黄尾鰤的养殖同维生素的关系——养鱼维生素的基本使用方法

最近，因为对黄尾鰤养殖同维生素的关系问题及其重要性等有了各种议论，这些议论有利于更多的新型种类的维生素制品的开发和利用。另外，在不投喂维生素的情况下黄尾鰤也有生长得很好的情况，所以有不少人误认为不投喂维生素对鱼类生长没有什么影响。因此，有必要在这里把维生素的基本使用方法给以介绍，同时还把原来作为动物用维生素同最近所开发的饲料添加物中的维生素不同之处加以说明。

黄尾鰤生长激素的精制和使用

生长激素GH(Growth Hormon)是由脊推动物脑下垂体前叶分泌的蛋百质激素。它促进骨骼肌肉、结缔组织和内脏的增长,促进DNA、RNA和蛋白质合成,促进糖异生作用等。在家禽与养殖鱼类中注射生长激素有明显的促进成长的效果。 占日本黄尾鰤鱼养殖产量第一的爱媛县,在黄尾鰤鱼加工时,通常把头,内脏作为废弃物丢掉。该具中予水产试验场西川智研究员从黄尾鰤鱼头中取出脑下垂体并精制提炼生长激素,用它再来喂养养殖鱼,取得好效果。方法介绍如下。

基于线粒体Cyt b基因序列的4个黄尾鲴养殖群体遗传多样性分析

黄尾鲴(Xenocypris davidi)是浙江省自然水域增殖放流的主要鱼类,为了解人工繁育对黄尾鲴遗传多样性的影响,利用线粒体DNA细胞色素b基因(Cyt b)对4个养殖群体的遗传多样性进行研究,旨在为黄尾鲴增殖放流策略制定和实施提供基础数据。结果显示,在编码Cyt b的1 140 bp序列中,检测到157个变异位点,界定了21种单倍型,其中长兴、双浦、八里店和醴陵群体的单倍型数目分别为10个、11个、7个和2个,单倍型多样性介于0.226~0.794,核苷酸多样性介于0.006 14~0.023 86。除醴陵群体遗传多样性较低外,其余3个养殖群体的遗传多样性具有高单倍型数和高核苷酸多样性的特点。4个黄尾鲴养殖群体间的遗传距离为0.018 74~0.092 74,遗传分化指数为0.808 63(P<0.01),其中长兴和八里店群体的分化程度较低,双浦和醴陵群体的分化程度较高,且遗传变异主要发生在群体间。本研究结果可从分子水平为黄尾鲴的资源保护和人工增殖放流提供参考依据。

用线粒体COI基因序列分析黄尾鲴养殖群体的遗传结构

为了解人工养殖和选育对黄尾鲴(Xenocypris davidi)遗传多样性的影响,利用线粒体COI基因分析中国湖南的醴陵(LL)、浙江的长兴(CX)、双浦(SP)和吴兴(WX)128尾1~2龄的4个黄尾鲴养殖群体的遗传多样性。结果显示,在539 bp的COI部分序列中,检测到75个变异位点,包括74个简约信息位点,序列中A+T的含量(56.1%)明显高于G+C的含量(43.8%),有明显的(A+T)偏好性。在128尾个体中定义了11种单倍型,单倍型Hap-01个体43尾,为优势单倍型。遗传多样性检测结果显示,4个群体的单倍型多样性指数(Hd)介于0.226~0.605,核苷酸多样性指数(π)介于0.00104~0.02221,其中,WX群体的遗传多样性最为丰富。不同养殖群体间遗传距离为0.0145~0.0986,CX和WX群体的遗传距离最近,LL与SP群体的遗传距离最远。AMOVA分析显示,群体间的遗传分化系数Fst为0.8385(P<0.01),遗传变异主要发生在群体间。NJ系统发生树和遗传距离分析结果表明,4个群体间存在相当高的遗传分化。本研究结果可为黄尾鲴遗传多样性变化的比较研究提供基础数据,并为黄尾鲴增殖放流和资源保护提供一定依据。

黄尾副刺尾鱼遗传多样性研究

为了解黄尾副刺尾鱼群体的遗传多样性现状,该研究选取21条GenBank数据库中的黄尾副刺尾鱼线粒体细胞色素氧化还原酶I(mtCOI)序列进行分析。结果显示,在剪切对比后的584 bp的mtCOI基因序列中,碱基“A+T”的平均含量为55.6%,明显高于碱基“G+C”的含量(44.4%),显示出较强的AT偏好性。21条序列共检测到26个多态位点和10个单倍型,单倍型多样性指数h=0.8429±0.0684,核苷酸多样性指数π=0.00659±0.00385,遗传多样性处于较高水平,遗传距离在0.007~0.030。基于最大似然法和贝叶斯法构建的系统进化树显示,21个个体形成了2条独立分支,但未显现出明显的地理分布。该研究是对黄尾副刺尾鱼遗传多样性的初步探索,试验结果显示,黄尾副刺尾鱼群体具有较高的遗传多样性,各地区之间的黄尾副刺尾鱼个体未产生明显遗传分化,但更详细准确的试验结果仍需要更大的样本和更多的数据来进一步分析得出。

北江黄尾鲴个体生殖力的研究

研究了北江流域黄尾鲴的个体生殖力及其与性成熟雌性个体多项生物学指标的关系,结果表明:黄尾鲴个体绝对生殖力F在35 707～191 917粒之间,平均为101 038粒;个体体长相对生殖力FL在1 962～7 719粒/cm之间,平均为4 379粒/cm;个体体重相对生殖力FW在270～891粒/g之间,平均为479粒/g;其个体绝对生殖力(F)和体长相对生殖力(FL)均与体长、体质量、净体质量、成熟系数、性腺质量和年龄等呈显著相关,而二者与肥满度的相关性不大;体质量相对生殖力(FW)与成熟系数、性腺质量和年龄呈显著相关,与其他形态学指标相关性不大.

军山湖黄尾鲴生物学参数及资源量估算

黄尾鲴Xenocypris davidi是一种小型的经济鱼类。2013年12月—2014年3月在江西省军山湖采集746尾黄尾鲴,测量其体长和体质量,运用FiSATⅡ分析了军山湖黄尾鲴的生物学参数和生长特性,并初步估算其资源量。结果表明,军山湖黄尾鲴体长81~320 mm,平均体长197mm;体质量16.0~440.0 g,平均体质量144.9 g;体长与体质量生长关系式为W=0.000 1L^(2.6341)(R^2=0.985,P<0.01,n=746);Von Bertalanffy体长、体质量生长方程分别为,L_t=341.25[1-e^(-0.38)(t+0.9929))]、W_t=470.29[1-e^(-0.38(t+0.992 9))]^(2.634 1),拐点年龄为1.96龄,对应体长230 mm,体质量166.6 g,平均丰满度为1.71±0.29,总死亡系数Z=1.43,自然死亡系数为M=0.74 a^(-1),捕捞死亡系数F=0.69 a^(-1),开发率E=0.48。军山湖黄尾鲴的初始资源质量估算高达210.45吨。利用这些参数可对其资源现状做出正确的判断,为制定军山湖合理的渔业管理措施、实现渔业的可持续发展提供科学依据。

千岛湖细鳞鲴和黄尾鲴COI种群遗传结构比较的初步研究

利用线粒体COI基因序列,比较了千岛湖水库共栖的细鳞鲴(Xenocypris microlepis)和黄尾鲴(X.davidi)的遗传资源状况。结果显示,在532 bp的一致序列中,黄尾鲴碱基T、C、A、G平均含量分别为27.3%、18.0%、28.7%、26.0%;细鳞鲴分别为25.2%、19.6%、29.3%、25.9%。黄尾鲴种群的变异位点为5个,细鳞鲴种群变异位点为3个。多样性分析显示,黄尾鲴的遗传多样性高于细鳞鲴。在两个物种中各发现4个单倍型,黄尾鲴4个单倍型中,有3个是共享单倍型,而细鳞鲴中仅1个共享单倍型,黄尾鲴富文和临岐群体之间存在显著的分化(Fst=0.048 09),细鳞鲴汾口群体和富文(Fst=0.238 10)、临岐群体(Fst=0.260 72)之间存在显著的遗传分化。单倍型的NJ树将四个单倍型分为两个支,推测可能是由于二次迁入或者多样性丧失导致。

黄尾鲴亲鱼对饲料中蛋白质、脂肪需求量的研究

以秘鲁鱼粉和豆粕为蛋白源、豆油为脂肪源配制9种试验饲料,在自制养殖装置(规格为2 m×2 m×1 m)、水深约80 cm室外池塘中进行为期60 d的摄食生长试验。结果表明,从生长情况看,以蛋白质水平34.42%、脂肪水平7.60%饲料投喂的黄尾鲴亲鱼终末体质量、增质量率最高,对黄尾鲴亲鱼的生长影响最显著(P<0.05);从饲料利用能力看,以蛋白质水平为34.42%、脂肪水平为7.60%饲料投喂的黄尾鲴亲鱼饲料利用率最优;从性腺发育情况看,以蛋白质水平为34.42%、脂肪水平为7.60%饲料投喂的黄尾鲴性成熟系数、绝对怀卵量和相对怀卵量最大,明显高于其他试验组(P<0.05);成活率和肥满度受不同蛋白和脂肪水平的影响不明显。

基于RNA-seq的黄尾鲴肝脏转录组测序与分析

为了发掘黄尾鲴(Xenocypris davidi)功能基因特别是免疫相关基因,为其种质资源评价、群体遗传学多样性分析、基因连锁图谱构建、免疫相关功能基因地位以及分子标记辅助育种提供基础信息,采用Illumina HiSeq2500高通量技术平台对黄尾鲴肝脏进行转录组测序。通过去除低质量的raw reads,共获得了50 702 046条clean reads,组装得到53 527条Unigenes。采用BLAST相似性比对方法,把这些序列比对NR、String、Swissprot、KEGG和Pfam数据库,共有26 613条Unigenes得到了注释。有15 532条Unigenes获得了GO注释并分类到64个功能类别中,有7 737条Unigenes被归纳到COG的26个功能分类,共有14 642条获得了KEGG注释,共参与33条代谢通路中。根据免疫系统分类,共有1 299条Unigenes参与了16条代谢通路。从53 527个Unigenes中共找到98 826个单核苷酸多态性位点(SNP)(转换64 396个,颠换34 430个)和18 119个SSR位点。研究结果为黄尾鲴免疫学、基因组学、基因克隆以及分子标记辅助育种提供了重要依据。

黄尾鲴6种同工酶的组织特异性研究

为了给黄尾鯝种质标准和种质鉴定提供生化遗传指标,以便合理保护和利用黄尾鯝种质资源。采用聚丙烯酰胺垂直凝胶电泳法对黄尾鲴的7种新鲜组织(肝脏、心脏、脑、肌肉、脾脏、头肾和鳃)中的苹果酸脱氢酶(MDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、酯酶(EST)、苹果酸酶(ME)、6-磷酸葡萄糖脱氢酶(6-PGDH)、超氧化物岐化酶(SOD)共6种同工酶进行了分析,并对其同工酶位点及酶谱进行了分析。结果表明,黄尾鯝的6种同工酶在不同组织中的表达存在差异。酯酶、苹果酸酶、苹果酸脱氢酶及6-磷酸葡萄糖脱氢酶在肝脏中表达活性较强,乳酸脱氢酶在肝、脾以及头肾组织中表达活性强,超氧化物歧化酶在肝、脾脏组织中活性较强。

黄尾鲴和花?增殖放流标记技术研究

为探讨不同的标记方法对黄尾鲴(Xenocypris davidi)和花?(Hemibarbus maculatus)的适用性,对鱼体进行铁环标记、"T"形标记、切鳍标记、可见植入性荧光胶体标记(visible implant elastomer,简称VIE)和被动集成应答器标记(passive integrated transponder,简称PIT),试验各组均以混养的模式培养,混养半年后,分析各组的生长、存活率、标记成功率、效果等情况。结果表明,除"T"形标记组外,其他各试验组黄尾鲴的平均体质量与平均体长都有所增加;除切鳍组和PIT组外,其他3个试验组花?的平均质量与平均体长都有所下降。黄尾鲴的总存活率与平均存活数都表现为荧光标记> PIT标记>切鳍标记>"T"形标记>铁环标记,花?的总存活率与平均存活数都表现为切鳍标记> PIT标记>荧光标记>"T"形标记>铁环标记,其中荧光、切鳍和PIT组的总生存率和标记成功率达90%左右。铁环和"T"形标记易造成伤口腐烂,标记效果差;切鳍组效果具有时间性;荧光标记组和PIT组效果好,荧光标记价格便宜,而PIT标记价格昂贵。综合分析认为,荧光标记可作为黄尾鲴和花?大规模标记增殖放流的一种可行的方法。

黄尾鲴不同组织中LDH同工酶的研究

[目的]研究黄尾鲴不同组织的LDH同工酶。[方法]采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术和特异性染色方法对黄尾鲴的肝、肾、眼、心4种组织的LDH同工酶进行分析。[结果]酶谱的表达具有明显的组织特异性。酶带由3个基因座位(LDH-A、LDH-B、LDHC)编码,在4种组织中共检测到14条带,其中,心和肾7条带,眼6条带,肝14条带。在PAGE胶趋向阴极侧检测到6条肝脏组织所特有的LDH-C基因编码带。在各组织LDH酶带表达活性上,心中LDH-2、LDH-3和LDH-5表达占优势,肾中LDH-2、LDH-7和LDH-3表达占优势,肝中LDH-13、LDH-9和LDH-12表达占优势,眼中LDH-5、LDH-2和LDH-7表达占优势。[结论]该研究为丰富黄尾鲴遗传学基础研究、遗传育种种质标准的建立和种群生化遗传结构分析提供科学依据。

黄尾鲴的胚胎发育

以人工繁殖获得的黄尾鲴受精卵为材料,运用Olympus倒置荧光显微镜对黄尾鲴胚胎发育过程进行连续观察。结果显示,成熟黄尾鲴卵的卵径为(1.1±0.04)mm,吸收膨胀后卵膜径为(1.50±0.08)mm。在水温为(25.0±0.5)℃的条件下,黄尾鲴受精卵历时26 h 35 min孵化出膜,出膜仔鱼全长(4.60±0.12)mm。从受精到孵化出膜的总积温为763.35℃·h。根据胚胎发育过程形态特征,将黄尾鲴胚胎发育过程分为受精卵期、卵裂期、囊胚期、原肠期、神经胚期、器官发生期和出膜期7个阶段36个发育时期。

黄尾鲴胚胎及仔鱼的发育

黄尾鲴成熟卵呈圆球形,属黏性卵,卵径1.1 mm左右,在水温(23±1)℃条件下,受精后20 min形成胚盘,50 min开始卵裂,从受精到出膜时间为41 h。胚胎发育可分为胚盘形成期、卵裂期、桑葚胚期、囊胚期、原肠胚期、神经胚期、眼囊期、晶体出现期、尾牙期、肌肉效应期、心跳期、出膜前期、出膜期等13个发育时期。受精卵到胚胎出膜所需有效积温为902～984℃·h,仔鱼从胚胎出膜到卵黄囊完全吸收所需有效积温为2 640～2 880℃·h。出膜仔鱼第4天开始摄食,由内源型营养向混合型营养转换,第5天卵黄囊消失,由混合型营养转换为外源型营养,可以下塘培育。

黄尾鲴形态特征及其同工酶电泳分析

为了解黄尾鲴(Xenocypris davidi)的形态特征和生化遗传特性,为其种质鉴定提供理论依据,本研究采用传统形态观察和可数可量性状测定的方法对74尾样品进行了形态特征分析,并通过聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳对黄尾鲴5种组织(心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和肾脏)的乳酸脱氢酶(LDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)进行了分析。结果表明:1)黄尾鲴的主要形态特征为:头小而尖,口下位,下颌有较发达的角质边缘。肛门靠近臀鳍,肛门前具小段腹棱。鳃盖骨后缘有一浅黄色斑块,背鳍末端呈黄色,胸鳍和腹鳍呈淡黄色,尾鳍呈橘黄色。鳍式为背鳍D.Ⅲ-7和臀鳍A.ⅲ-9~11;下咽齿齿式2·4·6/6·4·2;脊椎骨数为36~41;左侧第一鳃弓外侧鳃耙数为44~52。2)黄尾鲴的心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和肾脏中的LDH酶带数分别为:6、6、3~4、7和5~8条;MDH酶带数分别为4~7、0~3、3~4、3~4和2~3条,心脏和肌肉MDH分为上清液型MDH(s-MDH)和线粒体型MDH(m-MDH)。研究认为:黄尾鲴的2种同工酶系统具有组织特异性,眼睛晶状体组织LDH可作为鉴定黄尾鲴种质的特征生化遗传参数。

不同催产剂对黄尾鯝人工繁殖效果的影响

进行了黄尾鯝人工繁殖的催产剂筛选试验。试验结果表明:水温在22℃-26℃的条件下,分别给性腺发育成熟的黄尾鯝亲鱼一次性注射不同组合的催产剂,其效应时间为8.6-12 h,平均催产率、受精率及孵化率分别为86.66%、89.02%和88.44%。其中注射HCG+LHRH-A3+DOM(1000IU/kg+5.0μg/kg+3.0 mg/kg)组合效果最好:催产率达100%,受精率为95.24%,孵化率90.43%。不同催产剂对雄鱼精液的质量影响存在一定的差异,其中注射HCG+LHRH-A3+DOM组合的精子活力最好,效应时间内精子快速运动时间为42-44 s,寿命73.5-75.2 s。

氨氮和亚硝酸盐对黄尾鲴孵化率的影响

影响受精卵孵化最重要的水质因子是溶解氧、氨氮和亚硝酸盐。信阳农林学院“黄尾鲴人工繁殖技术”项目组利用两种有机物氨氮和亚硝酸盐含量不同的水源进行黄尾鲴受精卵孵化实验,探讨有机物氨氮和亚硝酸盐对黄尾鲴受精卵孵化的影响。一、材料与方法1.亲鱼亲鱼为罗山县小龙山鱼类良种繁育场培育的黄尾鲴,年龄为3龄,平均体重为500克。

黄尾鲴染色体核型分析

以黄尾鲴(Xenocypris davidi Bleeker)头肾组织为材料,腹腔注射植物凝血素(phytohemagglutinin,PHA)和秋水仙素溶液后,使用空气干燥制片法制成染色体玻片,研究黄尾鲴染色体组型。结果表明,黄尾鲴有48条染色体,其核型公式为2n=48=18M+26SM+4T,臂数NF=92,未发现与性别相关的异型染色体。

饲料中不同水平蜂花粉对黄尾鲴亲鱼繁殖性能的影响

以鱼粉、豆粕、棉粕、菜粕为蛋白源,以豆油为脂肪源配制基础饲料,按1%、2%、3%的剂量添加蜂花粉至基础饲料中制成3种试验组饲料,在室外池塘中对黄尾鲴开展为期8周的摄食生长试验。结果表明:2%和3%蜂花粉组亲鱼性成熟比例显著高于对照组和1%蜂花粉组(P<0.05),其亲鱼性成熟比例为85%以上,而对照组为65%;从卵子质量来看,对照组黄尾鲴亲鱼卵径、受精率、孵化率以及出膜仔鱼全长显著低于添加蜂花粉组(P<0.05);从精子质量看,亲鱼日粮中添加高比例的蜂花粉能显著提高雄性亲鱼的繁殖性能(P<0.05),与对照组相比,2%蜂花粉组可提高精子密度45.3%,提高精子活力12.7%,精子畸形率下降21.0%。综合考虑,2%蜂花粉为黄尾鲴亲鱼最佳添加量。