黄带拟鲹qRT-PCR内参基因筛选及验证

实时荧光定量PCR(qRT-PCR)是研究基因表达的一种广泛使用且有效的方法,选用黄带拟鲹(Pseudocaranx dentex)合适的内参基因,是qRT-PCR技术获得该物种基因表达可靠结果的关键。本研究首先测定了9个常用内参基因(β-actin、RPL13、EF-1α、GAPDH、HPRT、PPIA、β2M、TUB和PP2A)在黄带拟鲹成鱼组织中的表达丰度;同时,利用BestKeeper、NormFinder、geNorm和RefFinder 4种模型预测了内参基因的表达稳定性,发现其表达稳定性排序为RPL13>EF-1α>PP2A>HPRT>PPIA>TUB>β2M>β-actin>GAPDH。进一步通过定量检测目标基因myod1在不同组织的表达情况,验证上述预测结果的准确性。研究发现,RPL13和EF-1α单独或联合作为黄带拟鲹qRT-PCR内参基因,可显著提高目标基因表达量检测结果的稳定性与可靠性。结果表明,RPL13和EF-1α可作为黄带拟鲹不同组织q RT-PCR分析的内参基因。同时,也证实了并不是管家基因的表达在所有物种中都具有良好的稳定性,需要根据实际情况筛选适宜的内参基因。本研究结果可为后续黄带拟鲹功能基因表达特征的研究提供技术支撑,有望适用于其他鲹科鱼类。

黄带拟鲹肌肉营养成分分析

黄带拟鲹(Pseudocaranx dentex)肌肉鲜嫩味美,是刺身、寿司等上等食材的来源。为全面认识黄带拟鲹的营养价值,该研究采用生化法对其肌肉营养成分进行检测,并评价其营养品质。结果显示,黄带拟鲹肌肉粗蛋白含量较高。在氨基酸水平,必需氨基酸占总氨基酸的40.67%,鲜味氨基酸占总氨基酸的35.37%,符合FAO/WHO推荐的理想蛋白质标准;依据必需氨基酸的氨基酸评分(AAS)和化学评分(CS),蛋氨酸、缬氨酸分别是黄带拟鲹的第一、第二限制性氨基酸。黄带拟鲹肌肉中不饱和脂肪酸含量高达73.73%,其中,二十碳五烯酸(EPA)+二十二碳六烯酸(DHA)含量为21.20%,n-3系列多不饱和脂肪酸(PUFA)含量是n-6系列PUFA的1.95倍,说明黄带拟鲹可为人类提供优质的不饱和脂肪酸。黄带拟鲹肌肉中还含有人体组织结构和正常生理活动所必需的多种矿物质元素,是一种具有广阔开发前景的经济鱼类。

黄带拟鲹养殖技术

在室内工厂化循环水养殖车间和海上网箱开展黄带拟鲹(Pseudocaranx dentex)养殖试验研究。通过试验观察掌握了黄带拟鲹的生物学特点,摸清了其温度、溶解氧等主要水质指标的要求及适宜的饵料种类和投喂模式,在此基础上突破了室内工厂化及海上网箱黄带拟鲹养殖技术。工厂化养殖产量15~20 kg/m^(3),网海养殖产量10 kg/m^(3)。

温度对黄带拟鲹耗氧率、排氨率及窒息点的影响

利用实验生态学方法研究了不同温度(17、21、25℃)对黄带拟鲹Pseudocaranx dentex(389.34 g±49.70 g)耗氧率、排氨率及窒息点的影响。结果显示:17℃组耗氧率为(0.26±0.01)mg/(g·h),排氨率为(3.12±0.25)μg/(g·h),窒息点为(0.85±0.13)mg/L;21℃组耗氧率为(0.37±0.02)mg/(g·h),排氨率为(3.99±0.18)μg/(g·h),窒息点为(0.93±0.08)mg/L;25℃组耗氧率为(0.52±0.03)mg/(g·h),排氨率为(5.23±0.21)μg/(g·h),窒息点为(1.24±0.10)mg/L。黄带拟鲹的耗氧率、排氨率及窒息点均随温度的升高而升高,且温度对耗氧率和排氨率有显著影响(P<0.05)。同时,O/N比值在81.62~105.38,表明试验水温条件下黄带拟鲹的主要供能物质为脂肪和碳水化合物。