 )。结论 :INS可以协同 FSH及 L H增强卵巢颗粒细胞 L H/ CG受体的表达 ,推测高胰岛素可能通过增强 L H+CG受体表达使 PCOS患者发育至窦状卵泡阶段的卵泡颗粒细胞过早黄素化 ,导致卵泡发育停滞。

黄体生成素和褪黑素受体在不同日龄雏鸵鸟睾丸内的分布研究

采用免疫组织化学SABC法对1 d、30 d和90 d雏鸵鸟睾丸内黄体生成素(luteinizing hormone,LH)和褪黑素受体(melatonin receptor,MR)的分布进行定位,结果显示:LH阳性细胞胞质或胞膜出现棕黄色,胞核无阳性反应;MR阳性反应颗粒呈棕褐色或棕黄色,位于胞质、胞膜或胞核,呈散在均一或不均匀分布。LH和MR在雏鸵鸟睾丸内的分布特点均随年龄变化,这两种物质在1 d鸵鸟睾丸内均有分布,但在30 d睾丸内两者均未检测到;LH在90 d鸵鸟睾丸内有分布,但其阳性表达较弱,而在此发育阶段未检测到MR阳性产物。

子宫内膜癌组织中卵泡刺激素受体、黄体生成素受体的表达及意义

目的:研究子宫内膜癌组织中卵泡刺激素受体(FSHR)和黄体生成素受体(LHR)的表达情况及其意义。方法:运用免疫组化S-P法检测78例子宫内膜癌标本中FSHR和LHR的表达。结果:FSHR和LHR在高分化内膜癌中的表达阳性率分别为70.6%和70.1%,在中分化内膜癌中的表达阳性率分别为37.8%和45.9%,在低分化内膜癌中的表达阳性率分别为20.8%和25.0%。子宫内膜癌组织中FSHR和LHR表达水平具有相关性(r=0.371,P<0.01)。结论:FSHR和LHR在子宫内膜癌组织中均有表达,且表达水平同组织分化程度密切相关。子宫内膜癌患者可能从针对FSHR和LHR的辅助性内分泌治疗中获益。

抗苗勒管激素Ⅱ型受体、促卵泡激素受体、促黄体生成素受体与卵巢储备关系

目的:探讨不同卵巢储备女性卵泡液及颗粒细胞中抗苗勒管激素Ⅱ型受体(AMHRⅡ)、促卵泡激素受体(FSHR)、促黄体生成素受体(LHR)表达及其相关性。方法:选取2016年12月30日—2019年5月30日在天津爱维医院行体外受精-胚胎移植女性110例,根据患者卵巢功能分为卵巢功能正常组43例、卵巢功能减退(DOS)组37例、卵巢早衰(POF)组30例。获取各组卵泡液及颗粒细胞,qRT-PCR法检测AMHRⅡ、FSHR、LHR m RNA的相对表达量。结果:POF组年龄、体质指数、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)高于正常组和DOS组,窦卵泡个数、获卵个数、AMH、雌二醇(E2)、孕酮(P)低于正常组和DOS组(P<0.05)。AMHRⅡ、FSHR、LHR相对表达量POF组最低、DOS组次之、功能正常组最高(P<0.05)。相关性分析显示,正常组FSHR与LHR、AMHRⅡ表达量呈正相关,LHR与AMHRⅡ表达量呈正相关(均P<0.05);DOS组FSHR与LHR、AMHRⅡ表达量呈正相关,POFFSHR与AMHRⅡ表达量呈正相关(P<0.05)。结论:不同卵巢储备女性AMHRⅡ、FSHR、LHR表达量存在差异,提示其可能参与了卵巢储备异常的发生。

RNase保护法同时检测黄体生成素受体及17α－羟化酶的mRNA

睾酮是组织中主要雌激素雌二醇的前体，在卵巢内睾酮绝大部分转为雌二醇．睾酮的生成直接受垂体的黄体生成素和睾酮合成的限速酶１７α羟化酶的调控．用液相杂交的方法，同时检测了卵巢组织中黄体生成素受体和１７α－羟化酶的基因表达，并摸索出了最适条件．为今后进一步研究卵巢的功能，提供了新的手段．

何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织黄体生成素受体的影响

目的：探讨何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织黄体生成素受体（LHR）的影响。方法：复制运动疲劳动物模型，测定睾酮水平，采用RT-PCR、免疫印迹和免疫组织化学法检测各组睾丸组织LHR的表达变化。结果：LHR免疫组化阳性颗粒主要表达于问质细胞以及精母细胞胞膜和胞质，何首乌饮预防组和何首乌饮治疗组阳性信号较强，模型组最弱。LHR蛋白和mRNA表达变化为：何首乌饮预防组、何首乌饮治疗组明显高于对照组和何首乌饮组，模型组明显低于对照组。结论：何首乌饮可以提高大鼠睾丸组织LHR的表达。

大鼠垂体前叶5-羟色胺受体及黄体生成素免疫组织化学定位研究

目的：研究５－羟色胺受体在大鼠脑垂体前叶中的分布及５－羟色胺受体与黄体生成素的共存关系。方法：免疫组织化学ＡＢＣ法。结果：大鼠脑垂体前叶分布有５－羟色胺受体免疫反应阳性细胞，胞体较大，多边形或卵圆形；黄体生成素阳性的内分泌细胞中含有５－羟色胺受体。结论：存在于垂体前叶的５－羟色胺能神经纤维，可能在垂体前叶的５－羟色胺受体介导下，直接参与垂体激素的合成与释放的调节。

黄体生成素受体基因的激活突变与青春期发育关系的研究进展

黄体生成素受体 (L HR)基因突变会影响人类尤其是男性的性发育。本文从黄体生成素受体基因的定位、激活突变的类型、对两性性发育的影响以及可能的致病机制等方面对国外 L

鸡胚性腺内黄体生成素受体和类固醇激素合成酶基因的性别差异性表达

促性腺激素受体，包括黄体生长素受体（LHR）和卵泡刺激激素受体，通过调节粝固醇激素合成和细胞增殖从而对性腺的发育和功能起重要作用。虽然鸟类的性别由性染色体所决定，但性腺的发育要受到很多诸如类固醇激素这样因素的影响。既然雄性和雌性的性腺有不同的形态特征和功能，促进性腺激素和类固醇激素对它们发育的调节作用不可能是不同的。本实验的目的是研究鸡胚发育过程中性腺内LHRmRNA表达的变化及其与类固醇激素合成酶mRNA的相关性。在孵化的第10天至孵化后第14之间取出鸡胚的性腺，然后用Northern杂交法检测LHR和P450c17及P450arom mRNA的表达。结果显示：在孵化期间LHR mRNA有3．0和1．5kb两种转录产物，孵化后还出现7．0kb的转录物（Fig.1）。在孵化期间1．5kb转录物的含量高于3．0kb的转录物，而孵化之后则相反。卵巢内LHRmRNA（3．0kb）的水平从孵化的第12天开始升高，两天这后达一高峰，此后一直保持在较高水平。与此不同的是睾丸内LHRmRNA的表达量在孵化期间较低，孵化后立即升高（Fig.2)。P45c17mRNA的表达与LHRmRNA相似（Figs,3&4)。P450arom mRNA基卵巢内的表达量较高，孵化后其主带从2．0kb转变为4．0kb。睾丸内P450arom mRNA的表达量极低（Figs.5&6)。在相应的时期，左侧和右侧睾丸内三种基因的表达水平都无显著差别。孵化前后，这三种基因表达所发生的较大变化可能与此时性腺内合成类固醇激素细胞的发育有关。在胚胎卵巢内，LHR、P450c17和P450arom mRNA的表达量较高，提示：雌性胚胎性腺内粝固醇激素合成作用要强于雄性胚胎。

黄体生成素受体mRNA结合蛋白的研究进展

黄体生成素受体(LHR)在生殖和发育过程中发挥重要作用。女性排卵前期的黄体生成素(LH)峰及药理剂量的人绒毛膜促性腺激素(hCG)可导致LHR的下调,而在受体下调的大鼠卵巢细胞质中发现LHR mRNA结合蛋白(LRBP)。研究表明,LH/hCG与受体结合后激活cAMP/PKA/ERK通路及miR-122表达,导致LRBP表达量增加;LHR mRNA与LRBP结合后,诱导翻译沉默,并转移至P小体,导致LHR mRNA降解,与排卵前期受体的脱敏过程密切相关。该文就LRBP的研究进展进行综述。