黄秋葵醇提物中2种成分对肝细胞糖异生及AMPKα磷酸化的影响

目的观察黄秋葵醇提物中槲皮素和异槲皮苷对肝细胞糖异生及磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6Pase)的影响,并探讨其机制。方法体外培养小鼠原代肝细胞,以乳酸和丙酮酸为糖异生底物。予不同浓度槲皮素、异槲皮苷干预24 h后,葡萄糖氧化酶法测定培养液上清葡萄糖浓度,RT-PCR法检测PEPCK、G6Pase、AMPKαmRNA表达,Western blot法检测总AMPKα、AMPKαThr172磷酸化水平。结果与空白组比较,糖异生诱导组上清葡萄糖浓度显著升高(P<0.01);槲皮素和异槲皮苷干预后,80μmol/L槲皮素组、异槲皮苷组显著低于糖异生诱导组(P<0.01);糖异生诱导组PEPCK、G6Pase AMPKαmRNA相对表达显著升高(P<0.01);80μmol/L槲皮素组、异槲皮苷组PEPCK、G6Pase表达显著低于糖异生诱导组(P<0.05)。Western blot显示,80μmol/L槲皮素组、异槲皮苷组AMPKαThr172磷酸化水平均较糖异生诱导组增加。结论黄秋葵醇提物中槲皮素和异槲皮苷呈剂量依赖性地抑制体外培养原代肝细胞糖异生及其关键酶基因转录,AMPKαThr172磷酸化可能与两者抑制糖异生机制有关。

黄秋葵醇提物对糖尿病小鼠胰腺组织氧化应激的影响

目的:探讨黄秋葵醇提物对链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠胰腺组织中氧化应激的影响。方法:给予昆明种小鼠尾静脉注射120 mg/kg链脲佐菌素,以空腹血糖(FBG)≥11.1 mmol/L视为糖尿病模型小鼠,随后将糖尿病小鼠随机分为模型组、二甲双胍组及黄秋葵醇提物低、中、高剂量(0.2 g/kg、0.4 g/kg、0.8 g/kg)组,并另取健康昆明种小鼠作为正常组。分组后的动物灌胃给予相应药物和生理盐水14 d。检测小鼠血清和胰腺组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性和丙二醛(MDA)含量;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测小鼠胰腺组织中氧化氢酶(CAT)、活性氧簇(ROS)的含量;苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠胰腺组织病理形态学变化。结果:与模型组比较,二甲双胍组和黄秋葵醇提物组FBG均有不同程度的下降(均P<0.05);黄秋葵醇提物组血清和胰腺组织中SOD和GSH-Px活性明显升高,MDA含量下降,胰腺组织中CAT活性升高,ROS含量下降(均P<0.05);胰腺HE染色结果显示,黄秋葵醇提物组胰腺组织病理变化明显改善。结论:黄秋葵醇提物具有降糖作用,可提高糖尿病小鼠血清和胰腺组织中SOD、GSH-Px、CAT抗氧化酶活性,降低MDA和ROS含量,从而缓解氧化应激对糖尿病小鼠胰腺组织的损伤作用。

黄秋葵醇提物对2型糖尿病小鼠胰岛素抵抗的影响

目的研究黄秋葵醇提物对2型糖尿病小鼠胰岛素抵抗的影响。方法昆明小鼠尾静脉注射链脲佐菌素(STZ) 60 mg/kg 6周后,检测小鼠的空腹血糖(FBG),小鼠以高脂饲料进行喂养。将FBG≥11. 1 mol/L的小鼠随机分为模型组,二甲双胍组(0. 7 g/kg),黄秋葵醇提物0. 2、0. 4、0. 8 g/kg组,每组10只。另设10只昆明小鼠为正常组,给予普通饲料喂养。灌胃给药14 d,每天1次。末次给药前禁食不禁水12 h,检测小鼠FBG;末次给药1 h后摘眼球法取血,分离血清。放射免疫测定法测定血清中空腹胰岛素(FNS)含量,并计算其胰岛素敏感指数(ISI);酶联免疫法测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6 (IL-6)、瘦素(Leptin)、脂联素(APN)、游离脂肪酸(FFA)的含量。蛋白免疫印记法检测肝脏组织中PPARα、PEPCK的蛋白表达水平。结果与模型组比较,黄秋葵醇提物治疗组的小鼠FBG均降低(P <0. 05),ISI、APN含量升高(P <0. 05);血清中TNF-α、IL-6、Leptin、FFA含量均降低(P <0. 05);肝脏组织中PPARα的表达增加,PEPCK的蛋白表达减少(P <0. 05)。结论黄秋葵醇提物对2型糖尿病小鼠具有降低血糖、改善胰岛素抵抗的作用,可能与通过调节PPARα、PEPCK蛋白的表达,影响血清中的炎症因子、FFA、Leptin、APN的表达有关。

黄秋葵醇提物对小鼠的抗肥胖作用及与基因SREBP-1、FAS的相关性

目的研究黄秋葵粗提物(HQK)对营养性肥胖小鼠的抗肥胖作用。方法将50只ICR雄性小鼠,随机分成5组:空白对照组、模型组、黄秋葵醇提物组(100、200、400 mg·kg^(-1)),除空白对照组,其他4组小鼠均采用高脂饲料喂养建立肥胖小鼠模型,灌胃给药4周后,眼球取血,脱颈处死,取肝脏组织、脂肪。检测各组小鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、瘦素(LEP)、脂联素(ADP)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)。取腹部脂肪经RT-PCR,观察小鼠体内肥胖基因SREBP-1、FAS mRNA表达变化。结果黄秋葵醇提物高剂量可以有效控制肥胖小鼠体重,有效抑制TC、TG、LDL-C、LEP和升高HDL-C、ADP(P<0.01,P<0.05),有效改善血脂紊乱等症状,调节脂肪组织分泌蛋白质,并可有效抑制SREBP-1和FAS mRNA基因表达,达到对肥胖小鼠的治疗作用。结论黄秋葵粗提物治疗小鼠肥胖与其抑制SREBP-1和FAS的表达有关。