以黄独乙素和儿茶素为指标成分研究黄药子-当归配伍组合

采用HPLC-UV法研究不同比例黄药子-当归配伍组合中黄独乙素及儿茶素的质量分数.采用95％乙醇对黄药子-当归配伍组合进行提取,经乙酸乙酯萃取后,测定黄药子及各配伍组合中黄独乙素及儿茶素质量分数.结果表明黄独乙素和儿茶素分别在10～200μg/mL及200～1 200μg/mL范围内呈良好线性关系,平均回收率分别为89.4％及92.8％.黄药子单煎液中黄独乙素质量分数2.90 mg/g,儿茶素质量分数为0.78 mg/g,黄药子-当归以1∶1,1∶2,2∶1配伍时,各组中黄独乙素质量分数分别为1.01,2.19,2.04 mg/g,表明黄药子与当归以1∶1比例配伍后,致肝毒性成分黄独乙素质量分数最低.各组中儿茶素质量分数分别为0.35,0.30,0.43 mg/g,即1∶2的配伍比例中儿茶素质量分数最低.结果表明当归的药味比例显著影响黄药子中主要成分的质量分数,这些质量分数变化或与当归与黄药子配伍后药效增强、毒性降低有关.

HPLC法测定黄药子中黄独乙素的含量

目的建立测定中药黄药子中黄独乙素含量的高效液相色谱方法。方法甲醇提取药材,氯仿萃取,高效液相色谱法测定,采用Symmetry C18(150 mm×3.9mm,5μm),以甲醇-水-磷酸(40∶60∶0.08)为流动相,流速0.8ml.min-1,检测波长为215nm。结果黄独乙素溶液在4.92～396.00mg.L-1时与其吸收值呈良好线性关系(r=0.9998),平均加样回收率99.80%,RSD=0.57%。结论本方法操作简便、快捷,结果准确、可靠,适用于黄药子中黄独乙素的含量测定。

黄药子配伍甘草分煎液与合煎液中黄独乙素含量的比较

目的:比较黄药子配伍甘草前后毒性成分黄独乙素含量的变化。方法:采用PLATISILTM-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%冰乙酸(40:60)为流动相,检测波长为210nm,柱温为25℃。结果:黄独乙素在37.5μg.mL-1～310.0μg.mL-1呈良好的线性,r=0.9999。黄独乙素含量:黄药子单煎液>分煎液>合煎液。结论:黄药子配伍甘草后其毒性成分黄独乙素含量有所下降,可能是其配伍减毒的原因之一。

不同产地黄药子中黄独乙素的含量测定

目的 建立高效液相色谱（HPLC）法测定不同产地黄药子中黄独乙素的含量并比较其差异。方法 药材粉末用纯净水直接煎二次,合并水煎液,采用Kromasil-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,以乙腈∶水∶醋酸=34∶66∶0.1为流动相,流速为1.0 m L·min-1,检测波长210 nm,柱温35℃。结果 黄独乙素在26.0~130.0μg·m L-1范围内线性关系良好（r=0.999 9）,不同产地黄药子中黄独乙素平均含量：河北〉广西〉江苏〉四川〉浙江。结论 该方法操作简便、快捷,结果准确、可靠,适用于不同产地黄药子中黄独乙素的含量测定。

黄独乙素抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖作用

目的研究黄独乙素(Diosbulbin B)对人胃癌SGC-7901细胞增殖的体外抑制作用。方法 MTT法测定黄独乙素对SGC-7901细胞增殖的影响。结果 10、20、40、80μmol/L的黄独乙素作用24 h后对SGC-7901细胞增殖抑制率分别为12.48%、30.10%、43.02%和51.41%,半数抑制浓度(IC50)为(64.09±1.81)μmol/L。结论黄独乙素在体外对人胃癌SGC-7901细胞增殖有明显的、呈剂量依赖性的抑制作用。

黄独乙素对人胃癌SGC-7901细胞及其耐药细胞株体外抑制作用的研究

目的研究黄独乙素(Diosbulbin B)对人胃癌SGC-7901细胞与其耐药细胞株的体外抑制作用。方法采用药物浓度递增法诱导人胃癌SGC-7901细胞,分别建立其顺铂、5-FU、阿霉素的耐药细胞株,应用MTT法检测黄独乙素对SGC-7901、SGC-7901/顺铂、SGC-7901/5-FU及SGC-7901/阿霉素的增殖抑制率,比较黄独乙素对以上四种细胞株的增殖抑制率是否有差异。结果黄独乙素对人胃癌SGC-7901细胞及其顺铂、5-FU、阿霉素耐药细胞株均表现出一定程度的剂量依赖性的增殖抑制作用(P<0.05),加入黄独乙素后人胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制率与其顺铂、5-FU、阿霉素耐药细胞株的增殖抑制率近似(P>0.05)。结论黄独乙素对人胃癌SGC-7901细胞株表现出较低的交叉耐药性,能够在该细胞对顺铂、5-FU、阿霉素产生耐药后同样发挥增殖抑制作用。

黄独乙素对胃癌细胞株SGC-7901增殖的影响及其机制

目的研究黄独乙素对人胃癌细胞SGC-7901增殖的影响及相关的作用机制。方法用RPMI-1640培养液对SGC-7901细胞进行传代培养,用不同浓度（0~160μg/m L）黄独乙素分别对SGC-7901细胞进行处理,应用CCK-8法检测细胞的增殖率;光学显微镜观察细胞形态学改变;Western blot检测细胞周期蛋白Cyclin D1表达的变化。结果黄独乙素以计量依赖方法抑制胃癌细胞生长,抑制率最高达57.26%;细胞形态发生明显改变;Cyclin D1蛋白水平表达显著下调。结论黄独乙素能显著抑制SGC-7901细胞的增殖,其机制可能与下调细胞周期蛋白Cyclin D1的表达有关。

黄药子中黄独乙素提取工艺研究

目的优化黄药子中黄独乙素的提取工艺。方法采用高效液相色谱法测定黄独乙素的含量。以黄独乙素的得率为评价指标,通过单因素试验初步确定最佳料液比、乙醇浓度、提取时间和超声提取次数。采用响应面试验设计进行提取工艺的优化。结果最佳提取工艺条件为:提取次数为3次,提取时间5 h,料液比(g/mL)为1∶65,优化得到的黄独乙素得率为0.377%。结论本方法工艺简单、快速、重现性好,可作为黄药子中黄独乙素的提取应用。

基于CYP450酶的补骨脂素及异补骨脂素与黄独乙素的药物相互作用研究

目的基于细胞色素P450(CYP450)代谢酶探究补骨脂素和异补骨脂素对黄独乙素在大鼠体内代谢的影响。方法采用大鼠离体循环肝灌流方法,考察大鼠分别给予补骨脂素或异补骨脂素1、3、7 d后,黄独乙素在肝脏中的代谢情况;利用UPLC-MS/MS检测循环灌流液中剩余黄独乙素的含量;通过大鼠眼内眦取血的方法研究大鼠分别给予补骨脂素或异补骨脂素干预1周,再给予黄药子提取物(10 g·kg^(−1))后体内黄独乙素的药动学变化,药动学参数采用DAS 2.0软件中的非房室模型法进行计算。结果大鼠给予补骨脂素或异补骨脂素后,循环灌流液中黄独乙素的含量相对增加,且补骨脂素或异补骨脂素给药时间延长后,对酶的抑制程度更强;当大鼠给予补骨脂素或异补骨脂素干预后,与非干预组(黄药子提取物组)相比,药时曲线下面积(AUC_(0~t))和平均驻留时间(MRT_(0~t))增加,消除半衰期(t_(1/2Z))减小。结论补骨脂素/异补骨脂素可通过抑制肝脏中CYP450酶的活性降低其对黄独乙素的代谢,使黄独乙素在肝脏中代谢减少,造成蓄积,临床用药应注意含有补骨脂素/异补骨脂素或黄独乙素中药在合用时可能产生的药物相互作用。

黄药子体外抗胃癌活性成分的筛选及分析

目的通过MTT体外实验观察黄药子4种不同提取物及从石油醚提取物中分离得到的黄独乙素和β-扶桑甾醇作用于MGC803、BGC823和SGC7901 3种人胃癌细胞株,探讨黄药子不同提取物及两个单体对3种胃癌细胞株的增殖情况的影响,从而筛选出黄药子有效抗胃癌活性成分。方法采用MTT法检测0.5、1、2、4、6、8、10、12 mg/mL的不同质量浓度的黄药子石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、水层萃取物、醇提物和最终质量浓度为1×10-4、5×10-4、1×10-3、5×10-3、1×10-2、5×10-2、1×10-1、5×10-1mg/mL的黄独乙素和β-扶桑甾醇分别作用于MGC803、BGC823和SGC 7901细胞株24 h后对细胞增殖的影响。结果石油醚萃取物、醇提物、黄独乙素和β-扶桑甾醇均有不同程度的抑制肿瘤细胞生长的作用,而乙酸乙酯萃取物和水萃取物低剂量有不同程度的促进肿瘤细胞生长的作用;大剂量表现为抑制肿瘤细胞生长的作用。结论从石油醚提取物中分离得到的黄独乙素和β-扶桑甾醇对胃癌细胞均有抑制作用。

HPLC法测定红卫蛇药片中4种成分的含量

目的：建立测定红卫蛇药片中薯蓣皂苷元、黄独乙素、鬼臼毒素和山柰素含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Hypersil C18,流速为1.0 ml/min;薯蓣皂苷元和黄独乙素的流动相为乙腈-水-磷酸（67∶33∶0.5,V/V/V）,检测波长为305 nm;鬼臼毒素和山柰素的流动相为甲醇-乙腈-0.1 mol/L磷酸二氢钾水溶液（55∶40∶5,V/V/V）,检测波长为360 nm。结果：薯蓣皂苷元和黄独乙素的进样量分别在0.109 4~2.188 0、0.328 6~6.572 0μg范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系（r=0.999 5、0.999 2）;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均〈1%;平均加样回收率分别为98.01%、97.14%,RSD分别为1.01%、0.79%（n=6）。鬼臼毒素和山柰素的进样量分别在0.159 8~3.196 0、0.033 4~0.668 0μg范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系（r=0.999 3、0.999 7）;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均〈1%;平均加样回收率分别为98.04%、96.87%,RSD分别为1.59%、1.19%（n=6）。结论：该方法操作简便、灵敏度高、重复性好,结果准确、可靠,可用于红卫蛇药片的质量控制。