大黄灵仙方调控胆管细胞炎症的作用及机制研究

目的 观察大黄灵仙方调控白细胞介素-1受体相关激酶(interleukin-1 receptor-associated kinase 1,IRAK)-1和IRAK-4以及成纤维生长因子-3激活酶1MAP3K7结合蛋白2(TGF-3 activator 1 map3k7-binding protein 2,TAB2)的表达水平,探讨其缓解胆管细胞炎症的作用机制,为预防肝胆管结石的形成及术后复发提供理论依据。方法 将45只SPF级健康雄性SD大鼠随机分为9组,空白组、模型组、大黄灵仙颗粒组、激活核转录因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)阻断剂组、p38丝裂活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)阻断剂组、NF-κB阻断剂+p38MAPK阻断剂组、NF-κB阻断剂+大黄灵仙颗粒组、p38MAPK阻断剂+大黄灵仙颗粒组、NF-κB阻断剂+p38MAPK阻断剂+大黄灵仙颗粒组,每组大鼠5只。除空白组以外,其余各组大鼠于胆总管处一次性注射5 mg/kg内毒素脂多糖以构建肝内胆管感染动物模型。第7天灌胃结束后取材,取大鼠完整胆管树组织,采用蛋白免疫印迹法和实时荧光定量PCR检测IRAK-1、IRAK-4、TAB2蛋白及mRNA表达量。结果 (1)与空白组比较,模型组IRAK-1、IRAK-4、TAB2蛋白及mRNA表达量升高(P<0.05);(2)与模型组比较,大黄灵仙颗粒组、NF-κB阻断剂组、p38MAPK阻断剂组、NF-κB阻断剂+p38MAPK阻断剂组、NF-κB阻断剂+大黄灵仙颗粒组、IRAK-1、IRAK-4、TAB2的蛋白及mRNA表达量降低(P<0.05),NF-κB阻断剂+p38MAPK阻断剂+大黄灵仙颗粒组IRAK-1、IRAK-4、TAB2蛋白及TAB2 mRNA表达量均显著下降(P<0.05);(3)与大黄灵仙颗粒组比较,NF-κB阻断剂+大黄灵仙颗粒组、NF-κB阻断剂+p38MAPK阻断剂+大黄灵仙颗粒组IRAK-1、IRAK-4、TAB2的蛋白表达量和NF-κB阻断剂+p38MAPK阻断剂组的IRAK-1、IRAK-4、TAB2 mRNA表达量均下降(P<0.05)。结论 大黄灵仙方可缓解内毒素脂多糖诱导的大鼠胆管炎症反应,抑制炎症因子的异常表达,促使胆道恢复至非炎症状态,从而达到预防肝胆管结石的形成及术后复发的目的,其作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB/MAPK信号通路下游IRAK-1、IRAK-4和TAB2因子的活化有关。

大黄灵仙方调控肝内胆管细胞炎症大鼠的作用及机制研究

目的:观察大黄灵仙方对肝内胆管细胞炎症模型大鼠MAPK/NF⁃κB信号通路中IKKα、ASK1、MKK3以及CX3CL1关键因子的表达水平的影响,探讨其缓解肝内胆管细胞炎症的改善作用及可能机制。方法:45只SD大鼠按照完全随机方法分为9组,每组大鼠5只,空白组、模型组、大黄灵仙颗粒组、NF⁃κB组、p38MAPK组、NF⁃κB+p38MAPK组、NF⁃κB+大黄灵仙颗粒组、p38MAPK+大黄灵仙颗粒组、NF⁃κB+p38MAPK+大黄灵仙颗粒组。除空白组外,余下各组大鼠均在胆总管注射5 mg/kg LPS制备肝内胆管炎症模型。第7天灌胃结束后取大鼠胆管树,采用HE染色观察其炎性程度,蛋白免疫印迹法和实时荧光定量PCR检测IKKα、ASK1、MKK3以及CX3CL1蛋白及mRNA表达量。结果:HE病理结果显示,模型组的肝内胆管组织和细胞炎症明显,加入大黄灵仙颗粒和信号阻断剂后肝内胆管炎症状态较前改善,总病理评分差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,大黄灵仙颗粒组、p38MAPK组、NF⁃κB组、NF⁃κB+p38MAPK组、NF⁃κB+大黄灵仙颗粒组、p38MAPK+大黄灵仙颗粒组、NF⁃κB+p38MAPK+大黄灵仙颗粒组的ASK1、CX3CL1蛋白及mRNA表达量下降,MKK3 mRNA表达量上升以及p38MAPK组IKKα和NF⁃κB+大黄灵仙颗粒组MKK3蛋白表达量上升(P<0.05)。与大黄灵仙颗粒组比较,p38MAPK组、NF⁃κB组、NF⁃κB+p38MAPK组、p38MAPK+大黄灵仙颗粒组、NF⁃κB+大黄灵仙颗粒组、NF⁃κB+p38MAPK+大黄灵仙颗粒组的ASK1、CX3CL1 mRNA表达量下降,p38MAPK+大黄灵仙颗粒组、NF⁃κB+大黄灵仙颗粒组、NF⁃κB+p38MAPK+大黄灵仙颗粒组的MKK3 mRNA表达量上升(P<0.05)。与大黄灵仙颗粒组相比,p38MAPK组的IKKα蛋白表达量下降,NF⁃κB+大黄灵仙颗粒组的ASK1、MKK3蛋白表达量上升(P<0.05),而NF⁃κB+p38MAPK+大黄灵仙颗粒组的CX3CL1蛋白表达量下降(P>0.05)。结论:大黄灵仙方可缓解LPS诱导的大鼠肝内胆管炎症反应,促进胆管细胞的修复,从而达到降低PIS发生及术后复发的目的,其作用机制可能与抑制NF⁃κB/MAPK信号通路中的IKKα、ASK1、MKK3以及CX3CL1关键炎症因子的活化有关。

大黄灵脾颗粒剂质量标准研究

目的建立大黄灵脾颗粒剂的质量标准。方法采用高效液相色谱法(HPLC)对大黄灵脾颗粒剂中的淫羊藿苷、丹酚酸B分别进行含量测定。结果淫羊藿苷和丹酚酸B进样量分别在0.038~7.672µg(r=0.9998)和0.275~4.216µg(r=0.9999)范围内,与峰面积线性关系良好,平均加样回收率分别为98.5%(RSD=1.9%)和97.7%(RSD=1.9%)。结论HPLC简便、准确、可靠、重现性好,可有效控制大黄灵脾颗粒剂的质量。

基于IL-6/JAK/STAT3信号通路探讨大黄灵仙方缓解胆管细胞炎性反应的作用机制

目的:基于IL-6/JAK/STAT3信号通路探讨大黄灵仙方缓解脂多糖(LPS)诱导肝内胆管炎症模型大鼠的胆管细胞炎性反应的作用机制。方法:将50只SD大鼠随机分为5组,空白组、模型组、胆宁片(0.5 g/kg)、大黄灵仙方低、高浓度组(2.4 g/kg、4.8 g/kg),每组10只。除空白组以外,其余各组大鼠于胆总管处一次性注射1.25 mg/kg LPS以构建肝内胆管感染动物模型。第8天灌胃结束后取材,取大鼠肝门处肝脏组织,采用HE染色观察肝门和胆管树组织病理变化。生化法测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的表达水平。酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清中白介素6(IL-6)、Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)、信号转导和转录活化因子3(STAT3)的表达水平。蛋白免疫印迹法(WB)、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测胆管树组织中的IL-6、JAK2、STAT3蛋白及mRNA的表达水平。结果:(1)与空白组对比,模型组大鼠的肝窦和门管区小叶间胆管等结构均被破坏,周围存在炎性细胞浸润,血清中ALT、AST、MDA、IL-6、JAK2、STAT3表达量明显上升,SOD的表达水平下降,IL-6、JAK2、STAT3蛋白及mRNA表达水平升高。(2)与模型组比较,胆宁片组、大黄灵仙方低、高浓度组的大鼠肝脏病理损伤程度均有改善,能显著降低血清中ALT、AST、MDA、IL-6、JAK2、STAT3和上调SOD的表达水平,下调IL-6、JAK2、STAT3蛋白及mRNA的表达,以大黄灵仙方高浓度组效果最佳。(3)与胆宁片组相比,大黄灵仙方低、高浓度组的大鼠肝脏病理损伤程度趋于正常,无明显炎性细胞浸润,血清中ALT、AST、MDA、IL-6、JAK2、STAT3表达量以及IL-6、JAK2、STAT3蛋白及mRNA表达水平均降低,SOD的表达水平上升,以大黄灵仙方高浓度组治疗效果最佳。结论:大黄灵仙方可有效减缓LPS诱导的大鼠胆管炎症反应,促使胆道恢复至非炎症状态,其机制可能与下调IL-6/JAK/STAT3信号通路的活化有关,以大黄灵仙方高浓度组治疗效果最佳。

大黄灵仙方对胆固醇结石豚鼠模型胆囊Cajal间质细胞中scf/c-kit信号通路的影响

目的 观察在大黄灵仙方的调控下干细胞生长因子(scf)、酪氨酸激酶受体(c-kit)的表达水平,探讨其影响胆囊动力学改变的可能机制,为大黄灵仙方预防胆石症的发生及复发提供理论依据。方法 将45只SPF级健康雄性豚鼠随机分为正常组、模型组、中药组,其中正常组予正常饲料喂养,模型组、中药组予高脂致石饲料喂养,喂养8周后分别从各组中随机抽取5只豚鼠,肉眼观察下结石形成超过4只,则判断为模型建立成功。造模成功后中药组予大黄灵仙方灌胃,模型组予等体积生理盐水灌胃,连续灌胃给药8周后取豚鼠胆囊组织,HE染色观察观察胆囊组织的病理学改变,Western blot测定胆囊组织中TNFα的表达水平,免疫组化测定胆囊平滑肌组织中scf、c-kit的蛋白表达水平。符合正态分布的计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD多重比较法。结果 HE染色显示模型组胆囊组织炎症明显,中药组胆囊组织内炎症程度较模型组明显减轻。Western blot结果表明在模型组中,胆囊组织中TNFα的表达水平最高,中药组次之,正常组最低(P值均<0.05);免疫组化结果表明豚鼠胆囊平滑肌组织中scf、c-kit蛋白在正常组、中药组中的表达水平显著高于模型组(P值均<0.05)。结论 大黄灵仙方能增强胆囊动力功能,其作用机制可能与上调胆囊Cajal间质细胞中的scf、c-kit信号通路有关。

大黄灵仙方对腹腔镜胆总管切开取石疗效的影响

目的:探讨大黄灵仙方对腹腔镜下胆总管切开取石术疗效的影响。方法:将67例胆总管结石患者随机分为治疗组34例和对照组33例。两组患者均行腹腔镜下胆总管切开取石术,术后除常规治疗外,治疗组加服大黄灵仙方汤剂。观察两组患者T管胆汁引流量、术后禁食与肛门排气时间及并发症发生情况;比较两组患者排石率、总有效率及术后复发率。结果 :总有效率治疗组为97.05%(33/34),高于对照组的81.82%(27/33)(P=0.041);术后第4天治疗组患者T管引流量为(374.20±90.80)mL,多于对照组的(326.86±68.40)mL(P=0.019);排石率治疗组为80.00%(8/10),高于对照组的33.33%(3/9)(P=0.04);复发率治疗组为3.13%(1/32),低于对照组的22.22%(6/27)(P=0.024);谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转移酶治疗组分别为(55.20±18.63)U/L、(51.32±15.12)U/L、(23.34±9.73)μmol/L、(103.87±40.84)U/L、(56.82±19.38)U/L,分别低于对照组的(67.89±20.65)U/L(P=0.010)、(60.72±17.8)U/L(P=0.023)、(28.66±10.50)μmol/L(P=0.035)、(129.22±49.23)U/L(P=0.025)、(63.13±21.47)U/L(P=0.211);术后肛门排气时间、禁食时间及住院时间治疗组均短于对照组(P<0.05);并发症发生率两组比较差异无统计学意义(P=0.261)。结论:大黄灵仙方具有促进腹腔镜下胆总管切开取石术患者胆汁排泄、减轻胆管炎症水肿、减少胆道感染几率、改善肝细胞代谢、促进胃肠功能恢复、防治结石复发等作用。

大黄灵仙胶囊降低胆石症术后残石率及复发率疗效观察

目的:观察大黄灵仙胶囊降低胆石症术后残石率及复发率的临床疗效。方法:对136例胆石症手术患者临床治疗和追踪观察1年,患者现代医学处理原则一致,治疗组68例在围手术期及手术后3月口服大黄灵仙胶囊,对照组68例不服中药。结果:治疗组痊愈48例,显效12例,好转7例,无效1例,总有效率98.5％;对照组痊愈36例,显效20例,好转5例,无效7例,总有效率89.7％。2组疗效比较,差异有显著性意义（P<0.05）,治疗组优于对照组。1年内残留结石或结石复发率分别为治疗组29.4％（20/68）和对照组47.1％（32/68）,2组差异有显著性意义（P<0.05）,治疗组术后残留结石或结石复发率明显低于对照组。结论:大黄灵仙胶囊可降低胆石症术后残石率及复发率,提高胆石症手术疗效。

兔胆石症的代谢组学特征及大黄灵仙胶囊的干预作用

目的研究胆囊结石实验兔血浆代谢组学特征,并探讨大黄灵仙胶囊的干预作用。方法将新西兰大白兔60只随机分为正常对照组、药物对照组、模型组和大黄灵仙胶囊组,每组15只,分别给予普通饲料、普通饲料+大黄灵仙胶囊、致石饲料、致石饲料+大黄灵仙胶囊喂养,疗程均8周。磁共振氢谱技术分析血浆代谢组学特征。结果与正常对照组比较,模型组100%存在胆囊结石(P<0.01),血浆乳酸、谷氨酰胺和苹果酸水平明显增高,甘氨酸降低,伴有肝肾功能损害;与模型组比较,大黄灵仙胶囊组胆囊结石形成率低(P<0.01),血浆谷氨酰胺和苹果酸水平明显下降,甘氨酸水平则增高,肝肾功能显著改善。结论实验兔胆囊结石代谢组学特征是血浆乳酸、谷氨酰胺和苹果酸水平明显增高,甘氨酸水平降低。大黄灵仙胶囊能抑制谷氨酰胺和苹果酸水平,提高甘氨酸水平,表明大黄灵仙胶囊对胆囊结石具有防治作用。

大黄灵仙胶囊对小鼠胆结石形成及肝病理和血液生化指标的影响

目的中药复方大黄灵仙胶囊方对防治胆结石具有明显疗效。文中构建C57BL/6小鼠胆石病模型,观察大黄灵仙胶囊对C57BL/6小鼠胆结石形成、肝病理和血液生化指标水平的影响。方法将32只SPF级C57BL/6雄性小鼠随机数字表法分为4组：正常对照组、模型组、熊去氧胆酸组和大黄灵仙胶囊组,每组8只。除正常对照组外,均给予致石饲料喂养（高脂、高胆固醇）8周,期间大黄灵仙胶囊组和熊去氧胆酸组分别给予相应药物干预处理。8周后观察小鼠一般情况并采集标本,观察小鼠成石率、生化指标、肝病理变化等。结果小鼠经8周造模用药后,模型组小鼠成石率达100%,明显高于正常对照组（P〈0.01）,UDCA组、大黄灵仙胶囊组成石率42.85%、37.5%,均显著低于模型组（P〈0.05）;溴化钾压片光谱定性分析小鼠胆结石成分可在2939、1446、1382、1056/cm胆固醇特有红外吸收峰值,并经半定量分析其胆固醇成分约93%-96%;血清生化检测熊去氧胆酸组和大黄灵仙胶囊组血清低密度脂蛋白为（0.60±0.34）、（1.02±0.62）mmol/L,三酰甘油为（0.93±0.19）、（0.82±0.22）mmol/L,总胆固醇为（4.10±0.96）、（4.36±0.86）mmol/L,总胆红素为（1.97±0.34）、（1.30±0.43）mmol/L,谷草转氨酶为（121.77±35.41）、（150.60±64.17）mmol/L,谷丙转氨酶为（115.10±64.05）、（108.00±45.30）mmol/L指标均优于模型组（2.04±0.31）、（1.31±0.31）、（5.94±1.03）、（2.90±0.50）、（362.60±96.18）、（444.50±223.10）mmol/L,差异均有统计学意义（P〈0.05）;熊去氧胆酸组、大黄灵仙胶囊组小鼠肝病理学检查发现肝细胞脂肪变性、炎症、坏死等改善优于模型组,但较正常对照仍有轻微改变。结论大黄灵仙胶囊可降低小鼠胆结石模型成石率,并改善小鼠血清生化学和肝组织形态学改变,从而达到防治胆结石的功效。

大黄灵仙颗粒调控IL-6、EGR-1表达治疗胆石症的实验研究

目的:明确大黄灵仙颗粒对慢性肝损伤胆石病兔模型的疗效,研究中药复方对关键致石因素IL-6、EGR-1表达的调控作用。方法:(1)将50只雄性新西兰大白兔随机分为3组:正常对照组、肝纤维化胆石病组、肝硬化胆石病组,其中正常对照组10只,其余两组各20只,在金博的慢性肝损伤兔模型构建方法的基础上,同时予高热量、高胆固醇致石饲料,建立慢性肝损伤胆石病兔模型。(2)造模12周后,病理明确诊断肝损伤形成后,将各组剩余实验兔分别分为对照组、治疗组,其中治疗组每天灌胃中药制剂大黄灵仙颗粒0.4 g/(kg·d),其余各组灌胃等量生理盐水,各组大白兔均正常饲料饲养。用药第13周,麻醉后取肝脏组织,分别使用实时荧光定量PCR、免疫组化等方法进行检测。结果:(1)常规病理:与对照组相比,用药各组光镜下可见遭到破坏的肝小叶逐渐修复,部分肝细胞形态恢复正常,炎性细胞及纤维组织减少,区域呈点状、片状坏死明显减少;(2)免疫组化:与对照组相比,喂食大黄灵仙颗粒剂的各组肝窦、汇管区的肝细胞胞浆或胞膜上棕褐色颗粒沉积表达明显减少,小胆管胆汁淤积减少,说明用药后肝损伤得到改善;(3)q PCR检测结果:与对照各组相比,用药各组的IL-6、EGR-1 mRNA的表达量均有不同程度降低(P<0.05),说明该药可有效减轻肝损伤。结论:本研究结果表明大黄灵仙颗粒对慢性肝损伤性胆石病动物模型具有较明显的改善和防治作用。

大黄灵仙胶囊对慢性肝损伤后胆结石形成的干预作用研究

目的探讨大黄灵仙胶囊对慢性肝损伤家兔胆结石形成的干预作用及其作用机制。方法将46只家兔随机分为正常组、慢性肝损伤组、肝硬化组、大黄灵仙胶囊大剂量组、大黄灵仙胶囊小剂量组。采用皮下注射CC l4方法进行慢性肝损伤造模,各组同时进行不同处理。最后观察各组胆囊成石率,肝脏功能生化指标,肝组织病理改变、超微结构改变,胆汁成分改变。结果①慢性肝损伤组、肝硬化组胆石形成阳性检出率较正常对照组显著增加(P<0.05或P<0.01)。大黄灵仙胶囊大剂量组、大黄灵仙胶囊小剂量组胆石阳性检出率较肝硬化组有显著降低(P<0.01或P<0.05)。②各模型组中肝脏超微结构均发生不同程度异常改变,大黄灵仙胶囊大、小剂量治疗组肝脏病理改变、肝细胞超微结构改变较模型组比较均有改善,大剂量组尤为明显。③大黄灵仙胶囊大、小剂量组血清AST,ALT,γ-GT,非结合胆红素均明显低于肝硬化组(P<0.05或P<0.01);总胆红素、间接胆红素、钙离子大黄灵仙胶囊大、小剂量组较肝硬化组明显降低(P<0.01),大剂量组较小剂量组明显降低(P<0.01)。结论大黄灵仙胶囊对慢性肝损伤后胆结石形成具有明显的预防效果,其作用机制主要与抑制CC l4所致肝脏损伤的作用有关,同时与大黄灵仙胶囊在多层次、多途径调节参与结石形成各因素关系密切。

“大黄灵仙汤”治疗胆石症29例临床观察

目的:观察自拟中药大黄灵仙汤对胆石症的临床疗效及安全性。方法:对60例胆石症患者临床治疗和观察9个月,其中受试组29例给予自拟中药大黄灵仙汤加减治疗,对照组31例给予消炎利胆片治疗。结果:受试组总有效率93.1%,对照组总有效率58.1%,2组有显著性差异。受试组肝胆气郁型与肝胆湿热型患者有效率分别为85.7%、88.9%,显著优于肝阴不足型(77.0%);对照组各证型有效率之间未显示出显著性差异。结论:大黄灵仙汤治疗胆石症具有较好疗效。

基于miRNA芯片技术探索大黄灵仙胶囊对炎性胆管细胞的多维调控

【目的】探讨大黄灵仙胶囊(DLXC)对炎性胆管细胞miRNAs表达的影响。【方法】取处于对数生长期,生长状态良好的大鼠肝内胆管内皮细胞,以脂多糖(LPS,5μg/m L)处理构建炎性状态的胆管细胞模型,应用DLXC(1 mg/m L)进行干预,共培养72 h后收集胆管细胞总RNA,进行miRNA芯片检测及生物信息学分析。【结果】DLXC可调控炎性胆管细胞内30个miRNAs的表达,影响胆管细胞信号转导、有机化合物反应及缺氧应激等生物学过程,细胞质、内质网及膜筏等细胞组份,信号转导活性、转录调控区的DNA结合及电压门控钾通道活性等分子生物功能;影响低氧诱导因子-1(HIF-1)信号通路、环磷酸鸟苷酸—丝氨酸(c GMP-PKG)信号通路、肿瘤坏死因子α(TNF-α)信号通路、趋化因子信号转导通路、凋亡信号通路、磷酸酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt信号通路及Toll-like受体信号通路。【结论】以miRNAs为靶点可实现DLXC对炎性胆管细胞的多维调控。

大黄灵仙胶囊对慢性肝脏损伤并胆管狭窄模型兔肝细胞线粒体的影响

目的探讨大黄灵仙胶囊治疗肝内胆管结石的疗效作用,尝试从保护线粒体角度阐述其调肝治胆的疗效机制。方法复制慢性肝脏损伤并胆管狭窄模型兔,分为正常对照组、模型对照组、大黄灵仙组、消炎利胆组,每组20只。造模及治疗观察时间总共6周,6周后处死观察胆管成石情况,运用透射电镜观察肝线粒体变化,分光光度仪检测线粒体肿胀度,倒置荧光显微镜观察线粒体膜电位变化,Western blot检测线粒体Bcl-2蛋白表达。结果大黄灵仙胶囊能降低白兔胆道成石率,与模型对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),并在保护肝线粒体及稳定线粒体膜电位方面疗效优于消炎利胆片,同时能提高肝线粒体Bcl-2蛋白表达,与模型对照组及消炎利胆组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论大黄灵仙胶囊能通过调控线粒体Bcl-2蛋白表达、维持线粒体膜电位稳定,调控线粒体PT孔开放,缓解线粒体肿胀程度,从而保护肝细胞线粒体,发挥调肝治石的效应机制。

高效液相色谱法同时测定大黄灵脾颗粒中丹酚酸B和淫羊藿苷的含量

目的：建立高效液相色谱法（HPLC）用于同时测定大黄灵脾颗粒中丹酚酸 B 和淫羊藿苷的含量。方法色谱柱为 Agi-lent Zorbax SB C18（4．6 mm ×250 mm，5μm），流动相为乙腈－1．7％磷酸溶液（23∶77）等度洗脱，流速1．0 mL·min －1，柱温25℃，检测波长275 nm。结果丹酚酸 B 和淫羊藿苷分别在0．1044～6．892μg 和0．0791～2．966μg 范围内线性良好，平均加样回收率分别为102．7％和98．89％。结论建立的方法专属性强、重复性好、结果准确可靠，可用于大黄灵脾颗粒的质量控制和评价方法。

大黄灵脾汤治疗慢性肾功能不全的实验研究

用张氏大黄灵脾汤治疗Ｔａｋａｋｏ－郑氏提供的大鼠肾功能不全模型，可使血肌酐、尿素氮较对照组明显下降（Ｐ＜０．００１），高血磷、低血钙得以明显纠正（Ｐ＜０．００１），肾脏外表由灰白色变为灰红色，生命得以延长。提示该方是治疗慢性肾功能不全的有效方剂。

大黄灵仙胶囊预防保胆取石术后结石复发的基础与临床研究

目的通过临床研究观察验证大黄灵仙胶囊降低保胆取石术后复发率的影响作用,探讨大黄灵仙胶囊预防胆结石复发的作用机制。方法建立胆石症豚鼠模型,模拟结石形成过程,给豚鼠喂养脂餐,比较各组胆囊结石形成率,病理切片观察胆囊炎症情况,利用免疫组化检测各组豚鼠肝组织中胆固醇7a-羟化酶(CYP7A)表达的情况。将接受保胆取石手术患者分组,定期随访术后情况,B超检测胆囊壁厚度、有无胆囊结石复发及胆泥形成情况、临床症状改善情况。结果服用大黄灵仙胶囊组豚鼠成石率12.50%,明显低于对照组55.00%,解剖发现服用大黄灵仙胶囊组豚鼠的胆囊黏膜炎症明显轻于未服药物组。检测发现,大黄灵仙胶囊组肝组织中CYP7A阳性表达率为(67.5±5.87)%,高于未服药物组(31.8±4.59)%。大黄灵仙胶囊组的保胆取石术后患者随访1年后,结石复发率明显低于未服药组,症状及胆囊炎症改善情况明显优于未服药组。结论大黄灵仙胶囊具有较好的预防结石形成作用,其主要机制可能为抑制胆囊黏膜炎症及上调肝组织中CYP7A;同时在临床实验中,B超的随访提示胆囊收缩功能较术前有所改善,二者表明,保胆取石术后病人中,大黄灵仙胶囊可能有提高胆石症手术的疗效,降低胆石症术后残石率及复发率的作用。

大黄灵仙胶囊调控兔胆石症模型肝功能及超微病理的作用机制研究

目的探讨大黄灵仙胶囊对兔胆石症模型的肝肾功能干预调节作用及超微病理结构改变。方法将新西兰大白兔80只随机分为正常对照组、药物对照组、模型组及治疗组,每组20只。正常对照组予常规饲料饲养,模型组和治疗组予致石饲料饲养;药物对照组和治疗组予大黄灵仙胶囊640 mg/kg溶水灌胃,1次/d,持续8周。采静脉血行生化检测,采肝组织行病理及电镜观察肝组织病理结构改变。结果与正常对照组比较,模型组肝功能指标均明显升高;与模型组相比,治疗组的肝功能指标明显下降(P<0.01)。肝脏病理显示,正常对照组未见明显变化;模型组肝组织纤维化明显增多,间隙变窄,部分呈脂肪样变或者坏死;治疗组肝组织纤维化不明显,只有轻微样改变。超微病理显示,模型组肝细胞核不规则,部分细胞核出现核固缩、凋亡,内质网扩张、增生,粗面内质网可见脱颗粒现象,线粒体嵴融合并伴有空泡水肿,成纤维细胞成梭形伴有脂滴,胞浆溶解;治疗组细胞核较圆,与正常对照组相比,核周隙增宽,核胞浆中见脂滴少甚至没有,线粒体仍有空泡,细胞质中细胞器丰富。结论大黄灵仙胶囊可减轻胆石症所导致的肝脏纤维化、肝功能损伤,修复受损肝细胞,维持肝细胞结构稳定。

大黄灵脾汤减轻慢性肾功能不全所致听力障碍的实验研究

采用５／６肾切除制备大鼠慢性肾功能不全模型，用大黄灵脾汤进行实行治疗。结果表明：模型治疗组大鼠脑干听觉诱发电位阈提高值明显抵于模型对照组（Ｐ＜０．０１），与正常对照组差异不显著（Ｐ＞０．０５）；模型治疗组大鼠血尿素氮、肌酐低于模型对照组，而血清铁蛋白、血清钙以及血醛固酮高于模型对照组，均有显著差异（Ｐ＜０．０５）。研究结果提出，慢性肾功能不全导致不同程度的听力障碍，而大黄灵脾汤能改善肾功能，对抗慢性肾功能不全对听觉功能的损害，可能通过调整铁、钙和醛固酮的代谢，保护了慢性肾功能不全时肾司听力之功能。

核因子κB在5/6肾切除大鼠早期肾脏的表达水平及大黄灵脾颗粒的调节作用

目的:观察核因子κB在5/6肾切除大鼠的早期肾脏表达水平及大黄灵脾颗粒的调节作用。方法:将SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、治疗组(大黄灵脾颗粒组)、对照组(福辛普利组)。建立慢性肾衰竭动物模型(5/6肾切除),并予相应的药物干预,于第0、1、2、3、4、6、8周动态检测对各组大鼠蛋白尿、肾功能,应用免疫组化方法检测肾脏AT1、NF-κB的表达水平。结果:总体上对照组比治疗组对肾脏的保护作用更有优势,但治疗组治疗后蛋白尿明显下降,肾功能恶化减慢,肾小球肥大减轻;免疫组化结果表明,治疗组能有效降低肾衰大鼠肾组织NF-κB的表达。结论:大黄灵脾颗粒能够延缓慢性肾衰的进展,具有多靶点的肾保护作用,其机制可能与抑制Ang-ATs-NF-κB途径有关。