黄姑鱼属鱼类营养需求及其高效配合饲料研究进展

黄姑鱼属鱼类富含蛋白质、必需氨基酸、脂肪酸、微量元素和鱼鳔胶原蛋白,肉质细嫩,味道鲜美,营养价值极高。黄姑鱼属鱼类具有适应性广、生长快和抗逆性强等优点,是我国沿海重要的海水养殖鱼类之一。目前,国内外有关黄姑鱼属鱼类营养需求与饲料研究报道较多,但对不同生长阶段的精准营养及营养素和功能性添加剂的相互关系研究不够深入。黄姑鱼属鱼类养殖以切碎的冰鲜杂鱼为主,缺乏专用配合饲料,存在营养不平衡、品质不稳定和污染水质等缺点。文章综述了黄姑鱼属鱼类蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素和矿物质的需求量以及饲料蛋白源、脂肪源和添加剂的研究进展,旨在为黄姑鱼属鱼类精准营养需求的研究和高效环保饲料的研发提供参考依据,从而推动黄姑鱼属鱼类养殖业的健康可持续发展。

拮抗哈维氏弧菌的黄姑鱼肠道原籍益生菌的体外筛选

试验旨在筛选对哈维氏弧菌具有防治作用的益生菌。试验通过比较红头病和健康黄姑鱼肠道微生物差异,进一步通过体外抑菌试验、药敏试验、生物安全性试验,筛选出对红头病病原哈维氏弧菌B0003具有拮抗作用且对宿主安全的肠道益生菌候选菌株。结果显示,红头病和健康黄姑鱼肠道微生物存在较大差异,选择12株候选菌株测试其对哈维氏弧菌B0003的拮抗作用。体外抑菌试验发现,5株候选菌对哈维氏弧菌B0003具有明显抑制作用,其抑菌能力由强到弱依次为:暹罗芽孢杆菌B0E14、贝莱斯芽孢杆菌DM5、巨大芽孢杆菌B1M2、枯草芽孢杆菌B0E9、粪肠球菌AT5。这5株拮抗菌均不具有溶血活性,且不会对黄姑鱼健康造成不利影响,对大多数抗菌药物敏感。研究表明,试验筛选的5株候选菌具有作为益生菌用于黄姑鱼红头病防治的潜力。

饵料营养强化对黄姑鱼仔稚鱼生长和抗逆的影响

为研究饵料营养强化对黄姑鱼仔稚鱼生长性能和抗逆性的影响,以孵化后第10天(10 dph)的黄姑鱼仔鱼((0.16±0.01))g为研究对象,分别用经裂殖壶菌、乳化鱼油,以及浓缩小球藻强化的轮虫和卤虫无节幼体投喂黄姑鱼仔稚鱼。实验分为7个组:A组(对照组)投喂未强化轮虫;B组全程投喂浓缩小球藻强化的轮虫;C组全程投喂乳化鱼油强化的轮虫;D组全程投喂裂殖壶菌强化的轮虫;E组在10~22 dph(前期)投喂浓缩小球藻强化的轮虫,20~25 dph(后期)投喂浓缩小球藻强化的卤虫无节幼体;F组前期投喂乳化鱼油强化的轮虫,后期投喂乳化鱼油强化的卤虫无节幼体;G组前期投喂裂殖壶菌强化的轮虫,后期投喂裂殖壶菌强化的卤虫无节幼体。每组3个平行,每个平行12 000尾黄姑鱼仔鱼,养殖时间为15 d。实验结果显示:B组黄姑鱼仔稚鱼的增重率、特定生长率、成活率和肥满度高于对照组,但不显著(P>0.05),其他实验组黄姑鱼仔稚鱼的这4个指标都显著高于对照组(P<0.05);各组黄姑鱼稚鱼在经历干露刺激不同时间后,成活率为G组>F组>E组>A组、D组>C组>B组>A组;各组黄姑鱼稚鱼耐饥饿能力为G组>F组>E组>D组>C组>B组>A组,稚鱼的耐饥饿能力F、G和E组显著高于其他4组(P<0.05)。实验结果表明:对黄姑鱼仔稚鱼的饵料(轮虫和卤虫无节幼体)进行营养强化,可以显著提高黄姑鱼仔稚鱼的生长性能和抗逆性,其中采用裂殖壶菌强化的效果最好,其次是用鱼油强化,再次是用浓缩小球藻强化;在适宜的养殖阶段(20~22日龄)进行饵料转换有利于提高黄姑鱼仔稚鱼的生长速度和抗逆性。

黄姑鱼三倍体的诱导、鉴定及其性腺发育特征

研究采用冷休克方法诱导黄姑鱼(Nibea albiflora)三倍体并进行鉴定,进一步采用组织学和生殖相关基因表达分析比较了三倍体黄姑鱼的性腺发育特征。研究结果表明:(1)在受精后2.5min以3℃进行10min的冷休克处理,冷休克处理组的受精率和孵化率分别为(70.31±4.49)%和(21.5±6.63)%,其受精率和孵化率显著低于二倍体对照组;(2)经流式细胞仪倍性检测和染色体核型分析发现,三倍体的DNA含量为二倍体的1.5倍,染色体数目为72条,而二倍体的染色体数目为48条,三倍体的比例为100%;(3)三倍体的生殖腺指数显著低于二倍体,进一步通过组织切片观察发现三倍体的精巢和卵巢发育较二倍体滞后,在12月龄时,二倍体精巢和卵巢处于Ⅴ期,而三倍体精巢和卵巢分别处于Ⅲ期和Ⅰ期;(4)三倍体精巢的dmrt1和vasa基因及三倍体卵巢的cyp19a基因表达量均显著低于二倍体(P<0.05);三倍体卵巢的vasa基因表达量也比二倍体低(P>0.05)。综上结果表明:研究通过冷休克处理成功诱导了黄姑鱼三倍体;三倍体的性腺发育较二倍体滞后,育性明显降低。

浅色黄姑鱼Ⅰ型胶原蛋白α2(COL1A2)基因的克隆及表达分析

【目的】通过克隆浅色黄姑鱼(Nibea coibor)Ⅰ型胶原蛋白α2(COL1A2)基因,分析其分子特征、组织分布及表达差异,为鱼类胶原蛋白代谢机制研究奠定理论基础。【方法】通过cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术获得浅色黄姑鱼COL1A2基因全长序列,利用生物信息学分析方法对其进行系统分析,探讨其分子特征及组织表达谱。【结果】COL1A2 cDNA序列长5826 bp,编码1352个氨基酸。BLAST同源性比对和系统进化树分析表明:浅色黄姑鱼与大黄鱼(Larimichthys crocea)同属石首鱼科(Sciaenidae),亲缘关系最近,且两者COL1A2的氨基酸序列同源性最高(96.60%)。生物信息学分析显示:COL1A2多肽链包含脊椎动物Ⅰ型胶原蛋白的所有特征,如相同的信号肽、C-前肽和N-前肽结构域以及三重螺旋结构域等。qRT-PCR结果显示:鱼鳔中COL1A2基因的表达显著高于其他组织(P<0.05),且胶原蛋白在不同组织中的分布规律与其一致。【结论】本研究首次克隆了浅色黄姑鱼COL1A2基因(GenBank登录号:MK641513),该基因的组织表达特异性是引起胶原蛋白差异化沉积的原因之一。研究结果有助于深入探究胶原蛋白的生物合成途径及调控机制。

黄姑鱼转录因子激活蛋白AP2α的克隆和特征分析

转录因子激活蛋白AP2α是一类能特异地结合DNA的核转录因子,参与动物胚胎发育的调节、细胞生长、细胞凋亡、肿瘤发生以及免疫反应等多种生物过程。课题组前期通过基因组关联分析(GWAS)发现,AP2α是黄姑鱼(Nibea albiflora)抗哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)的候选基因。本研究克隆了黄姑鱼转录因子AP2α,其开放阅读框(ORF)为1275 bp,编码424个氨基酸;所编码的AP2α蛋白质N端是富含脯氨酸和谷氨酰胺(P/Q-rich domain)的反式激活结构域,中间是中心基本结构(central basic region),C端为高度保守的helix-span-helix基序,负责结合DNA和蛋白质二聚化。氨基酸序列多重比对表明,AP2α保守性强,与所检测的鱼类、两栖类、鸟类和哺乳动物同源性在84.63%以上。实时荧光定量PCR检测结果显示,AP2α基因的mRNA广泛分布于所检测的黄姑鱼9种组织样品中,其中血液中的表达量最高;受哈维氏弧菌攻毒感染后,肝脏、脾脏和头肾中AP2α表达量均明显升高,特别是在肝脏中,AP2αmRNA表达水平在24 h时达到攻毒前的39倍。通过构建重组真核表达质粒pGEFP-AP2α并转染HEK293T细胞进行亚细胞定位研究的结果显示,AP2α分布于HEK293T细胞的细胞核中。进一步通过原核克隆表达获得了可溶性的GST-AP2α融合蛋白。以上结果表明,AP2α在黄姑鱼抵御哈维氏弧菌感染过程中发挥重要作用。本研究对AP2α在硬骨鱼类先天免疫中的重要功能提供了新的见解,为深入研究黄姑鱼的分子免疫机理和抗病分子育种奠定了基础。

黄姑鱼“全雌1号”:雌性率可达100%

黄姑鱼(Nibea albiflora)俗称黄婆鸡、黄姑、铜罗鱼等,属石首鱼科、黄姑鱼属,为近海暖温性中下层经济鱼类,分布于中国、朝鲜半岛和日本南部沿海,是我国重要的海水经济鱼类,具有抗病抗逆性强、营养价值高、市场认可度好等优点.国内学者已经在黄姑鱼苗种繁育、养殖技术、生态毒理、病害防治和群体遗传学分析等方面做了大量的研究.随着黄姑鱼繁育技术日趋成熟,其养殖规模在浙江、福建以及山东、河北等地沿海迅速扩大,已经成为我国重要的海水鱼类养殖品种.

黄姑鱼胚胎发育及其与温度和盐度的关系

为研究温度和盐度对黄姑鱼(Nibea albiflora)胚胎发育的影响,作者观察了黄姑鱼受精卵的形态和胚胎发育过程。实验结果表明,温度18~28℃范围内,温度对孵化时间和初孵仔鱼有显著影响,对孵化率影响不大,24~28℃是黄姑鱼胚胎发育的适宜温度范围;盐度低于24时受精卵下沉,26~28内悬浮于水体中,盐度高于34时受精卵浮于水面;黄姑鱼胚胎发育的最适盐度范围26~32,盐度超过或低于其适宜范围时,孵化率明显下降或者幼虫畸形率明显增大。另外,根据其Q10值推算的胚胎发育的适宜水温与实验结果相似。

黄姑鱼群体遗传多样性的AFLP分析

对青岛和厦门黄姑鱼群体的遗传多样性进行了AFLP分析,5对选择性引物在两个群体47个个体中,共扩增出461个位点,多态位点265个。青岛和厦门群体的多态位点比例、Nei遗传多样性指数和Shannon遗传多样性指数分别为51.70%、51.99%,0.1022、0.0996,0.1643、0.1622;两个群体遗传多样性在同一水平上。基因分化系数Gst、Shannon遗传多样性指数和AMOVA分析均显示黄姑鱼的遗传变异主要来源于群体内个体间,而群体间无明显的遗传分化。群体的显性基因型频率分布和位点差异数分布显示两个群体有基本相同的群体遗传结构。结果表明,黄姑鱼青岛和厦门群体间无明显的遗传差异,群体间有明显的基因交流。

浙江舟山人工生境水域日本黄姑鱼和黑鲷的增殖放流效果及评估

基于2004-2008年浙江舟山趋礁性鱼类的增殖放流数据,以日本黄姑鱼(Nibea japonica)和黑鲷(Sparus macrocephalus)作为研究对象,采用现场调查与理论推算相结合的方法,分析放流后放流点附近海域放流种类的回捕率、移动分布情况、生长情况及死亡情况。结果表明,黑鲷和日本黄姑鱼的回捕率逐年增长,黑鲷在2008年仅游钓回捕率就达到3.68%,手钓率逐年上升,规格逐年变小,补充群体数量有增加的趋势;放流3个月后回捕的黑鲷平均叉长和平均体质量分别增加70.29%和390.25%,而日本黄姑鱼平均体长可增加200%,日均体质量增长速度为1g/d;预计至放流后第4年黑鲷总的投入产出比将达1:6.55,日本黄姑鱼投入产出比当年就可达1:12以上。生长比对实验表明,黑鲷和日本黄姑鱼在自然海域生长比网箱养殖和池塘养殖更具优势,岩礁性种类在连续放流3年以上时增殖的累积正效应才逐渐得以体现。结论认为,人工生境水域的增殖放流增加了渔业产量,使种群得以恢复,也丰富了自然水域的生物多样性,改善了水域生态群落结构,有利于水域生态环境的修复。

密度胁迫对黄姑鱼幼鱼生长、代谢及非特异性免疫的影响

随机选取体质量为10.0～10.7g的黄姑鱼Nibeaalbiflora幼鱼450尾,设置4个养殖密度,依次为15尾/缸(1.49kg/m3)、30尾/缸(3.00kg/m3)、45尾/缸(4.84kg/m3)、60尾/缸(5.81kg/m3),研究密度胁迫对黄姑鱼幼鱼生长性能、代谢酶活性及非特异性免疫的影响。结果表明:1)养殖密度对黄姑鱼幼鱼的增重率没有显著性影响(P>0.05)。特定生长率具有与增重率相类似的变化规律。饵料系数与养殖密度呈显著的负相关性:FCR=0.02G+0.11(n=15,R2=0.983,F<0.05)。2)G60组乳酸脱氢酶活性最高并显著高于G15组、G30组(P<0.05)。随着养殖密度的增大,谷丙转氨酶活性有逐渐增大的趋势(P>0.05)。谷草转氨酶活性具有与谷丙转氨酶相类似的变化规律。3)随着养殖密度的增大,血清溶菌酶活性呈现逐渐降低的趋势,G60组血清溶菌酶活性最低并显著低于其他3组(P<0.05)。密度胁迫对血清补体C3、C4含量的影响均不显著(P>0.05)。本研究表明,养殖密度过高会对黄姑鱼幼鱼的代谢及非特异性免疫造成负面影响,而养殖密度过低又会造成水资源的浪费,30尾/缸(3.00kg/m3)为较适宜的养殖密度。

鮸状黄姑鱼的早期发育研究

本文对状黄姑鱼的胚胎和仔、稚鱼各发育阶段的形态特征进行了描述。绝状黄姑鱼的受精卵为圆球形浮性卵，无色透明。在水温20～23℃，盐度26～30的条件下，经24h35min陆续孵出仔鱼。胚胎发育分为26期。初孵仔鱼至孵化后4日龄为仔鱼前期；孵化后5～22日龄为仔鱼后期；孵化后23～32日龄为雅鱼期；孵化后33日龄进入幼鱼早期。仔、稚鱼培育水温18～28C，盐度20～30。仔鱼2日龄稍开口，3～4日龄为混合营养阶段，是仔鱼的主要危险期。

浅色黄姑鱼早期发育阶段的摄食习性与生长特性

2003年5—6月和2004年4—5月在集美大学水产学院水产试验场,对人工培育的浅色黄姑鱼Nibea chuiTrewavas早期发育阶段的摄食和生长特性进行观察与分析。结果表明,仔、稚、幼鱼的摄食率高达96.9%,摄食量占体重的2.9%—24.4%,摄食具有明显昼夜节律,早晨和黄昏为摄食高峰。摄食量与体重的关系式为y=0.052 7e0.671 5x(r=0.951 9),全长与日龄的关系式为LT=0.011 5D2-0.212D+3.536 7(r=0.952 9),体重与日龄的回归方程为W=0.048e0.130 9D(r=0.965 0),全长与体重的回归方程为W=-0.265 5L2T+2.735 2LT+2.5415(r=0.953 9)。

黄姑鱼人工育苗初步试验

黄姑鱼Nibea albiflora(Richardson)分布在太平洋西部沿海,属暖温性近海中下层鱼类,卵浮性。我国的黄海南部、渤海湾、莱州湾;日本的土佐湾。

黄姑鱼工厂化育苗技术研究

黄姑鱼 Nibea albiflora (Richardson),俗称黄姑子、铜锣鱼,属石首鱼科,黄姑鱼属,是太平洋西北部沿海的特有种,在我国的黄海和渤海,日本的土佐湾和有明海都有其产卵场。 有关黄姑鱼的研究,雷霁霖等(1981)于1959年首次记录了其胚胎及仔稚鱼的形态观察;田北彻(1974)研究过其早期生活史;谷口顺彦(1979)进行过箕作氏黄姑鱼(N.milsilaii)的孵化与仔稚鱼饲育的研究。但是,黄姑鱼的工厂化育苗我国尚无先例。

黄姑鱼和日本黄姑鱼染色体核型的比较

采用PHA体内直接注射法制备了黄姑鱼Nibea albiflora和日本黄姑鱼N. japonica肾组织的染色体制片,并对两种鱼的核型进行了比较分析。结果表明,黄姑鱼的核型公式为:2n=48t,NF=48;日本黄姑鱼的核型公式为:2n=48t,NF=48。黄姑鱼染色体相对长度最长为5.94±0.33,最短为3.06±0.20;日本黄姑鱼染色体相对长度最长为5.68±0.22,最短为2.66±0.14。收集文献报道的石首鱼科鱼类的核型研究资料,包括双棘黄姑鱼N.diacanthus、鱼免状黄姑鱼N.miichthioides、大黄鱼Pseudosciaena crocea的核型,应用核型进化距离聚类分析方法研究了这5种石首鱼科鱼类的亲缘关系。结果表明,黄姑鱼和双棘黄姑鱼以及鱼免状黄姑鱼和日本黄姑鱼的亲缘关系较近,大黄鱼与鱼免状黄姑鱼的亲缘关系最远,核型进化距离聚类分析在一定程度上反映了这5种鱼的亲缘关系和进化历程。

黄姑鱼创伤弧菌的分离和鉴定

目的从患病黄姑鱼体内分离出致病力较强的菌株L1,人工感染实验证实该菌株为黄姑鱼的病原菌。对该细菌进行了形态、生理生化特性测定和16SrRNA分子鉴定,测定16SrRNA基因序列,分析相关细菌相应序列的同源性,构建了系统进化树。结果表明菌株L1与创伤弧菌(Vibrio vulnificus)的亲缘关系最近,具有98.7%的同源性。结合该菌株的生理生化特性,可鉴定菌株L1为创伤弧菌。

运输胁迫下日本黄姑鱼肝脏抗氧化系统的响应

研究了运输胁迫对日本黄姑鱼(Nibea japonica)肝脏抗氧化能力的影响。胁迫处理后,鱼体肝脏中抗氧化防御指标受到不同程度的影响。超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活力快速升高并显著高于处理前水平(P<0.05),之后逐渐下降到与处理前无显著性差异。谷胱甘肽转移酶(GST)活力在处理后也有所升高,但一直与处理前无显著性差异(P>0.05)。肝脏中维生素C(VC)含量在处理后1 h显著性升高,以应对氧化压力;而自由基含量先升在胁迫0.5 h后快速降低并恢复到处理前水平。丙二醛(MDA)含量在处理后0.5 h达到最高值,然后快速恢复并与处理前无显著性差异(P>0.05)。研究表明,运输胁迫能通过氧化应激反应对日本黄姑鱼造成影响,在胁迫应激反应中SOD和CAT可以作为有效的生物指示剂用于胁迫状态的检测;同时,日本黄姑鱼具有较强的抗氧化防御体系,能较快地清除体内自由基并调整鱼体以适应外界环境的影响。

东海黄姑鱼年龄与生长的初步研究

根据2004年2～4月在舟山沈家门市场采集的117 ind黄姑鱼样品,对黄姑鱼的年龄与生长进行了初步研究.结果表明:①目前舟山渔场渔获物中黄姑鱼年龄组成主要以1～2龄的低龄组为主,主要体长在161～263 mm之间,主要体重在175.3～354.8 g之间;②黄姑鱼体长与体重的关系为:W=1.633×10-5 L3.0357;③体长和体重的生长方程分别为:Lt=529.5[1-e-0.262(t-0.281)]和Wt=2597.4[1-e-0.262(t-0.281)]2.4164;④体长生长速度方程为:dL/dt=138.729 e-0.262(t-0.281),体重生长速度方程为:dW/dt=1644.4056e -0.262(t-281)×[1-e -0.262(t-0.281)]1.4164,生长加速度方程分别为:d2L/dt2=-36.3470e -0.262(t-0.281)和d2W/dt2=430.8343e -0.262(t-0.281)×[1-e -0.262(t-0.281)]0.4164×[2.4164 e-0.262(t-0.281)-1].