黄岑同源四倍体株系中黄岑苷含量的比较

黄岑为唇形科植物黄岑（Ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａ ｂａｉｃａｌｅｎｓｉｓ Ｇｅｏｒｇｉ）的干燥根，研究对离体组织培养条件下诱导获得的黄岑四倍体株系，在进行田间农艺性状的观察比较的同时，用高效液相色谱测定了２０个黄岑四倍体株系中黄岑苷的含量。结果表明：在供试的２０个黄岑四倍体株系中，有１个株系的黄岑苷含量高于二倍体，大部分与二倍体接近，但多倍体株系的根部产量明显大于二倍体，因此从大部分株系的有效成分黄岑苷生产量看，大多数四倍体明显优于二倍体。这一结果为今后进一步选育产量高、黄岑苷含量高的优良黄岑品种展示了较好的前景。

黄岑苷对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的影响

目的观察不同浓度黄岑苷(baicalin)对实验性自身免疫脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠模型的作用,并研究其初步机制。方法建立实验性自身免疫性脊髓炎小鼠模型,免疫后第3天给予高低剂量黄岑苷灌胃,每天1次,共20 d。对小鼠活动进行神经功能评分,TUNEL染色检测脊髓组织细胞凋亡情况,ATP水平检测试剂盒检测脊髓组织ATP含量水平,免疫印迹法(Western blot)检测Bax、Bcl-2、cleaved cas-9和cleaved cas-3蛋白表达水平。结果黄岑苷能够提高实验性自身免疫脑脊髓炎小鼠神经功能,延后发病时间;黄岑苷干预后,Tunel染色结果显示脊髓组织凋亡细胞数下降,ATP水平下降,免疫印迹法结果显示Bcl-2的蛋白表达显著上升,Bax、cleaved cas-9和cleaved cas-3的蛋白表达显著下降。结论黄岑苷可通过抑制线粒体内源性凋亡途径抑制细胞凋亡,保护线粒体,提高实验性自身免疫脑脊髓炎小鼠神经功能,为预防疾病提供了实验理论依据。

黄岑苷对H2O2诱导人牙周膜细胞损伤后作用的研究

目的:探索黄岑苷对H_2O_2诱导人牙周膜细胞氧化损伤后的保护作用。方法:原代培养人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)并鉴定。CCK-8法检测细胞增殖及活性,选择适合的H_2O_2浓度,建立人牙周膜细胞氧化损伤模型。采用Hoechst33342荧光染色法观察损伤后细胞核形态,同时应用流式细胞术检测各组人牙周膜细胞对H_2O_2诱导的细胞毒性反应变化。此外采用分光光度法检测各组细胞及其上清液的LDH、MDA含量,从而阐明黄岑苷对人牙周膜细胞氧化损伤后的保护作用。结果:CCK-8法显示在H_2O_2浓度为200μmol/L时,其光密度(optical density,OD)值与其他浓度组有差异(F=24.113,P=0.001);荧光染色法观察到细胞凋亡典型形态;流式细胞术显示1~10μg/m L的黄岑苷对H_2O_2处理引起的人牙周膜细胞损伤有保护作用;检测LDH、MDA含量和漏出率提示1μg/m L黄岑苷能减少H_2O_2损伤后细胞的氧化损伤产物及炎症产物。结论:适宜浓度的H_2O_2可导致人牙周膜细胞凋亡率增高,同时细胞内的LDH、MDA漏出率上升,造成氧化损伤,适当浓度的黄岑苷可以保护人牙周膜细胞经H_2O_2的氧化损伤。

黄岑苷对宫颈癌细胞株HeLa的放射增敏作用

目的:探讨黄岑苷对宫颈癌细胞株He La的放射增敏作用及机制。方法:MTT法检测不同浓度黄岑苷对He La细胞的活力抑制能力,并计算IC50筛选实验药物浓度;克隆形成实验检测放射组与联合组在不同照射剂量下细胞的放射增敏作用;流式细胞术检测单药组、放射组与联合组的细胞周期变化;Western blot检测不同组细胞中Akt、p-Akt、Bad和p-Bad的蛋白水平。结果:黄岑苷呈浓度依赖性抑制He La细胞的活力,IC50为43.65 mg/L,采用20%IC50浓度8 mg/L进行放射增敏实验。克隆形成实验结果显示8 mg/L黄岑苷联合放射治疗可使生存曲线左移,D0、Dq值显著小于放射组(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示黄岑苷阻滞He La细胞于G2/M期。联合组细胞中p-Akt和p-Bad的蛋白水平均显著高于其它各组(P<0.05)。结论:黄岑苷对He La细胞具有放射增敏作用,其机制可能与其阻滞细胞于G2/M期和活化PI3K/Akt信号通路有关。

八元瓜环与黄岑苷的主客体相互作用及对黄岑苷性质的影响

利用紫外吸收光谱和核磁共振波谱(NMR)等方法考察了八元瓜环(Q[8])与黄岑苷(BAL)之间的相互作用.结果表明,Q[8]与BAL形成了摩尔比为1∶1的包结配合物,包结稳定常数K=2. 8×104L/mol.相溶解度法研究结果表明,当Q[8]浓度为100μmol/L时,可使BAL在水中的溶解度增加4. 5倍.采用2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)方法考察了Q[8]对BAL抗氧化活性的影响,BAL-Q[8]包合物与游离BAL均对ABTS自由基具有清除能力,IC50值分别为5. 48和5. 07μmol/L.在人工肠液中BAL和BAL-Q[8]包合物较稳定;而在人工胃液中BAL在6 h后迅速降解,BAL-Q[8]包合物则基本未降解,Q[8]显著提高了BAL在人工胃液中的稳定性.体外累积释放度研究结果表明,在人工胃液中Q[8]的介入提高了BAL的累积释放量,其数值提高了2倍;在人工肠液中BAL-Q[8]包合物的累积释放速度明显慢于BAL的累计释放速度,说明Q[8]包合BAL后对BAL有一定的缓释作用.

L-半胱氨酸和镍分层修饰电极的制备及对黄岑苷的测定

利用循环伏安（CV）法制备L-半胱氨酸和Ni分层修饰电极,用扫描电镜和交流阻抗方法对分层修饰电极进行了表征。研究了修饰电极上黄岑苷的电化学行为,建立了差分脉冲伏安（DPV）法测定黄岑苷的新方法。结果表明,在最佳实验条件下,用DPV法测定时,峰电流与黄岑苷浓度在5.0×10-7~1.0×10-5 mol/L和1.0×10-5~1.0×10-4 mol/L范围内呈线性关系,检出限为1.0×10-7 mol/L。该方法可用于药品中黄岑苷的测定。

HPLC测定竹沥达痰丸中黄岑苷的含量

目的:建立测定竹沥达痰丸中黄岑苷含量的HPLC方法。方法:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇:水:冰醋酸(50:50:1)为流动相;检测波长280mm;进样量为10μL。结果:黄岑苷在(0.04～0.2)mg/mL范围内呈良好的线性关系,得回归方程如下,Y=6.879×105X+1.114×104(r=0.9996),平均回收率为98.14%,RSD=1.30%。结论:应用HPLC法可以测定竹沥达痰丸中黄岑苷含量。其测定结果可靠,方法准确,灵敏,重现性好。

不同溶剂对黄岑苷的影响

本文研究不同提取溶剂对黄岑苷提取效果的影响。具体内容如下:提取过程分别采用不同的提取溶剂。不同提取溶剂选择水、60%乙醇、60%甲醇为实验材料。分析不同提取溶剂对黄岑苷提取效果的影响,以确定提取黄岑苷可使用的最佳提取溶剂。通过实验分析,黄岑苷的最佳提取溶剂为乙醇,甲醇次之,最后为水。

黄岑苷干预对输血相关急性肺损伤大鼠肺组织IL-1β、IL-10、TNF-α和iNOS表达的影响

目的探讨黄岑苷干预对输血相关急性肺损伤大鼠肺组织白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法 SD大鼠45只,随机分为对照组、输血相关急性肺损伤组(TRALI)和黄岑苷干预组(造模前3d,每日经腹腔注射0.2ml的黄芩苷溶液,50mg/kg),每组15只。制模完成后处死大鼠,HE染色观察肺组织病理学改变,取支气管肺泡灌洗液(BALF)检测细胞总数、中性粒细胞比例;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定各组大鼠支气管肺泡灌洗液中IL-10、IL-1β、TNF-α的含量。免疫组织化学与Western bolt检测大鼠肺组织中iNOS的表达。结果 TRALI组大鼠肺组织肺泡间隔增厚、肺间质充血及肺泡腔可见大量炎性细胞浸润,正常组大鼠肺组织结构清楚,肺泡壁结构完整,肺泡内未见炎性细胞渗出。TRALI组BALF细胞总数与中性粒细胞比例、IL-10、IL-1β与TNF-α的含量比正常组显著升高,给予黄岑苷干预后,则显著降低。TRALI组大鼠肺组织iNOS阳性表达水平显著升高,给予黄岑苷干预后,则显著降低。结论黄岑苷对输血相关急性肺损伤的保护作用与降低肺部炎性因子表达减轻炎性反应相关。

黄岑苷联合阿比特龙治疗晚期前列腺癌临床疗效观察

目的观察黄岑苷联合阿比特龙治疗晚期前列腺癌临床疗效。方法将我院晚期前列腺癌患者52例随机分为观察组与对照组各26例。对照组给予阿比特龙联合泼尼松治疗,观察组在对照组治疗基础上增加黄岑苷辅助治疗。连续治疗6周后,对比分析两组患者的临床有效率、毒副反应发生率、治疗前后的Karnofsky(Kps)评分、血清前列腺特异性抗原(PSA)及睾酮水平。结果观察组患者的治疗有效率高于对照组(P<0.05);治疗后,两组患者的Kps评分均高于治疗前,且观察组高于对照组(P<0.05);两组患者的血清PSA、睾酮水平均低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.05);两组患者毒副发应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论黄岑苷联合阿比特龙治疗可提高晚期前列腺癌的临床疗效,且不会产生明显的毒副反应,安全性较好。

黄芩苷对子痫前期大鼠胎盘滋养细胞增殖侵袭的作用机制研究

[目的]探讨黄岑苷对子痫前期大鼠胎盘组织滋养细胞增殖侵袭的影响及相关的作用机制。[方法]选择36只健康清洁级SD大鼠,其中雌性24只,雄性12只,按照2∶1比例安排雌雄合笼,24只雌鼠妊娠第13天建立子痫前期大鼠模型,成功20只。从建模成功雌鼠中随机取5只进行原代滋养细胞分离、培养及传代,倒置显微镜下观察滋养细胞形态,以免疫荧光染色法鉴定滋养细胞纯度,四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测吸光度(optical density,OD)值,评估胎盘滋养细胞增殖活性。将其余15只建模成功雌鼠分为对照组(以0.3 mL蒸馏水灌胃)、黄岑苷低剂量组(以25μg·mL;黄岑苷灌胃)、黄岑苷高剂量组(以100μg·mL;黄岑苷灌胃),灌胃后取腹主动脉血;同时将原代滋养细胞分为A组、B组、C组,分别以对照组、黄岑苷低剂量组、黄岑苷高剂量组大鼠血清培养48 h,采用Transwell法检测各组滋养细胞侵袭能力,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction, Real-time qPCR)法检测微小RNA-30d(microRNA-30d,miR-30d)、神经胶质细胞缺失同源物-1(glial cells missing homolog-1,GCM-1)mRNA表达水平,免疫印迹法检测GCM-1蛋白相对表达量。[结果]胎盘滋养细胞经消化、传代后,倒置显微镜下观察呈上皮样细胞形态,多为长多边形,体积大,核大呈卵圆形,呈片状延展生长,贴壁后呈铺路石样;滋养细胞纯度(90.65±5.64)%。与空白组比较,20、40、60、80、100μg·mL;黄岑苷组OD值增高(P<0.05)。与A组比较,B组、C组侵袭细胞数增多,miR-30 d表达水平降低,GCM-1 mRNA及蛋白相对表达量升高(P<0.05);与B组比较,C组侵袭细胞数增多,miR-30 d表达水平降低,GCM-1 m RNA及及蛋白相对表达量升高(P<0.05)。[结论]黄岑苷可提升子痫前期大鼠胎盘滋养细胞增殖、侵袭能力,作用机制可能与抑制miR-30d表达、上调GCM-1蛋白表达有关。

播种期对黄芩根部黄芩苷含量的影响

[目的]探讨不同播种期对黄芩内在品质的影响规律,为黄芩高产、优质、高效栽培提供科学依据。[方法]试验设8个播种期,随机区组排列,3次重复。黄芩苷的分析测定是在黄芩生产的第2年秋季,地上茎叶枯萎期取样,自然干燥后,对有效成分进行测定。[结果]不同播种期与黄芩根部黄芩苷含量之间的关系的研究结果表明,人工栽培野生黄芩时,以7～8月雨季播种并于8月出苗的,黄芩根部有效成分黄芩苷含量极显著高于其他各播种时期。[结论]在人工栽培黄芩时,建议在不明显影响单位面积产量的前提下,以7～8月雨季播种为宜。

黄芩苷联合紫杉醇抑制胃癌细胞增殖的研究

选取胃癌SGC-7901细胞,分别用紫杉醇和黄芩苷对其进行作用,MTT实验检测不同浓度紫杉醇、黄芩苷及两药联合作用24h和48h的细胞增殖抑制率。发现紫杉醇和黄芩苷均可抑制SGC-7901细胞生长,并且二者联合作用可提高抑制率,其作用机制可能与PCNA蛋白的抑制有关。

高效液相色谱法测定射麻口服液中黄芩苷含量

目的采用高效液相色谱法测定射麻口服液中黄岑苷含量,以期为其质量控制提供可靠依据。方法试药选取射麻口服液、黄岑苷对照品等,色谱条件为流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液,配置比为47∶53,V/V;色谱柱为Waters Sun Fire C48柱,规格为250 mm×4.6 mm、5μm;流速设置为1.2 ml/min;柱温调节为30℃;设定检测波长为280 nm;进样量设定为10μl。结果精密度试验结果显示,黄岑苷峰面积的相对标准偏差(RSD)为0.63%(n=5),提示仪器精密度较高;线性关系考察结果显示,黄岑苷进样量范围确保处于0.04191~0.83820μg内,其与峰面积具有良好线性关系(r=0.9999,n=5);稳定性试验结果显示,黄岑苷峰面积的RSD为0.58%(n=5),提示供试品溶液于室温下放置时间≤12 h的稳定性良好;重复性试验结果显示,黄岑苷含量的RSD为0.84%(n=5),提示方法重复性较好;平均加样回收率为98.52%,RSD为2.18%(n=6);测定样品含量结果显示,批号分别为20190102、20190401及20190301的3批样品中黄岑苷含量分别为12.46 g/L、12.41 g/L及11.08 g/L。结论采用高效液相色谱法测定射麻口服液中黄岑苷含量,不仅操作简便,且准确度高。

痰热清与常用输液配伍及与其他药物混合后的变化

目的:考察痰热清注射液与常用输液及药物配伍后的变化。方法:观察痰热清注射液与常用输液和药物配伍后的pH值、药物性状变化,用高效液相色谱法测定黄岑苷、绿原酸的含量变化。结果:痰热清注射液与pH值大于7.8的药物输液如阿莫西林/舒巴坦钠、碳酸氢钠电解质、奥美拉唑、地塞米松磷酸钠注射液等混合后颜色变暗棕色,黄岑苷和绿原酸含量下降;与pH值低于4.7的药物输液如维生素B6、奥硝唑、头孢噻肟钠、头孢唑林钠、头孢硫脒、头孢哌酮/舒巴坦钠、盐酸溴己新葡萄糖注射液等混合后产生白色浑浊,绿原酸等成分含量下降。结论:痰热清注射液宜用0.9%氯化钠注射液稀释后静脉滴注,与其他药物联合静脉滴注时,两种药液间应使用0.9%氯化钠注射液冲管或分开注射。

赤霉素GA3调节黄芩组织培养中芽和根的形成

应用组织培养技术对黄芩进行外源激素调控研究。在培养不同时间进行的不同培养基之间的转移培养研究表明,组织培养条件下,在培养基中添加赤霉素,可显著刺激黄芩外植体芽的形成,同时抑制根的生长。在加有GA3的IAA培养基上,GA3显著影响黄芩组织培养物中的黄酮含量。在黑暗条件下,开始在2.5μmol/LIAA培养基中培养6d,随后转移到5μmol/LGA3培养基上培养,黄芩外植体中黄岑苷、黄岑素和汉黄芩苷的含量最高,分别为14.90,2.70和0.54μgmg-1(干重)。

复方葶苈子胶囊质量标准的研究

目的 :制定复方葶苈子胶囊质量标准。方法 :采用薄层色谱法对制剂中的黄芩、桂技、甘草进行TLC鉴别 ;采用高效液相色谱法测定制剂中的黄芩苷含量。结果 :黄芩苷的回归方程A =90 8 7176C +10 7 76 6 8,r=0 9992。平均回收率为 97 3% ,RSD为 1 2 6 %。结论 :黄芩、桂枝、甘草的TLC鉴别具有专属性 ;黄芩苷的测定方法稳定 ,重复性好 ,可作为制定复方葶苈子胶囊质量标准的试验依据。