黄芩苷-小檗碱复合物的形成规律

目的研究黄芩苷-小檗碱复合物的形成规律。方法在不同黄芩苷和小檗碱比例、加热方法、介质(pH、离子强度)的条件下,HPLC法测定共煎沉淀的产量和组成。结果当黄芩苷、小檗碱用量分别为0.5、1 g时,沉淀量最高。加热温度升高、pH近中性(6.8)、葡萄糖加入均有利于沉淀生成,而NaCl加入则恰好相反。结论黄芩苷-小檗碱复合物的产量和组成主要受加热温度、添加剂的影响。

黄芩苷-小檗碱复合物在不同介质中的稳定性初步研究

目的:考察黄芩苷-小檗碱复合物在不同介质中的稳定性,为其剂型的选择提供参考依据。方法:采用HPLC法分别测定黄芩苷-小檗碱复合物在不同pH介质、人工胃(或肠)液以及大鼠胃(或肠)内容物中37℃下孵育24h内的组分含量变化。结果:黄芩苷和小檗碱含量在pH=1.2的介质和人工胃液中较低且持续下降;在pH=6.8、7.4、8.0的介质中及人工肠液中的含量较高且浓度逐渐增大。结论:黄芩苷-小檗碱复合物在pH=1.2的介质和人工胃液中均不稳定,在pH=6.8、7.4、8.0的介质及人工肠液中稳定性较好,在剂型及处方设计时应予以重视。

黄芩苷-小檗碱复合物纳米晶的制备和在体肠吸收评价

[目的]研究纳米晶对黄芩苷-小檗碱复合物的肠吸收促进作用。[方法]使用抗溶剂法结合高压均质法制备黄芩苷-小檗碱复合物纳米晶,进行初步体外评价。建立在体单向肠灌流模型,评价纳米晶对复合物吸收的促进效果。[结果]制备了黄芩苷-小檗碱复合物纳米晶。体外评价结果表明,黄芩苷-小檗碱复合物纳米晶为圆柱状,粒径为(225.10±9.12)nm,多分散系数为(0.27±0.04)。在十二指肠、空肠、回肠、结肠4个肠段,纳米晶组黄芩苷的有效渗透系数(P_(eff))分别是复合物组的2.99、2.00、2.66、5.58倍,纳米晶组小檗碱的P_(eff)分别是复合物组的1.25、1.18、1.53、1.80倍。[结论]纳米晶提高了黄芩苷-小檗碱复合物的在体肠吸收。

黄芩苷-小檗碱复合物及纳米晶在Caco-2细胞单层模型的吸收特性研究

[目的]研究黄芩苷(BA)-小檗碱(BBR)复合物及纳米晶的吸收特性,探讨纳米晶技术对BA-BBR复合物吸收特性的改善。[方法]利用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法筛选BA-BBR复合物及纳米晶对人结肠腺癌细胞系(Caco-2)细胞的给药浓度,构建Caco-2细胞单层模型探究BA-BBR复合物及纳米晶的跨膜转运方式,并且加入P-糖蛋白(P-gp)抑制剂维拉帕米研究对其累积转运量和表观渗透系数(Papp)的影响。[结果]复合物组中BA和BBR的Papp值均低于物理混合物组;与复合物组相比,纳米晶组中BA和BBR的累积转运量和Papp值均提高,Papp值为复合物组的1.3倍和2.3倍。加入维拉帕米后,复合物组BA和BBR的Papp值分别提高1.5倍和2.0倍,而纳米晶组Papp值无明显提高。[结论]BA-BBR复合物不同于物理混合物,具有低渗透性,同时易受到P-gp外排影响。纳米晶技术可以显著改善BA-BBR复合物的渗透性,并且减弱外排作用对其的影响。

RP-HPLC同时测定功劳去火片中栀子苷、黄芩苷及盐酸小檗碱的含量

目的：建立了反相高效液相色谱法同时测定功劳去火片（功劳木，黄柏，黄芩等）中栀子苷、黄芩苷、盐酸小檗碱的含量。方法：采用KromasilC18色谱柱（250mm×4．6mm，5．0μm）；流动相组成为A：乙腈，B：乙腈-0．5％三乙胺水溶液（磷酸调pH3．1）（10：90）梯度洗脱；流速1．0mlMmin，检测波长254nm。结果：栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的线性范围分别为：3．22～206μg/mL（r=0．9999），2．95～186μg／mL（r=0．9999）和1．64～104μg／mL（r=0．9999）。平均回收率均大于98．4％。结论：该方法专属性强，结果准确可靠，重现性好，可用于功劳去火片中栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的含量测定，以便更好地控制功劳去火片的质量。

RP-HPLC法同时测定当归龙荟片中黄芩苷、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量

目的:建立同时测定当归龙荟片中黄芩苷、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱含量的 RP-HPLC 法。方法:以当归龙荟片为研究对象,采用 Diamonsil C_(18)柱(20mm×4.6 mm,5μm)分离,流动相为乙腈-甲醇-0.05 mol·L^(-1)磷酸二氢钠溶液-三乙胺(25:7:76:0.23,磷酸调 pH 3.1),流速1.0 mL·min^(-1),检测波长265 nm,柱温35℃结果:黄芩苷、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱浓度分别在0.91～18.16 mg·L^(-1)(r=0.9994,n=5),0.16～3.14 mg·L^(-1)(r=0.9999,n=5),0.47～9.40 mg·L^(-1)(r=0.9999,n=5)范围内与峰面积呈良好线性关系;平均加样回收率(n=9)分别为100.3%,99.3%,99.2%。结论:本测定方法简便、快捷、准确.为当归龙荟片质量评价提供依据。

小檗碱、绿原酸和黄芩苷对LPS损伤大鼠肠黏膜微血管内皮细胞表达ICAM-1的影响

为研究中药有效成分小檗碱、绿原酸和黄芩苷的抗炎机制,通过体外培养大鼠肠黏膜微血管内皮细胞(Rat intestinal mucosa microvascular endothelial cells,RIMMVECs)建立LPS损伤模型,采用免疫细胞化学方法观察了3种中药成分对LPS损伤RIMMVECs表达ICAM-1的影响,并对染色结果进行了图像灰度分析与统计学检验。研究发现,RIMVECs正常状态下低水平表达ICAM-1,用LPS刺激后ICAM-1的表达明显升高,而中药有效成分小檗碱、绿原酸和黄芩苷能够抑制LPS诱导的RIMVECs强阳性表达ICAM-1。结果表明,小檗碱、绿原酸和黄芩苷的抗炎作用与其下调ICAM-1的表达密切相关,为阐明其抗炎机制提供了数据。

RP-HPLC法同时测定龙泽熊胆胶囊中龙胆苦苷、盐酸小檗碱和黄芩苷含量

目的建立同时测定龙泽熊胆胶囊中3种成分的方法。方法采用DIKMA Platisil ODS色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,柱温30℃,流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液,采用梯度洗脱,检测波长275 nm,流速1 ml/min。结果龙胆苦苷、盐酸小檗碱和黄芩苷的线性范围分别为0.019~0.38μg（r=0.9999）、0.15~3.00μg（r=1.0000）和0.078~1.56μg（r=0.9997）,平均回收率98.97%~101.30%。结论龙泽熊胆胶囊的质量控制可采用本方法。

多波长RP-HPLC法同时测定导赤丸中栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱

目的建立同时测定导赤丸(黄连、栀子、黄芩、大黄、连翘、木通、玄参、天花粉、赤芍、滑石粉)中栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的方法。方法采用多波长RP-HPLC,色谱柱为Zorbax Eclipse XDB-C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.2%磷酸水溶液(B),梯度洗脱依次为A:15%～20%(0.00～10.00)min,A:20%～25%(10.00～15.00)min,A:25%～35%(15.00～25.00)min;柱温为室温;体积流量为1.0 mL/min;检测波长分别为240 nm(栀子苷)、278 nm(黄芩苷)和340 nm(盐酸小檗碱)。结果栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的进样量分别在0.037 5～0.337 5μg(r=0.999 7),0.0368～0.736μg(r=0.999 9)和0.039～0.351μg(r=0.999 9)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为102.95%、102.83%和98.61%;RSD分别为2.63%、1.90%和2.98%。结论方法简便,结果准确,重复性好,适用于同时测定导赤丸中栀子苷、黄芩苷和盐酸小檗碱。

RP-HPLC法测定三黄片中黄芩苷和小檗碱的含量

[目的]建立RP-HPLC同时测定三黄片中黄芩苷和小檗碱含量的方法.[方法]采用Kromasil C18柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,以乙腈-浓度2％乙酸水溶液（25∶75,V/V）为流动相,流速为1.0 ml/ min,检测波长为275 nm,进样量为10μl.[结果]黄芩苷和小檗碱的分离效果良好,分别在0.008 ～0.038、0.004 ～0.022 mg/ml浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.3％（RSD=1.66％）和99.5％（RSD =2.42％）.[结论]该方法简便、准确,分离效果好,可用于三黄片的质量控制.

黄芩苷与盐酸小檗碱自沉淀理化性质及抑菌作用机制研究

目的 以黄芩苷和盐酸小檗碱产生的自沉淀为研究对象,探究其理化性质,对其抑菌作用及其机制展开研究,为中药自沉淀现象产生的物质深入研究提供参考。方法 采用差示热量扫描法、红外光谱扫描和紫外光谱扫描测定黄芩苷和盐酸小檗碱的自沉淀理化性质;采用牛津杯法探索黄芩苷、盐酸小檗碱及自沉淀对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌的抑菌活性;采用二倍稀释法进一步研究黄芩苷、盐酸小檗碱、自沉淀对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),并通过测定菌体的生长曲线、胞外核酸相对含量、胞外可溶性蛋白质含量和电导率研究黄芩苷、盐酸小檗碱及自沉淀对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌的抗菌机制,分析对比黄芩苷、盐酸小檗碱反应前后抑菌作用机制是否发生改变。结果 差示热量扫描法结果显示盐酸小檗碱与黄芩苷反应前后存在热量变化,该自沉淀是一种不同于盐酸小檗碱、黄芩苷的新物质或复合物,其官能团、紫外吸收均发生了变化。盐酸小檗碱对大肠埃希菌的MIC为0.9375 mg/mL,MBC为7.5 mg/mL;对金黄色葡萄球菌的MIC为0.9375 mg/mL,MBC为7.5 mg/mL。黄芩苷对大肠埃希菌的MIC为1.875 mg/mL,MBC为7.5 mg/mL;对金黄色葡萄球菌的MIC为3.75 mg/mL,MBC为15 mg/mL。自沉淀对大肠埃希菌的MIC为3.75 mg/mL,MBC为3.75 mg/mL;对金黄色葡萄球菌的MIC为3.75 mg/mL,MBC为3.75 mg/mL。3种物质对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌菌体生长均有显著的抑制效果,但作用机制有所差异。结论 3种物质对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌显示出较好的抑菌活性,由强到弱为盐酸小檗碱、黄芩苷、自沉淀,均通过对细菌细胞膜造成损伤改变其通透性,影响细菌生长,从而起到抑制细菌生长的目的。三种物质虽能使菌体内容物大量渗出,但对胞内物质泄出作用存在差异,研究成果为进一步探究中药自沉淀提供参考。

RP-HPLC法测定牛黄上清丸中栀子苷、芍药苷、黄芩苷、小檗碱的含量

目的：建立牛黄上清丸中栀子苷、芍药苷、黄芩苷和小檗碱的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱（RP-HPLC）梯度洗脱,在不同波长下测定含量。色谱条件：Zorbax Eclipse XDB-C18键合硅胶（4.6 mm×150 mm,5μm）,流动相乙腈为0.2%磷酸水梯度洗脱,流速1.0 m L/min,柱温为20℃,检测波长分别为240 nm（栀子苷、芍药苷）,275 nm（黄芩苷）,350 nm（盐酸小檗碱）。结果：栀子苷、芍药苷、黄芩苷和盐酸小檗碱分别在0.112~0.84μg（r=0.9998）,0.20~1.50μg（r=0.9992）,0.208~3.64μg（r=0.9990）,0.232~2.32μg（r=0.999 7）范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.62%,100.30%,99.80%,98.92%,RSD分别为1.66%、1.93%、0.94%、0.95%。结论：该方法操作简便,结果准确,精密度高,重现性良好,可用于同时测定牛黄上清丸（大蜜丸）中栀子苷、芍药苷、黄芩苷和盐酸小檗碱的含量,可为提升、完善牛黄上清丸的质量标准及含量测定的方法提供科学依据。

黄芩苷黄芩素小檗碱对LLC-PK1细胞炎症模型中TNF-α IL-1β及IL-6表达的影响

研究中药黄芩苷、黄芩素、小檗碱对细菌脂多糖(LPS)诱导的猪肾小管上皮细胞(LLC-PK1)中肿瘤坏死因子-α(TNG-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-6(IL-6)表达的影响。用噻唑蓝比色法(MTT法)筛选LPS、黄芩苷、黄芩素和小檗碱对细胞作用的最佳浓度,用RT-PCR检测TNF-α、IL-1βmRNA表达,以确定细胞炎症模型是否建立成功;炎症模型建立后,用最佳浓度的黄芩苷、黄芩素和小檗碱分别作用细胞24h,用qPCR检测TNF-α、IL-1β及IL-6mRNA的表达量。结果LPS刺激组细胞TNF-α、IL-1βmRNA表达量极显著高于正常对照组(P<0.01),黄芩苷、黄芩素和小檗碱作用组细胞TNF-α、IL-1β及IL-6mRNA表达量比LPS刺激组显著降低(P<0.05),与对照组无显著差异(P>0.05)。上述结果表明,黄芩苷、黄芩素和小檗碱通过抑制炎症细胞TNF-α、IL-1β及IL-6 mRNA的表达,从而发挥抗炎作用。

3KGy^(60)Co-γ辐照对制痂酊中黄芩苷和小檗碱的影响

目的建立HPLC法同时测定制痂酊中黄芩苷和小檗碱的方法,同时考察3KGy60Co-γ辐照对两者的影响,为制剂采用3KGy60Co-γ辐照灭菌提供依据。方法 Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.5%三乙胺水溶液(磷酸调pH至3.1)(28∶72),体积流量1.0 mL/min,检测波长265 nm,柱温30℃。结果黄芩苷在6.44～32.20μg/mL范围内线性关系良好,小檗碱在2.02～14.14μg/mL范围内线性关系良好,加样回收率分别为97.6%,98.2%(n=6)。3KGy60Co-γ辐照时,两者平均质量浓度略有下降。结论 HPLC法可同时测定制痂酊中黄芩苷和小檗碱的量,3KGy60Co-γ辐照可用于制痂酊的灭菌。

RP-HPLC法同时测定蓝芩口服液中栀子苷、黄芩苷及盐酸小檗碱的含量

目的:建立反相高效液相色谱法同时测定蓝芩口服液中栀子苷、黄芩苷及盐酸小檗碱的含量。方法:采用Nova-PakC_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相组成为:A:乙腈,B:乙腈-0.5%三乙胺水溶液(磷酸调pH3.1)(15:85)梯度洗脱;流速1.0ml·min^(-1);检测波长254nm。结果:栀子苷、黄芩苷及盐酸小檗碱的线性范围分别为:0.5～2.5μg(r=0.9999),0.21～1.26μg(r=0.9994),0.05μg～1.59μg( r=0.9998)。平均回收率:栀子苷为100.8%,RSD=1.6%(n=9);黄芩苷为101.3%,RSD=2.0%(n=9)。盐酸小檗碱为100.0%,RSD=2.3%。(n=9)结论:方法简便,准确可作为蓝芩口服液的质量控制标准。

醇-水介质中离子交换法制备盐酸小檗碱树脂复合物

目的利用醇-水介质中离子交换制备盐酸小檗碱(berberine hydrochloride,BH)树脂复合物,考察其体外药物释放。方法测定盐酸小檗碱在乙醇-水混合溶剂中的溶解度,采用动态和静态法载药。以乙醇-水(体积比为3∶2)为溶剂,将阻滞材料Eudragit RL100和药物同时溶解并载入Amberlite IRP64弱酸型离子交换树脂形成调释型药物-树脂复合物,用差示扫描量热(DSC)、X-射线粉末衍射(XRD)和傅里叶红外光谱分析(FTIR)分析方法表征复合物,考察阻滞材料用量和释放介质对药物释放的影响。结果溶剂中乙醇-水的体积比为3∶2时,盐酸小檗碱溶解度最高。降低动态法的流速,可提高药物利用率;增大药物浓度,可使饱和时间点提前。XRD、DSC和FTIR分析结果显示,药物与离子交换树脂形成复合物。阻滞材料Eudragit RL100用量增加,药物释放缓慢。药物释放受介质pH影响,酸性条件下释药速率快。结论在乙醇-水混合溶剂中,采用一步法可同时载阻滞材料和药物,得到具有适宜释放特征的盐酸小檗碱-离子交换树脂复合物。

RP-HPLC同时测定坤泰胶囊中芍药苷、黄芩苷、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱含量

目的:采用高效液相色谱法测定坤泰胶囊(熟地黄、黄连、白芍、黄芩、阿胶、茯苓)中芍药苷、黄芩苷、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的含量。方法:Agilent ZORBAX SB-C18柱(4.6mm×250mm,5μm)为固定相,以乙腈-0.4%磷酸溶液洗脱,流速为1.0mL/min,检测波长为230nm。结果:芍药苷、黄芩苷、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的线性范围分别为0.01658～0.3316μg(r=0.9999),0.05980～1.1960μg(r=0.9999),0.01291～0.2582μg(r=0.9999),0.04198～0.8396μg(r=0.9999)。加样回收率分别为98.91%(RSD为1.29%),99.20%(RSD为0.92%),97.86%(RSD为0.89%),98.63%(RSD为0.62%)。结论:该方法简便易行,重复性好,可用于对坤泰胶囊的质量控制。

氨基胍、葛根素、小檗碱、黄芩苷和甘草酸对D-半乳糖诱导大鼠醛糖还原酶活性和蛋白非酶糖化作用的比较

目的观察氨基胍、葛根素、小檗碱、黄芩苷和甘草酸对D-半乳糖(D-gal)诱导大鼠体内醛糖还原酶(AR)活性、糖耐量和蛋白非酶糖基化反应的作用。方法除空白对照组外,其余大鼠均采用腹腔注射(ip)D-gal 150mg? kg-1,qd×56d致病,D-gal处理大鼠2周后,将大鼠按体重均衡随机分成:模型对照、氨基胍、葛根素、小檗碱、黄芩苷和甘草酸5组,然后继续ip D-gal处理同时灌胃给予不同药物(300mg?kg-1?10ml-1)或蒸馏水,qd×42d;实验结束时,观察5药对D-半乳糖诱导大鼠体内醛糖还原酶(AR)活性、糖耐量和蛋白非酶糖基化反应的作用。结果与空白对照组比较,D-gal处理大鼠出现糖耐量减退(IGT)、糖基化产物(包括糖化血红蛋白即HbA1c、果糖胺和晚期糖基化终产物)增高以及红细胞内AR活性增强(P<0．01);氨基胍、葛根素、小檗碱、黄芩苷与甘草酸均能明显抑制AR活性(P<0．01-0．05);氨基胍、葛根素、小檗碱和黄芩苷均能改善D-gal诱导大鼠IGT(P<0．01-<0．05);氨基胍、葛根素和小檗碱能降低糖基化产物的含量(P<0．01-0．05),而黄芩苷仅降低HbA1c含量(P<0．05);甘草酸对糖基化产物含量未见明显影响(P>0．05)。结论氨基胍、葛根素、小檗碱、黄芩苷和甘草酸均能抑制D- gal诱导大鼠体内醛糖还原酶活性,氨基胍、葛根素与小檗碱对D-gal诱致的大鼠糖基化反应具有明显的抑制作用,而黄芩苷对大鼠糖基化反应具有部分抑制作用,甘草酸对大鼠糖基化反应未见抑制作用。

RP-HPLC同时测定四季三黄软胶囊中黄芩苷和盐酸小檗碱的含量

目的:建立RP-HPLC法同时测定四季三黄软胶囊中黄芩苷和盐酸小檗碱的含量。方法:采用色谱柱为hypersil BDS C_(18)(250mm×4.6 mm,5μm),以乙睛-0.5%三乙胺水溶液(磷酸调pH至3.1)(25:75)为流动相,检测波长265 nm,流速1.0 ml·min^(-1)。结果:黄芩苷在1.6～206μg·ml^(-1)范围内,线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为100.3%。RSD=1.7%(n= 6);盐酸小檗碱在1.6～208μg·ml^(-1)范围内,线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为100.8%,RSD=1.6%(n=6)。结论:该方法结果准确可靠,重现性好,可用于四季三黄软胶囊的质量控制。

RP-HPLC法同时测定炎可宁糖衣片中盐酸小檗碱和黄芩苷的含量

目的:建立一种可测定炎可宁糖衣片中盐酸小檗碱和黄芩苷含量的RP-HPLC方法。方法:采用Hypersil-BDSC18(200mm×4.6mm5μm)为色谱柱;流动相:黄芩苷为乙腈-0.1%磷酸溶液(22:78);盐酸小檗碱乙腈-磷酸盐缓冲液〔0.05mol/L磷酸二氢钾和0.05mol/L庚烷磺酸钠(1:1)含0.2%三乙胺〕(40:60);盐酸小檗碱和黄芩苷的检测波长分别为347nm与278nm;柱温:30℃;进样量均为20μL;流速均为1.0mL/min;峰面积外标法定量。结果:本法盐酸小檗碱在16.0～128μg·mL-1,黄芩苷在40.2～321μg·mL-1范围内两者均有良好的线性关系(r=0.9999),黄芩苷和盐酸小檗碱的平均回收率与RSD%分别为99.1%,(RSD)0.28%和99.7%,(RSD)1.03%。结论:方法简便,快速,准确可靠,可作为该制剂的质控方法。