黄毛耳草中东莨菪内酯的HPLC含量测定及提取工艺优化研究

目的:建立黄毛耳草中东莨菪内酯的HPLC含量测定方法,并优化其提取工艺。方法:色谱柱waters symmetry C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈0.1%磷酸水,检测波长345 nm,流速0.8 mL/min,进样量10μL,测定东莨菪内酯含量。采用超声提取法,以乙醇浓度、超声时间、超声功率和料液比为考察因素,以东莨菪内酯含量为评价指标,优化其提取工艺。结果:最佳提取工艺为乙醇浓度74%、提取时间45 min、超声功率250 W、液料比25∶1。精密称取3份黄毛耳草样品,每份2.0 g,此条件下东莨菪内酯的提取含量为为81.97μg/g,与预测值81.41μg/g无显著性差异。结论:本试验建立的HPLC法可用于黄毛耳草中东莨菪内酯的含量测定,所优化的提取工艺稳定可靠、简便可行。

耳草属植物的化学研究Ⅷ.黄毛耳草化学成分的分离和鉴定

从中药黄毛耳草Ｈｅｄｙｏｔｉｓ ｃｈｒｙｓｏｔｒｉｃｈａ中分离并鉴定出１０个化合物，经鉴定为：咖啡酸（ｃａｆｆｅｉｃ ａｃｉｄ， Ⅰ），东莨菪内酯（ｓｃｏｐｏｌｅｔｉｎ， Ⅱ）， ２， ６-二甲氧基对苯醌（２， ６－ｄｉｍｅｔｈｏｘｙ－１， ４－ｂｅｎｚｏｑｕｉｎｏｎｅ，Ⅲ），七叶内酯（ａｅｓｃｕｌｅｔｉｎ，Ⅳ），异落叶松树脂醇（ｉｓｏｌａｒｉｓｉｒｅｓｉｎｏｌ， Ⅴ），β-谷甾醇（β-ｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ，Ⅳ），胡萝卜苷（ｄａｕｃｏｓｔｅｒｏｌ，Ⅶ），异鼠李素-３-芸香糖苷（ｎｉｃｏｔｉｆｌｏｒｉｎ，Ⅷ），水仙苷（ｎａｒｃｉｓｓｉｎ，Ⅸ）和芦丁（ｒｕｔｉｎ，Ⅹ）。除Ⅱ和Ⅵ外均为首次从该植物中分得。

黄毛耳草中乌索酸的分离提纯及RP-HPLC分析

采用'醇提凝析法'从黄毛耳草中分离提纯乌索酸,用IR、MS、NMR等技术对乌索酸结构进行了表征.建立了反相高效液相色谱法测定乌索酸含量的方法,色谱柱为SymmetryShield Rp18柱(3.9 mm×150mm,5 μm);流动相为甲醇:水(88:12,V/V);流速为1.0 mL/min;二极管阵列检测器检测,检测波长为210nm;柱温为25℃;线性范围:4.5～22.5 μg;线性回归系数大于0.999 8.HPLC测定乌索酸纯度为99.82%,得率为3.65‰.该方法具有快速简便、精密度高、重现性好、线性范围宽的特点,可作为控制乌索酸质量的方法.

黄毛耳草化学成分的研究

目的 :研究黄毛耳草抗癌活性成分。方法 :用硅胶、聚酰胺、SephadexLH 2 0等层析方法分离化合物 ,用光谱和化学方法鉴定结构。结果 :鉴定了 2 3个化合物 ,其中 5个新化合物 ;黄毛耳草碱具有较强的细胞毒活性。结论 :黄毛耳草中主要含有环烯醚萜甙、黄酮、香豆素、木脂素、生物碱等成分 ,其中生物碱是抗癌活性成分。

黄毛耳草化学成分的分离与鉴定

从黄毛耳草中分离到七个化合物,经理化和光谱分析鉴定为车叶草甙,熊果酸,白桦脂酸,齐墩果酸,β-谷甾醇,棕榈酸十六醇酯,三十二羧酸。

黄毛耳草的研究进展

参阅近几年来与黄毛耳草研究相关的国内外文献,对黄毛耳草的本草考证、化学成分、质量控制方法及其临床应用研究进展进行了综述,为深入研究黄毛耳草提供参考。黄毛耳草中的化学成分主要为环烯醚萜类、三萜类、黄酮类、生物碱类和甾醇类等。目前,黄毛耳草的质量评价主要以单指标质量控制和薄层色谱为主,尚不够完善。黄毛耳草具有清热除湿、解毒消肿、活血舒筋之功效,国内临床上主要用于治疗各种类型肝炎、肠炎和肾炎等,应用前景广阔。

黄毛耳草药材的薄层色谱研究

目的:建立黄毛耳草药材的定性控制方法。方法:采用薄层色谱法分别检查药材中的环烯醚萜类、黄酮类和内酯类成分。结果:环烯醚萜类、黄酮类和内酯类成分分别在以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(5∶4∶2∶0.5)、氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(5∶1∶1∶0.5)和氯仿-乙酸乙酯-甲酸(5∶3∶1)为展开剂的条件下获得理想分离。结论:该方法简便、快速,可作为黄毛耳草药材的定性控制方法。

黄毛耳草HPLC指纹图谱研究

目的:建立黄毛耳草的HPLC指纹图谱。方法:以Hypersil BDS C18(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,甲醇-0.1%醋酸溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长345 nm,柱温35℃,以乌索酸为参照物得到含有9个峰的共有模式,以共有模式对不同产地黄毛耳草指纹图谱进行相似度分析。结果:从谱图相似度看出,不同产地黄毛耳草指纹图谱基本一致,但也存在地域性差异。结论:HPLC指纹图谱可用于黄毛耳草的鉴别和质量控制。

黄毛耳草化学成分的分离与鉴定

从黄毛耳草中分离到五个化合物,经理化和光谱分析,鉴定为:(Ⅰ)车叶草甙,(Ⅱ)熊果酸,(Ⅲ)β-谷甾醇,(Ⅳ)棕榈酸十六醇酯,(Ⅴ)三十二羧酸。

液质联用分析黄毛耳草中的黄酮类化合物

黄毛耳草是民间常见的一种草药,其所含化合物主要有环烯醚萜类、三萜类、黄酮类、甾醇类、糖苷类等几种类型。该试验采用LC-MC方法对黄毛耳中黄酮类化合物进行分析,鉴定出了芦丁和异鼠李素-3-O-[6-O-α-L-(鼠李糖基)]-β-D-葡萄糖苷2种化合物。

耳草属植物的化学研究I.黄毛耳草中环烯醚萜甙的分离和鉴定

从中药黄毛耳草（Ｈｅｄｙｏｔｉｓｃｈｒｙｓｏｔｒｉｃｈａ）中分离鉴定出１０个环烯醚萜类化合物，其中８个已知物为：车叶草甙（ａｓｐｅｒｕｌｏｓｉｄｅ，１），鸡屎藤甙甲酯（ｓｃａｎｄｏｓｉｄｅｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ，２），车叶草酸（ａｓｐｅｒｕｌｏｓｉｄｉｃａｃｉｄ，３），去乙酰车叶草酸（ｄｅａｃｅｔｙｌａｓｐｅｒｕｌｏｓｉｄｉｃａｃｉｄ，４），马钱子素（ｌｏｇａｎｉｎ，５），去乙酰车叶草甙（ｄｅａｃｅｔｙｌａｓｐｅｒｕｌｏｓｉｄｅ，６），乙酰鸡屎藤甙甲酯（ａｃｅｔｙｌｓｃａｎｄｏｓｉｄｅｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ，７），６β羟基京尼平（６βｈｙｄｒｏｘｙｇｅｎｉｐｉｎ，８）；２个新化合物命名为耳草甙（ｈｅｄｙｏｓｉｄｅ，９），６′乙酰车叶草甙（６′ａｃｅｔｙｌａｓｐｅｒｕｌｏｓｉｄｅ，１０）。除车叶草甙外均为首次从该植物得到。

黄毛耳草总黄酮提取与纯化工艺的研究

用L9(34)正交试验设计研究黄毛耳草总黄酮的提取工艺。结果表明,最佳工艺为用体积12倍70%的乙醇提取2次,每次1.5h。选用NKA-9极性大孔树脂纯化总黄酮,并且用pH为5的水淋洗除去多糖,最后所得总黄酮含量为43.1%。

黄毛耳草化学成分及其中车叶草苷和京尼平苷的含量测定研究

目的研究黄毛耳草(Hedyotis chrysotricha)全草的化学成分,并采用高效液相色谱(HPLC)法对其主要成分车叶草苷和京尼平苷进行含量测定。方法采用微孔树脂(MCI)柱及半制备高效液相色谱等技术,对其醇提物进行系统分离,得到单体;采用质谱(MS)、核磁共振(NMR)等波谱技术鉴定其结构。定量分析采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)法;色谱柱为Welch Ultimate XB-C 18(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈∶0.1%甲酸水溶液(13∶87)为流动相;流速:1.0 mL·min^-1;检测波长:240 nm,柱温:30℃;进样量10μL。结果从植物中共分离到14个化合物,分别鉴定为(24 R)-stigmastane-3β,5α,6β-triol(1)、24ξ-ethylcholest-22 E-ene-3β,5α,6β-triol(2)、5-stigmasten-3β,7β-diol(3)、豆甾醇(4)、β-谷甾醇(5)、hyptatic acid B(6)、6β-hydroxyursolic acid(7)、齐墩果酸(8)、车叶草苷(9)、车叶草酸(10)、京尼平苷(11)、aitchisonide A(12)、3 S,5 R,6 R,9 S-tetrahydroxy-7 E-megastigmene(13)及(6 S,9 R)-roseoside(14)。首次基于2D-NMR数据完整归属了化合物6的氢谱数据;含量测定结果表明,车叶草苷和京尼平苷分别在12.80~128.00μg·mL^-1(r=0.9990)、3.00~30.00μg·mL^-1(r=0.9993)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为103.19%(RSD=2.40%)、95.06%(RSD=3.90%)。结论共分离鉴定14个化合物,其中,7个化合物(1~3、6、7、12、13)为首次从耳草属植物中分离,14为首次从黄毛耳草中得到;采用高效液相色谱-二极管阵列检测器建立车叶草苷和京尼平苷含量测定方法,10个批次中该两个化合物含量分别为0.733~2.282及0.080~0.328 mg·g^-1,方法简便准确,可作为该药材环烯醚萜苷的质量控制方法。

高效液相色谱法测定黄毛耳草中槲皮素的含量

目的 建立黄毛耳草中槲皮素含量的测定方法。方法 色谱柱：ODSKromasil C18色谱柱（4．6mm×150mm，5μm）；柱温：35℃；流动相：甲醇-0．4％磷酸（体积比45：55），流速：1．0mL/min，检测波长：365nm。结果 槲皮素进样量在0．005—0．045μg范围内与峰面积线性关系良好（r=0．9997），回收率99．88％，RSD 0．58％。结论 本法简便，结果可靠，可用于黄毛耳草厦其制剂的质量控制。

黄毛耳草总黄酮的提取工艺优化及有效成分的含量测定

目的优化黄毛耳草总黄酮的提取工艺,测定黄毛耳草药材中黄酮类成分芦丁、烟花苷的含量。方法考察乙醇浓度、提取时间、液料比3个因素,采用Box-Behnken响应面法设计黄毛耳草总黄酮提取条件并优化提取工艺。采用HPLC法测定黄毛耳草药材中芦丁、烟花苷的含量,以甲醇-0.5%甲酸溶液为流动相,检测波长为360 nm,流速1.0 mL/min,柱温为30℃。结果黄毛耳草总黄酮的最佳提取工艺为:乙醇浓度70%、超声时间47 min、液料比12.5∶1,此条件下黄毛耳草总黄酮得率为12.62%,与预测值12.59%差异无统计学意义。黄毛耳草中芦丁的含量为0.74 mg/g,烟花苷的含量为0.058 mg/g。结论利用Box-Behnken响应面设计法优化的黄毛耳草总黄酮提取工艺方法稳定,预测性较好,可为黄毛耳草总黄酮的提取工艺提供参考。建立的高效液相色谱法操作简便、结果准确,可用于同时测定黄毛耳草中芦丁和烟花苷的含量。

黄毛耳草药材质量标准研究

目的:建立黄毛耳草药材的质量标准。方法:以乙腈-水(7∶93)为流动相,测定波长为238nm,采用HPLC测定黄毛耳草药材中鸡矢藤苷甲酯的含量。结果:鸡矢藤苷甲酯在22.08～552mg·L-1与峰面积呈良好线性关系,加样回收率为99.7%(n=6),RSD0.72%。结论:方法简便、快速,可作为黄毛耳草药材的质量标准。

分子印迹聚合物固相萃取黄毛耳草中熊果酸

将分子印迹技术与固相萃取技术结合,分离富集黄毛耳草中熊果酸。以丙烯酸(AC)为聚合单体,在二甲基丙烯酸乙二醇酯(EGDMA)交联作用下制备熊果酸印迹聚合物,通过红外光谱验证聚合物结构,通过平衡吸附试验和选择性吸附试验验证聚合物的吸附性能,将聚合物用于固相萃取填料分离黄毛耳草中熊果酸。结果表明,熊果酸与丙烯酸通过氢键发生了自组装,形成稳定复合物,印迹聚合物对熊果酸吸附能力强、选择性好,作为固相萃取填料可实现黄毛耳草中熊果酸的分离。所制备熊果酸印迹聚合物对熊果酸具有吸附特异性,可用于中药有效成分熊果酸的分离和富集。

肠炎宁片的薄层色谱研究

目的建立肠炎宁片的薄层色谱方法。方法采用不同方法及展开系统,以对照药材为对照,分别对地锦草、黄毛耳草、樟树根、香薷进行薄层色谱方法研究。结果地锦草以正己烷-醋酸乙酯(5∶1)、黄毛耳草以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲酸(5∶3∶1)、樟树根以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇(5∶3∶0.5)为展开剂,香薷采用聚酰胺薄膜以丙酮-36%醋酸(2∶1)展开剂,均获理想分离效果,且阴性无干扰。结论方法简便、快速、重复性好,可作为肠炎宁片的薄层鉴别方法。