中药黄芪饮片中黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)的UPLC-MS/MS分析测定

目的:通过超高效液相色谱-串联质谱法建立对中药黄芪饮片中黄曲霉毒素的含量的测定,了解中药黄芪饮片的质量安全状况。方法:样品经乙腈-水(体积比70:30)提取、离心后得到的上清液用磷酸盐缓冲溶液稀释后通过免疫亲和柱净化和富集,洗脱液过滤后,经优化流动相后反相色谱分离,串联质谱检测,内标法定量。结果:采用5mmoL/L甲酸铵溶液(含0.1%甲酸)和乙腈:甲醇=1:1(含0.1%甲酸)作流动相时,黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)的标准曲线相关系数R^(2)分别是0.9986、0.9996、0.9984、0.9970;其加标回收率分别为105%、95.4%、107%、98.8%;RSD在2.46%~4.90%;其方法检出限为0.06ug/kg,定量限为0.20ug/kg。结论:超高效液相色谱-串联质谱法简单快速,灵敏度高,精密度高,可满足大批量中药黄芪饮片中黄曲霉毒素含量测定的需要以及对其它中药材的检测参考方法;利用此法对50份中药黄芪饮片中黄曲霉毒素B、B_(2)、G_(1)、G_(2)进行抽检,其B_(1)、B_(2)检出率分别为4%、4%,G_(1)、G_(2)未检出。

荧光光谱法测定花生油中黄曲霉毒素B_(1)和B_(2)及其控制技术研究

通过荧光光谱法对6种花生油样品中黄曲霉毒素B_(1)和B_(2)的含量进行测定。结果表明,花生油中的黄曲霉毒素B_(1)和B_(2)均符合国家标准要求。然而,具体的含量会因不同批次和不同品牌而有所不同,同时古法压榨的花生油中黄曲霉毒素B_(1)和B_(2)含量较高,而物理压榨的花生油中含量较低。为了控制花生油中黄曲霉毒素的含量,应加强田间管理、科学采收和适当的采样检测,同时对存储、运输和生产过程进行严格管理。

HPLC法测定小儿扶脾颗粒中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2含量

目的:建立高效液相色谱法测定小儿扶脾颗粒中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2的含量,并通过对31批样品检测结果的分析初步研究小儿扶脾颗粒在黄曲霉毒素污染方面的安全性,以提示企业选择安全的原料药材投料。方法:采用柱后光化学衍生HPLC法测定小儿扶脾颗粒中黄曲霉毒素的含量。采用Ecosil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-水(30∶10∶60),荧光检测器,激发波长为360 nm,发射波长为450 nm,流速为0.8 ml·min^(-1),柱温为30℃进样量为20μl。结果:黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2分别在9.65~48.25 pg(r=0.999 1)、2.45~12.25 pg(r=0.999 8)、10.5~52.5 pg(r=0.995 6)、2.55~12.75 pg(r=0.996 6)范围内线性关系良好;加样回收率在83.3%~95.6%之间。有14批样品检出黄曲霉毒素,其总含量为0.21×10^(-3)~0.54×10^(-3)μg·g^(-1)。结论:该方法操作简便,结果稳定可靠,可用于小儿扶脾颗粒的质量控制。

HPLC-MS/MS法测定化妆品中黄曲霉毒素G_(2)、G_(1)、B_(2)、B_(1)

建立高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定化妆品中黄曲霉毒素G_(2)、G_(1)、B_(2)、B_(1)的方法。化妆品经70%甲醇提取并经免疫亲和柱净化,采用C_(18)柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相体系为2.0 mmol/L乙酸铵甲醇溶液(含0.1%甲酸)和2.0 mmol/L乙酸铵水溶液(含0.1%甲酸),流速为0.3 mL/min进行梯度洗脱,扫描方式为正离子多反应监测模式(MRM)。黄曲霉毒素G_(2)、G_(1)、B_(2)、B_(1)在一定浓度范围内线性关系均良好,相关系数不低于0.998。检出限范围为0.028~0.078 ng/g。精密度及稳定性均良好,回收率85.0%~96.2%。该方法准确、高效,为化妆品中黄曲霉毒素的测定提供了技术支持。

启脾丸中黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)含量测定及安全性评价

目的建立高效液相色谱法测定启脾丸中黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)的含量,并评价启脾丸中黄曲霉毒素安全性。方法样品提取后通过免疫亲和柱处理,采用HPLC-柱后衍生-FLD法对全国10个生产企业的64批启脾丸进行测定。结果启脾丸中黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)的平均回收率为84.09%、84.38%、83.11%、86.33%,RSD为2.5%、2.0%、2.8%、1.9%,64批启脾丸中52批检出黄曲霉毒素,检出率为81.2%,不合格率为9.4%,部分样品存在黄曲霉毒素污染的问题。结论该方法操作简便,结果稳定可靠,可为该制剂的质量安全控制提供依据。

UPLC-MS/MS测定健脾丸中的黄曲霉毒素G_(2)、G_(1)、B_(2)和B_(1)

建立了超高效液相色谱串联四级杆质谱法(UPLC-MS/MS)测定健脾丸(大蜜丸和小蜜丸)中黄曲霉毒素G_(2)、G_(1)、B_(2)和B_(1)的含量的方法。样品经75%的甲醇提取和免疫亲和柱净化后,以超高效液相色谱串联四级杆质谱进行分析测定。黄曲霉毒素G_(2)、G_(1)、B_(2)和B_(1)分别在0.0304~3.040 ng/mL(r=0.9998)、0.0848~8.480(r=0.9996)、0.0344~3.440(r=0.9996)、0.0816~8.160(r=0.9996)范围内线性关系良好;加样回收率在86.6%~91.7%之间。12批样品检出黄曲霉毒素。该法灵敏、快速、准确,专属性强,可用于测定健脾丸(大蜜丸和小蜜丸)中黄曲霉毒素。

复合免疫亲和柱净化-UPLC-MS/MS测定饲料中黄曲霉毒素B_(1)、玉米赤霉烯酮和T-2毒素

为建立饲料(浓缩饲料、配合饲料、植物性饲料原料)中黄曲霉毒素B_(1)、玉米赤霉烯酮和T-2毒素残留量的复合免疫亲和柱净化-UPLC-MS/MS检测方法,实验样品经86%乙腈提取,复合免疫亲和柱净化,定容后经液相快速分离,电喷雾离子化,采用MRM监测模式,正负离子扫描,外标法定量。结果表明:黄曲霉毒素B_(1)检测限为0.02μg/kg,定量限为0.05μg/kg,在0.05~2.0μg/L线性关系良好,r≥0.9990,在添加不同倍数定量限浓度水平上回收率为90.5%~97.8%,变异系数≤2.6%;玉米赤霉烯酮检测限为0.2μg/kg,定量限为0.5μg/kg,在0.5~10.0μg/L线性关系良好,r≥0.9992,在添加不同倍数定量限浓度水平上回收率为85.4%~93.7%,变异系数≤4.6%;T-2毒素检测限为0.02μg/kg,定量限为0.05μg/kg,在0.05~2.0μg/L线性关系良好,r≥0.998,在添加不同倍数定量限浓度水平上回收率为87.4%~95.2%,变异系数≤3.9%。本方法分析速度快、灵敏度高、准确可靠,可用于饲料中黄曲霉毒素B_(1)、玉米赤霉烯酮和T-2毒素的检测分析。

17种植物性饲料原料中玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B1、伏马毒素(B_(1)+B_(2))、赭曲霉毒素A污染调查检测分析及控制建议

为了解掌握玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B_(1)、伏马毒素(B_(1)+B_(2))、赭曲霉毒素A在植物性饲料原料中的污染状况,指导帮助饲料、养殖企业开展霉菌毒素防控,减少这4种霉菌毒素对饲料、畜产品的危害,最大程度减少经济损失。2022年对17种59份植物性饲料原料进行调查采样,采用液相色谱—串联质谱法、免疫亲和柱净化—高效液相色谱法检测,依据《饲料卫生标准》(GB 13078-2017)判定分析。结果表明:玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B1、伏马毒素(B_(1)+B_(2))、赭曲霉毒素A在17种植物性饲料原料中的污染状况不同。玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B1、伏马毒素(B_(1)+B_(2))检出率分别为20.3%、23.7%、25.4%,最大检测值分别为0.784mg/kg、115μg/kg、27.736mg/kg;赭曲霉毒素A检出率为0。从检测结果得出:玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B_(1)、伏马毒素(B_(1)+B_(2))3种霉菌毒素在17种植物性饲料原料中存在污染,整体污染率35.59%;分别有1种植物性饲料原料中玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B_(1)超标,其他原料无超标,检出率与超标率不成正比。表明该4种霉菌毒素在植物性饲料原料中污染普遍,对饲料、养殖产品及消费安全造成严重影响和危害。针对该问题,提出控制植物性饲料原料质量安全的建议,为今后开展植物性饲料原料中4种霉菌毒素污染控制提供建议参考。

黄曲霉毒素B_(1)、玉米赤霉烯酮和呕吐毒素的累加细胞毒性研究

由于饲料中多种霉菌毒素并存的几率比较高,本研究以仔猪肠上皮细胞(IPEC-J2)为模型,研究黄曲霉毒素B1(AFB_(1))、玉米赤霉烯酮(ZEA)和呕吐毒素(DON)的叠加细胞毒性。细胞毒性试验选用AFB1、ZEA和DON三种毒素作为响应面Box-Behnke设计的三个因素,以AFB_(1):10、20、30μg/L,ZEA:150、300、450μg/L,DON:500、1000、1500μg/L作为Box-Behnke设计的三个编码水平。利用响应面设计构建得到17组复合霉菌毒素组合,以其对IPEC-J2细胞活力的影响作为参考指标,得到对细胞损伤程度最高和最低的霉菌毒素添加比例。结果表明:经方程预测后,得到细胞活力最低(霉菌毒素毒性最高)的AFB_(1)、ZEA和DON组合为30、150μg/L和1500μg/L,经测定细胞活力为32.32%;得到细胞活力最高(霉菌毒素毒性最低)的AFB_(1)、ZEA和DON组合为10、150μg/L和600μg/L,经测定细胞活力为53.01%。该结果为多种霉菌毒素叠加毒性的研究提供了依据。

2019-2023年驻马店地区饲料原料中霉菌毒素的检测情况与分析

霉菌毒素是由真菌产生的次级代谢产物,对饲料原料、养殖及人体健康安全构成严重威胁。本研究采集了2019-2023年的243批次11种饲料原料样本,涵盖玉米及其副产物、豆粕及其副产物、小麦及其副产物、饼粕类共4类原料种类,采用液相色谱-串联质谱法和高效液相色谱法分别对黄曲霉毒素B_(1)、赭曲霉毒素A、伏马毒素(B_(1)+B_(2))进行定性定量检测分析。结果表明:三种毒素的检出数为117批,整体合格率为94.2%,其中玉米及其副产物和饼粕类的检出率较高,玉米及其副产物的不合格率较高。研究还分析了影响霉菌毒素污染的因素,并提出了从源头预防霉菌毒素污染的防控措施。

HPLC柱后光化学衍生荧光检测法检测3种含土鳖虫中成药的黄曲霉毒素

目的:考察免疫亲和净化HPLC柱后光化学衍生荧光检测法在中成药中黄曲霉毒素测定的可行性,并对其污染情况进行筛查,为中成药黄曲霉毒素污染监管提供依据。方法:采用免疫亲和净化HPLC柱后光化学衍生荧光检测法对含有土鳖虫的中成药中黄曲霉毒素的含量进行测定。样品经有机溶剂提取、免疫亲和柱净化后,利用高效液相色谱-光化学衍生-荧光检测器进行分析测定。对3种含土鳖虫的中成药,考察加样回收率,测定黄曲霉毒素残留量,并对测定结果进行分析。采用高效液相色谱-串联质谱法对部分超出限度批次进行结果确认。结果:3种中成药中黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)的回收率均在80%~113%。3种24批中成药中,21批检出黄曲霉毒素,检出率为87.5%,部分批次黄曲霉毒素含量明显偏高。结论:免疫亲和净化HPLC柱后光衍生荧光检测法结果准确,重现性好,可用于中成药中黄曲霉毒素的测定。含土鳖虫药材的中成药,个别品种黄曲霉毒素污染情况较为严重,存在安全隐患,应引起生产企业的重视,保障用药安全。

柱后碘衍生法荧光检测黄曲霉毒素的方法探讨

目的优化柱后碘衍生法检测中药材中黄曲霉毒素G_2,G_1,B_2,B_1的含量。方法样品经甲醇-水(70:30)提取后,通过免疫亲和柱净化、柱后碘衍生高效液相色谱-荧光检测器测定。结果在优化条件下,黄曲霉毒素G_2、G_1、B_2、B_1的检出限分别为0.20,0.05,0.15,0.02μg/kg,回收率分别为78.63%,81.75%,79.47%,80.70%。结论该方法简便快速,灵敏度高,重复性好,可满足中药材中黄曲霉毒素含量检测的需要。

多功能净化柱-柱前衍生-高效液相色谱法测定菜籽油中4种黄曲霉毒素

本文研究建立一种多功能净化柱-高效液相色谱法测定菜籽油中黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)含量的方法。试样经PriboFast^(■)多功能净化柱净化,三氟乙酸柱前衍生后采用高效液相色谱法测定,以保留时间定性,外标法定量。结果表明,四种黄曲霉毒素在0.03~40.0μg/L线性范围内关系良好,相关系数(r^(2))均大于0.998,检测限均为0.03μg/kg,定量限均为0.1μg/kg,当添加浓度为0.1和0.5μg/kg,回收率为79.6%~89.0%,测定结果RSD(n=6)在0.8%~2.4%之间。

超高效液相色谱-串联质谱法测定坚果中的黄曲霉毒素含量

开心果、核桃、杏仁是深受人们喜爱的坚果,对人类健康有诸多益处,还是一种极好的营养来源。同时,此类坚果还与化学危害有关,发霉变质产生的真菌毒素时刻威胁着人们健康。为建立快捷、准确、高效的开心果、核桃和杏仁中黄曲霉毒素B_(1),B_(2),G_(1),G_(2)超高效液相色谱-串联质谱测定方法。样品以乙腈水提取,通过优化的QuEChERS净化,过MycoSep226多功能净化柱富集,超高效液相色谱质谱联用仪测定。在0.5~5.0 g/kg添加水平下回收率为85.9%~112.4%;相对偏差(RSD)在1.02%~5.75%,黄曲霉B_(1),B_(2),G_(1),G_(2)方法定量限为0.5 g/kg。结果表明,该方法快速便捷、回收率稳定,适用于开心果、核桃和杏仁中黄曲霉毒素B_(1),B_(2),G_(1),G_(2)的定量测定。

超高效液相色谱-荧光法测定丹参饮片中黄曲霉毒素

目的建立超高效液相色谱-荧光法测定丹参饮片中黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)。方法样品经70%甲醇提取,通过免疫亲和柱净化后,用超高效液相色谱-荧光法进行分析测定,WatersAcquityUPLC BEHC_(18)色谱柱(100mm×2.1mm,1.7μm);流动相为甲醇-乙腈(1∶1)、水,梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min;柱温30℃;荧光检测器激发波长365 nm;发射波长456 nm;进样量2μL。结果黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)分别在0.1201~1.9208、0.0361~0.5772、0.1221~1.9540、0.0421~0.6732 ng/mL内线性关系良好,r均大于0.99;定量限分别为0.10、0.03、0.39、0.03 ng/mL;黄曲霉毒素B_(1)的回收率为107%,RSD为6%;黄曲霉毒素总含量的回收率为80%,RSD为9%。专属性、重复性、精密度、稳定性试验均符合检测要求。结论所建立的方法准确、可靠、专属性强,可准确地测定丹参饮片中黄曲霉毒素的含量。