食用菌SJ-1漆酶酶学性质及降解黄曲霉毒素B_1的研究

为了进一步掌握高效降解黄曲霉毒素B_1的食用菌SJ-1的特性,考察了温度、pH以及金属离子对食用菌SJ-1漆酶酶活的影响,同时研究了该漆酶降解黄曲霉毒素B_1的降解曲线和降解方程。结果表明,食用菌SJ-1漆酶的最适反应温度为35℃,最适pH值为3.0。Cu^(2+)对该漆酶酶活有一定的激活作用,而Fe^(2+)、Ca^(2+)、Mg^(2+)、Na^+、K^+对其酶活都有较强的抑制作用。食用菌SJ-1漆酶降解黄曲霉毒素B_1的方程为y=-0.1712x^(2+)20.107x-76.587,其中x为反应时间,范围为0~48 h,y为黄曲霉毒素B_1降解量(ng),该方程在0~48 h内,能够推算出食用菌SJ-1漆酶降解黄曲霉毒素B_1的降解量。本研究结果为食用菌漆酶降解黄曲霉毒素的应用提供了理论指导和技术支持。

高产漆酶平菇的筛选及其在降解黄曲霉毒素B_1中的应用

通过选择培养基平板培养法和液体发酵培养法筛选得到2株高产漆酶的平菇菌株P1和P2,并对平菇菌株产漆酶的培养基进行筛选,得到产漆酶的最适培养基为最低盐MSM培养基。菌株P1不仅产漆酶能力最高,而且降解黄曲霉毒素的能力也最好。在MSM培养基中培养10d时,产漆酶量高达769.44U/L,在800μl的反应体系中,790μl粗酶液可以将1000ng黄曲霉毒素B1降解到222.62ng,降解率为77.74%,并且平菇粗酶液降解黄曲霉毒素B1的能力与其中漆酶的含量呈一定的正相关性。

产黄曲霉毒素B_1降解酶菌株的发酵工艺优化

黄曲霉毒素主要是由黄曲霉和寄生曲霉等真菌在生长繁殖过程中产生的有毒次级代谢产物。其具有极强的毒性、致癌性和致突变性并且广泛存在于食品、饲料、农副产品中,对人类和动物产生了极大的危害。试验在前期研究的基础上通过Plackett-Burman试验设计和中心复合设计对HSD8(Sinomonas sp.)菌株的发酵培养基进行优化,最终确定其发酵培养基为:糖蜜3 g/L,柠檬酸氢二铵10 g/L,磷酸二氢钾2 g/L,三水合磷酸氢二钾0.4 g/L,氯化钠4.5 g/L,一水合硫酸镁0.6 g/L,氯化钙0.6 g/L,硫酸镁2.16 g/L,香豆素0.17 g/L。通过对模型验证试验,黄曲霉毒素B_1降解酶酶活达736 U/mL,比优化前提高了25.54%。试验对菌株HSD8在生物降解黄曲霉毒素B_1方面具有指导意义,值得进一步研究开发。