改良的黄嘌呤氧化酶法测定动植物组织中SOD比活力

针对黄嘌呤氧化酶法测定动植物组织中SOD活力存在干扰的问题,对方法加以改良。以使SOD变性而不影响干扰物质的干扰值为原则,通过测定酶活力及圆二色光谱寻找制备样品空白的最佳实验条件,设计经过加热的样品空白;利用扣除法排除样品中其他物质对黄嘌呤氧化酶体系的干扰;通过加标回收实验以及对动植物组织的实测,对改良前后的测定结果进行比较。结果表明:用改良的黄嘌呤氧化酶法可使动植物组织中SOD活力的检测结果更准确。

丝印电极法体外筛选黄嘌呤氧化酶抑制剂方法研究

建立丝印电极快速筛选黄嘌呤氧化酶(XO)抑制剂的新方法.利用丝网印刷技术制作一次性使用的丝印碳糊电极,采用吸附法将羧基化的多壁碳纳米管(MWNTs)修饰在电极表面,建立测定尿酸(UA)的简单快捷的计时电流分析方法,将该法应用于XO抑制剂的体外筛选.在0.3V(vs.Ag/AgCl)的工作电位下,UA在MWNTs修饰的丝印电极上产生灵敏的响应电流,响应时间30s,测定UA的线性范围为2～300μmol·L-1,线性方程为Y(μmol·L-1)=43.8240X(μA)-0.1592,r=0.9998,最低检出限为1μmol·L-1.用该法对4种中药水提物进行了筛选,相对空白对照组,桑寄生500μg·mL-1浓度组有显著性差异.该法简单、快速,电极制作成本低,所需仪器简单,适用于体外大量筛选XO抑制剂.

微量热法研究黄嘌呤氧化酶反应

在热导式热量计双参数理论模型的基础上，建立了较快酶促反应研究的双参数初始速率法的热动力学模型．用微量热法研究了黄嘌呤氧化酶催化氧化黄嘌呤的热动力学．该较快酶促反应遵循Michaelis－Menten动力学，在298．15K和pH=7．5时，其米氏常数（Km）为1.04×10(－3)mol·L(－1)，与文献结果相符.

土茯苓中抑制黄嘌呤氧化酶活性成分提取工艺优化及其酶动力学研究

目的优化土茯苓中抑制黄嘌呤氧化酶活性成分提取工艺,并考察其酶动力学。方法在单因素试验基础上,以乙醇体积分数、提取时间、提取温度为影响因素,黄嘌呤氧化酶活性抑制率为评价指标,响应面法优化提取工艺。分别通过Lineweaver-Burk图、Dixon图确定其抑制类型、抑制动力学常数K i。结果最佳条件为乙醇体积分数69%,提取时间89 min,提取温度82℃,黄嘌呤氧化酶活性抑制率为62.25%。抑制类型为竞争性可逆抑制,K i为1.92 mg/mL。结论该方法稳定可靠,可用于提取土茯苓中抑制黄嘌呤氧化酶活性成分。

平板扩散法测定黄嘌呤氧化酶的活性

通过对Arthrobacter sp.X11菌株所产黄嘌呤氧化酶(XOD)活性测定方法的研究和比较,建立一种简便可行的黄嘌呤氧化酶活性快速检测方法,即平板扩散法.实验结果表明,该方法测得的显色圈直径与辣根过氧化物酶分光光度法测得的酶活力之间有良好的线性关系,通过测量显色圈的直径即可估算出样品的酶活力.

黄嘌呤氧化酶法优化大鼠血清SOD测定条件的探讨

目的优化黄嘌呤氧化酶法测定大鼠血清SOD实验条件。方法采用黄嘌呤氧化酶法,探讨其加样量、方法重复性、显色稳定性、试剂稳定性及样品稳定性等最佳因素。结果黄嘌呤氧化酶法测定大鼠血清SOD最佳加样量为5μl,其测定变异系数CV<1%,显色前后20 min吸光度比较(P>0.05);新配试剂与配制3个月试剂做测定,吸光度比较(P<0.01);新鲜标本和4°C放置48 h标本进行测定,吸光度比较(P<0.01)。结论黄嘌呤氧化酶法测定大鼠血清SOD最佳加样量为5μl,该法重复性好,显色稳定,测定试剂必须新鲜配制,标本必须新鲜制备。

超声辅助提取苦丁茶多糖的工艺优化及其对黄嘌呤氧化酶抑制活性

目的:优化苦丁茶多糖的提取工艺,分析其对黄嘌呤氧化酶的抑制活性。方法:以得率为指标,采用响应面优化超声辅助法研究料液比、超声时间、超声温度、超声功率对苦丁茶多糖的得率的影响;通过体外实验测定苦丁茶多糖对黄嘌呤氧化酶的抑制率及其动力学常数K_(i)。结果:响应面试验优化条件为:料液比1:25 g/mL,超声时间60 min,超声温度40℃,超声功率260 W,得到得率为5.85%。苦丁茶多糖对黄嘌呤氧化酶的抑制率随物质量浓度增大而增加,IC_(50)为1.28 mg/mL,其对黄嘌呤氧化酶抑制作用类型属于竞争性可逆抑制,抑制动力学常数K_(i)为0.62 mg/mL,结论:苦丁茶多糖能够抑制黄嘌呤氧化酶的活性,其可作为潜在的预防高尿酸血症的食品或保健品进行深入研究,以期对苦丁茶的综合利用提供理论数据。

微波辅助低共熔溶剂优化橘红花柚皮苷提取工艺及其对黄嘌呤氧化酶抑制活性研究

采用微波辅助低共熔溶剂(DES)对橘红花中的柚皮苷进行提取,在单因素试验结果的基础上,采用Box-Behnken响应面法对提取工艺进行优化,并研究柚皮苷对黄嘌呤氧化酶(XOD)的体外抑制作用。结果表明,橘红花柚皮苷得率的最佳工艺条件为:以氯化胆碱-乙醇为提取溶剂(物质的量比为1∶2),含水量38%,液料比20∶1(mL/g),微波时间20 s,微波功率为350 W。在该条件下橘红花柚皮苷得率为4.42%,与预测值接近。体外抑制XOD实验结果表明,柚皮苷对XOD的IC_(50)为2.229μg/mL。提取工艺稳定可靠,可用于橘红花柚皮苷的提取,并且柚皮苷具有较强的抑制XOD活性,为橘红花的进一步开发利用提供了科学依据。

微量热法研究黄嘌呤氧化酶反应

微量热法研究黄嘌呤氧化酶反应梁毅，汪存信，屈松生吴元欣，李定或（武汉大学化学系武汉４３００７２）（武汉化工学院化工系武汉４３００７２）我们已经用微量热法并结合单参数初始速率法的热动力学模型研究了过氧化氢酶反应［１］。在此基础上，本文结合热导式热量计的...

玉米须抑制黄嘌呤氧化酶活性成分的提取工艺研究

以玉米须为原料,采用索氏提取法提取玉米须黄酮类化合物,并研究其体外抑制黄嘌呤氧化酶活性。分别以乙醇浓度、提取温度和液料比为单因素,以黄酮得率和黄嘌呤氧化酶的抑制率为考察指标,以提取总效果值为评价指标,通过正交实验设计优化玉米须抑制黄嘌呤氧化酶活性成分的索氏提取工艺。结果表明,最佳提取条件为乙醇浓度为60%,提取温度为80℃,料液比为30∶1(mL/g),在此条件下进行试验,得到玉米须抑制黄嘌呤氧化酶活性成分的提取总效果值为49.23%

黄嘌呤氧化酶在SWNTs+DDAB/EPG上的电化学性质研究

目的:制备双十二烷基二甲基溴化铵与单壁碳纳米管修饰热解石墨电极(SWNTs+DDAB/EPG),研究黄嘌呤氧化酶在SWNTs+DDAB/EPG上的电化学性质。方法:采用循环伏安法对黄嘌呤氧化酶的电化学行为进行测定。结果:SWNTs+DDAB/EPG增大了黄嘌呤氧化酶的氧化还原峰电流强度,黄嘌呤氧化酶的峰电位随着pH值的增加向负电位方向移动。结论:SWNTs+DDAB/EPG对黄嘌呤氧化酶的氧化还原反应具有催化作用,并且酸度影响其电化学行为。

麻风病人自由基代谢紊乱与黄嘌呤氧化酶过氧化氢酶的活性变化

采用分光光度法测定黄嘌呤氧化酶及过氧化氢酶的活性,分析酶活性与麻风病人体内自由基代谢紊乱的关系。结果显示麻风病人(活动期和愈复期)与正常人比较,黄嘌呤氧化酶活性的差异无显著意义(P>0.05),说明病人体内自由基代谢紊乱与黄嘌呤氧化酶无关;然而愈复期病人(其麻风菌已被抗麻风药物杀灭)过氧化氢酶增加,甚至超越正常水平(P<0.05)。

藜蒿茎抑制黄嘌呤氧化酶活性成分提取条件优化及其成分分析

以黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase,XOD)抑制活性为监测指标,采用乙醇回流提取法提取藜蒿茎活性成分。首先进行单因素实验,然后以此为基础,通过响应曲面法优化藜蒿茎中抑制XOD活性成分提取条件,最后通过超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱仪(UPLC/Q-TOF-MS/MS)对藜蒿茎乙醇提取液定性分析。结果表明,最佳提取条件为乙醇浓度53%,提取温度79℃,液料比34∶1(mL/g),在此条件下得到提取液的XOD活性抑制率为56.4%。鉴定出藜蒿茎乙醇提取液的主要成分包括新绿原酸(5-CQA)、绿原酸(3-CQA)、异绿原酸b(3,4-diCQA)、异绿原酸a(3,5-diCQA)、1,5-二咖啡酰基奎宁酸(1,5-diCQA)和异绿原酸c(4,5-diCQA)。

拐枣中总黄酮提取工艺优化及其抗黄嘌呤氧化酶活性研究

为了研究拐枣总黄酮(TF)最佳提取工艺及其体外抗黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XO)活性。在单因素试验基础上,实验选择料液比、提取时间和乙醇浓度为自变量,应用Box-Benhnken中心组合法进行3因素3水平试验设计,以拐枣总黄酮得率为响应值,进行响应面分析,并采用D101大孔树脂对总黄酮进行进一步富集纯化,在此基础上研究拐枣总黄酮体外抗XO活性。结果表明,拐枣总黄酮的最佳提取条件为料液比15.0 mL/g、提取时间1.85 h、乙醇浓度53.0%,在此条件下,拐枣总黄酮的平均提取率可达到2.56%。体外活性结果表明,我们首次发现拐枣总黄酮具有显著的抗XO活性,其IC_(50 )为18.63±1.67μg/mL。本研究可为从拐枣中寻找和发现天然抗XO活性分子提供参考,同时可为拐枣的开发利用提供思路。

两种红细胞超氧化物歧化酶测活方法的比较

目的 比较两种红细胞超氧化物歧化酶 (SOD)活性测定方法 ,以便在实际工作中根据不同的试验条件选取最合适的测活方法。方法 用黄嘌呤氧化酶法和 NBT光化还原法分别对经甲醛染毒处理后的小鼠红细胞 SOD活性进行测定 ,将它们在耗时、耗材、条件控制和实验结果等方面的优缺点进行比较。结果 通过两种方法的比较 ,认为黄嘌呤氧化酶法是种比较好的 SOD测活方法。结论 在测定红细胞超氧化物歧化酶时 ,选取黄嘌呤氧化酶法比

基于黄嘌呤氧化酶半数抑制率的中草药提取配方的筛选

目的以中草药水提取物为原料,研究不同配比对黄嘌呤氧化酶的抑制作用。方法以黄嘌呤氧化酶半数抑制率为评价指标,筛选中草药水提取物;用正交t值法和加权综合分析法对筛选的中草药进行主辅药分析及辅药交互作用分析;利用响应面混料设计模型优化配方比例。结果槐花、菊花、桑葚、金银花对黄嘌呤氧化酶具有较强的抑制效果,且菊花和桑葚是配方中的主药,槐花和金银花为辅药。配方最佳配比为槐花水、菊花、桑葚、金银花提取物浓度为50%、30%、11%、9%,对黄嘌呤氧化酶的抑制率为66.21%±0.82%。结论以中草药水提取物为主要原料组成的配方可防治高尿酸血症。

60种蔬菜抗氧化作用的研究

采用黄嘌呤氧化酶 - NBT法对 2 0个科 6 0种蔬菜进行了抗氧化作用的研究。结果显示 :6 0种蔬菜中有 9种抑制率在 5 0 %以上 ,占 15 % ,具有较强的抗氧化作用 ;2 6种蔬菜的抑制率在 30 %～ 5 0 %之间 ,有一定的抗氧化作用。