改良酶免疫斑点法检测黄疸出血群钩端螺旋体抗体

目的 改良检测黄疸出血群钩端螺旋体 (IcteroheamorrhagiaeSerogroup)抗体的酶免疫斑点 (Dot—Im muoblot)试验方法并作初步应用。方法 抗原片经封闭后冻存 ,取代在检测前封闭的步骤 ,继而按常规加样、洗涤、加辣根过氧化物酶标记羊抗人IgG及底物。应用此方法共检测 176例临床疑似钩端螺旋体病 (Ieptospirosis)患者。结果 176例中黄疸出血群钩端螺旋体抗体阳性共有 71例 ,阳性率为 40 %。结论 改进的方法简便、有效 。

黄疸出血群赖型017株钩端螺旋体外膜单克隆抗体免疫保护作用的探讨

作者采用黄疸出血群赖型017株钩端螺旋体(钩体)外膜免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合等技术,获得单克隆抗体E4B7D5。亚类鉴定为IgG_1,凝集效价为1:25 600。被动免疫保护试验证明:将单克隆抗体E4B7D5腹水稀释100倍,给实验组豚鼠每只每天腹腔注射1ml,连续6天,能使豚鼠在接受同型017株钩体2ml(每毫升1×10~3条)的攻击后,存活率达80％,且存活20天的豚鼠处死解剖,未见任何病变;3个对照组的存活率分别为10％,20％和10％,该三组仅有4只存活20天,经处死解剖,其中 3只发现较多的陈旧性肺出血。作者认为,单克隆抗体E4B7D5对同型017株钩体有免疫保护作用。

多位点序列分型应用于致病性黄疸出血群钩端螺旋体分析

目的初步探讨MLST(multilocus sequence typing)分型技术在致病性钩端螺旋体中的应用。方法对我国3个省份的39株致病性钩端螺旋体黄疸出血群菌株提取DNA,采用7个位点进行PCR扩增、序列测定,应用eBURST和BioNumerics(Version5.10)软件进行分析。结果 39株菌株呈现5个ST型别,ST1为中国三省份中主要的基因型,占53.85%(21/39)。eBURST分析显示:39株菌株分为2个Clonal complexes和1个singleton,其中Group1占66.67%(26/39),Group2占20.51%(8/39),一个singleton占12.82%(5/39);BioNumerics软件聚类分析显示:39株菌株分为3个Group,与eBURST分析中的分群结构一致。MLST基因型别具有明显的地域性特征。结论 MLST方法可初步应用于致病性钩端螺旋体分子流行病学、种群结构、亲缘进化关系等研究。

犬钩端螺旋体黄疸出血群LipL32在大肠杆菌中的高效表达

本试验收集了临床发生黄疸病犬的尿液,提取基因组DNA,经16s rRNA基因PCR鉴定,表明该犬存在钩体黄疸出血群毒株感染。以该基因组DNA为模板,扩增获得lipL32基因,并对该基因进行了原核表达,结果显示该抗原在大肠杆菌中获得高效可溶性表达。该蛋白的成功制备为犬钩体的诊断及新型亚单位疫苗的研制提供了广谱候选抗原。

钩端螺旋体黄疸出血群赖株LipL41基因的克隆表达及鉴定

目的 对钩体黄疸出血群赖株LipL4 1基因进行克隆、表达及鉴定。方法 采用高保真PCR ,从我国钩体黄疸出血群赖株基因组中扩增全长LipL4 1基因片段 ,并构建原核表达系统。结果 所克隆的LipL4 1基因核苷酸和氨基酸序列与已发表LipL4 1基因序列 (GenbankL4 6 794 )同源性分别为 96 2 5 %和 98 87% ;所表达的目的蛋白经Westernblot证实为具有良好免疫反应性的广谱抗原。

上海地区犬钩端螺旋体病流行病学调查

为了调查上海地区犬钩端螺旋体病流行情况,采用显微镜凝集试验(MAT)判断犬血清抗体对应的钩端螺旋体血清型的方法,对上海地区采集到的276份犬血清样品进行钩端螺旋体流行病学调查与分析。血清学试验结果显示,阳性率为11.96%(33/276),上海地区主要流行的钩端螺旋体血清型是黄疸出血赖型、犬型、拜伦型、秋季型、澳洲型和巴叶赞型。钩端螺旋体病是由钩端螺旋体属的不同血清型致病性钩体引起的一种常见的人兽共患传染病。钩端螺旋体病存在于世界各地诸多国家,钩端螺旋体病对我国的侵害也很严重。人类和动物在感染了致病性钩端螺旋体后会表现出不同的临床症状,例如,易被忽视的流感症状,较为严重的黄疸、肺出血,甚至是多器官衰竭和死亡。

江油地区首次发现黄疸出血群赖型钩端螺旋体

本文报告了四川省江油市１９９５年９月，钩端螺旋体病（以下简称钩体病）暴发流行期间，首次从３３例病人血液标本检出钩体７株，阳性率为２１．２１％，分属二个血清群三个血清型、黄疸出血群黄疸出血型５株，赖型１株，七日热群棉兰型１株。培养鼠肾２２５份，检出钩体３１株（待定１株，失传１株），阳性率为１３．７８％，以黄疸出血群赖型为主要血清型，病原体带菌宿主以黑线姬鼠为主，为我市稻田型钩体病的主要传染源，携带钩体与本次钩体病暴发流行人间主要流行菌群和型一致。

重组外膜脂蛋白LipL32与致病性钩端螺旋体抗体的免疫反应性及与不同血清群交叉反应性的Western blotting评价

目的研究钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL32与致病性钩体抗体的免疫反应性以及与不同钩体血清群之间的交叉反应性,为钩体病的血清学检测提供抗原。方法依据黄疸出血群赖型56601株外膜脂蛋白LipL32基因序列设计引物,扩增出该基因片段DNA,将其克隆至表达载体pET-28a中。将构建好的重组质粒转化大肠埃希菌BL21并诱导表达,表达的重组蛋白纯化后采用Western blotting评价其与56601株及其他14个血清群致病性钩端螺旋体抗体的免疫反应性和交叉反应能力。结果扩增获得了56601株脂蛋白LipL32基因,成功构建了原核表达重组质粒pET28a-LipL32。重组蛋白rLipL32为包涵体表达,且与56601株及另外14个血清群的致病性钩端螺旋体的兔抗体发生了特异性免疫反应。结论原核表达重组外膜脂蛋白rLipL32在致病性钩体血清群之间有良好的交叉反应能力,可初步作为属范围内的钩端螺旋体抗体检测候选抗原。

蓝狐出血性黄疸钩端螺旋体病的诊治

山东省东营市积利商贸公司良种狐场蓝狐突发以短期发热后出现出血性黄疸、血尿、贫血、出血，迅速消瘦衰竭而死亡的疾病．经垦利县兽医站专家临床检查，病狐剖检及实验室诊断，确诊为蓝狐出血性黄疸钩端螺旋体病。

乌拉特前旗牧区人群钩端螺旋体抗体调查

乌拉特前旗牧区人群钩端螺旋体抗体调查特孟，金焱，刘清淮钩端螺旋体病（Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒｏｓｉｓ）是一种常见的人兽共患病。内蒙古呼盟曾从犊牛中分离出一株钩端螺旋体。１９６５年又在哲盟从患者、野鼠、井水、河水及冰下河水中分离到钩端螺旋体；１９７５年包头市...

正常人群钩端螺旋体抗体水平及菌苗免疫血清学效果观察

萧山市地处钱塘江下游。

肺大出血型钩端螺旋体病的护理体会

钩端螺旋体病是一种由多种致病性钩端螺旋体引起的急性传染病。临床分为：流感伤寒型、黄疸出血型、肺大出血型、脑膜炎型、肾功衰竭型。其中以肺大出血型的死亡率为最高，因此临床观察、抢救及护理极为重要。

两株不同毒力株钩端螺旋体37℃培养条件表达谱的差异

目的钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株毒力株56601(中赖)与钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株减毒株(法赖)在遗传背景上具有很大的相似性,但毒力却差别很大。本研究利用钩端螺旋体的cDNA芯片在全基因组水平上研究毒力差别的机制。方法利用钩端螺旋体的cDNA芯片,在37℃培养条件下以钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株毒力株56601(中赖)为测试株,以钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株减毒株(法赖)为对照株,测试了芯片表达谱的变化。结果在37℃培养条件下,毒力株和减毒株的表达谱具有明显的差别。毒力株上调表达的基因有101个,下调表达的有71个。这些差异表达的基因在功能上可分为12类。结论这些差异表达的基因可能在钩端螺旋体毒力株致病力方面发挥一定的作用。

安徽怀远县1970～2003年钩端螺旋体病流行病学分析

目的了解怀远县乃至安徽省钩端螺旋体病(以下简称“钩体病”)其流行趋势,以制定科学有效的控制措施。方法根据怀远县1970-2003年疫情资料及检验结果进行汇总统计,并加以整理分析。结果怀远县1970-2003年平均发病率为1.79/10万,1970～2001年全县发生的钩体病以波摩那群为主,2002～2003年以黄疸出血群为主;流行形式上,以爆发为主,常伴有散发病例,爆发病例共549例,占总报告病例的88.12％;时间分布上,无明显周期性,除3次爆发出现明显的年度高峰外,其余年份病例数无明显差异,呈散发,以7～10月份发病为多,占报告病例总数的93.10％,去除爆发因素,则以1月份和7、8月份相对较多;男性明显高于女性,男女性别发病数之比为2.09∶1,以10～44岁发病数较高,形成较为明显的年龄高峰,75岁以上无发病;地区分布上,除爆发乡镇病例明显高于其它乡镇外,其余乡镇无明显差异,但从河流分布看,涡河以南明显高于涡河以北,若去除爆发因素,两者无明显改变。2003年的8～9月份钩体病现状调查显示,我县涡河以南钩体病感染率明显高于涡河以北(x^2=17.32,P<0.01)。结论我县钩体疫源地类型已由既往的经济疫源地向自然疫源地过渡,为混合型疫源地,流行形式已由洪水型向稻田型过渡,目前与稻田型一致,以黄疸出血群为主,黑线姬鼠为主要动物宿主,流行菌群发生变迁,并从血清学及病原学方面证实了“南黄北移”现象的存在。

诺氟沙星对钩端螺旋体菌敏感试验

目的 为探讨诺氟沙星抗菌药物对钩端螺旋体黄疸出血群赖型菌株抑制和杀菌的效果。 方法 采用不同浓度的药物 ,进行两种不同方式培养的钩体菌 ,在低倍或高倍镜下观察抑菌及杀菌情况。 结果 用两种不同方式培养钩体菌 ,药物浓度在 0 .0 32～ 0 .0 6 4 mg/ ml剂量下有抑制和杀菌的作用。 结论 在体外培养的钩体菌对诺氟沙星有较好抑杀效果 。

多价钩端螺旋体外膜菌苗Ⅱ期效果观察

多价钩端螺旋体外膜菌苗Ⅱ期效果观察江苏省卫生防疫站朱凤才，王志高溧水县卫生防疫站余录根，胡明生，胡金宝中国药品生物制品检定所秦进才，高吉元卫生部上海生物制品研究所张锦麟，谢广中钩端螺旋体（简称钩体）病是我国农村常见病、多发病之一。目前使用的钧体普通菌...