不同来源黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的定量分析

目的:建立黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的含量测定方法,并对不同来源的药材进行分析,为黄芪质量标准的制定提供依据。方法:采用HPLC-DAD法建立黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的含量测定方法,通过对来源于我国8个省59批黄芪药材的分析,阐明产地、生长方式、生长年限等对黄芪中异黄酮类成分的影响。结果:不同产地、生长方式及生长年限的黄芪药材,其毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的含量差异较大。从产地分析,以山西、内蒙古和陕西等道地产地含量较高;从生长方式分析,以半野生含量较高;从生长年限分析,年限越短,含量越高。结论:本研究建立的毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的含量测定方法简便、准确、重现性好,可用于黄芪药材中异黄酮类成分的质量控制。

高速逆流色谱法分离纯化黄芪中的芒柄花素和毛蕊异黄酮

采用高速逆流色谱法(HSCCC),以正己烷氯仿甲醇水组成二相系统作为固定相与流动相,对黄芪的乙酸乙酯粗提物进行了分离纯化。结果发现:以正己烷氯仿甲醇水(体积比为1.5∶3∶3∶2)组成的系统可以从黄芪的乙酸乙酯粗提物中分离出毛蕊异黄酮,纯度可达95%以上,并可以初步纯化芒柄花素;接着用正己烷氯仿甲醇水(体积比为4∶4∶5∶4)组成的系统进一步纯化芒柄花素,其纯度达95%以上。利用该方法,可以对中药黄芪中的异黄酮进行快速的分离和纯化。

高效液相色谱法测定黄芪中毛蕊异黄酮苷和芒柄花素的含量

目的：采用高效液相色谱法测定膜英黄芪Astragalus membranaceus（Fisch．）Bge．中毛蕊异黄酮苷和芒柄花素的含量。方法：依利特Hypersil ODS 2色谱柱（4．6mm×250mm，5μm）；流动相：A相为乙腈-甲醇（体积分数9：1），B相为水，梯度洗脱；流速：1．0ml／min；检测波长：260nm；柱温：室温；进样量：20μl。黄芪药材以甲醇超声提取2次，每次20min。结果：毛蕊异黄酮苷和芒柄花素色谱峰的理论塔板数分别为50134和25258。回归方程分别为Y=58924 X-12352，r=0．9999和Y=9237 X-124447，r=0．9999，线性范围分别为2．022～101．1μg／ml和38．04～1522μg／ml。方法学考察结果表明，毛蕊异黄酮苷和芒柄花素的日内和日间RSD均〈2．0％，最低检测限分别为0．2022μg／ml和1．522μg／ml，加样回收率结果分别为98．34％，RSD=1．33％（n=3）和98．84％，RSD=0．12％（n=3）。测定了10批次黄芪药材的毛蕊异黄酮苷和芒柄花素的含量。结论：该方法稳定简便，结果可靠，能够用于黄芪药材中毛蕊异黄酮苷和芒柄花素含量测定的研究。

HPLC测定黄芪蜜炙前后毛蕊异黄酮和芒柄花素的含量

目的:比较黄芪蜜炙前后毛蕊异黄酮和芒柄花素的含量变化。方法:采用Waters SunfireTM C18色谱柱(5μm,4.6mm×250mm);以甲醇-水为流动相梯度洗脱,柱温:35℃,检测波长:254nm,流速:1.0mL/min。结果:生黄芪中毛蕊异黄酮和芒柄花素的含量分别为0.2479mg/g和0.1252mg/g,炙黄芪中毛蕊异黄酮和芒柄花素的含量分别为0.2256mg/g和0.1082mg/g。结论:蜜炙法可使黄芪中毛蕊异黄酮和芒柄花素的含量降低。

LC-MS/MS同时测定大鼠血浆中黄芪成分芒柄花素、毛蕊异黄酮和异鼠李素的浓度及其药动学研究

目的:建立大鼠血浆中芒柄花素、毛蕊异黄酮和异鼠李素浓度的测定方法,并研究其药动学参数。方法:取大鼠10只灌胃给予10 g/kg黄芪,检测给药前和给药后24 h内芒柄花素、毛蕊异黄酮和异鼠李素的血浆浓度,并计算其药动学参数;采用液相色谱-串联质谱法,以芦丁为内标,色谱柱为Alltima C18,流动相:甲醇-水溶液,梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,柱温为40℃,电喷雾负离子源,扫描方式为多反应离子监测。芒柄花素、毛蕊异黄酮、异鼠李素和芦丁的选择检测离子质荷比(m/z)分别为m/z 267.0→251.9,m/z 283.1→268.2,m/z 315.4→300.1和m/z 609.4→300.1。结果:芒柄花素、毛蕊异黄酮和异鼠李素检测浓度的线性范围分别为5～1 000(r=0.9996)、3.91～500(r=0.9989)、0.5～100(r=0.9992)ng/mL,最低检测限分别为0.625、0.5和0.1 ng/mL,药动学参数分别为:t1/2β(10.43±2.94)、(6.91±1.33)和(5.07±1.21)h,Cmax(398.5±103.7)、(138.7±32.8)和(58.3±14.5)ng/mL,AUC0→12h(1238.8±311.3)、(669.5±159.7)和(274.1±83.9)ng.h/mL。结论:本方法专属性强、灵敏度高、准确性好,可用于芒柄花素、毛蕊异黄酮和异鼠李素的血药浓度测定,大鼠灌胃给10 g/kg黄芪后,芒柄花素、毛蕊异黄酮和异鼠李素在大鼠体内的药动学符合二室模型特征。

川产道地药材梭果黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的含量测定

目的:建立梭果黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素含量测定方法,为完善梭果黄芪的质量标准提供依据。方法:Agilent TC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;以乙腈为流动相A,以水(含0.2%甲酸)为流动相B,梯度洗脱;检测波长260 nm;柱温30℃;流速1.0 mL/min;进样量10μL。结果:毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的线性回归方程分别为Y=30.025 X+5.1096(r=0.999 7)和Y=58.24 X-94.279(r=0.999 7);线性范围分别为5.52～110.40μg/mL和5.54～110.72μg/mL;样品中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的总量在0.0053%～0.0179%之间。结论:本实验建立的毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的含量测定方法简便、准确,可用于梭果黄芪药材中黄酮类成分的质量控制。

黄芪类中药中芒柄花素和毛蕊异黄酮的HPLC测定

建立了黄芪中异黄酮类成分的HPLC测定法。利用本法对黄芪样品中的芒柄花素(F)、毛蕊异黄酮(C)、黄芪异黄烷甙(A)进行定性检测,并对芒柄花素和毛蕊异黄酮进行了含量测定。HPLC条件;层析柱YWG80-5μm;流动相:正庚烷-无水乙醇-水-冰乙酸(80:20:0.05:0.05);流速1mI./min;检测波长280nm(定性)或250nm(定量)。

不同蜜炙方法对红芪中毛蕊异黄酮和芒柄花素含量的影响

目的比较不同蜜炙方法对红芪中毛蕊异黄酮和芒柄花素含量的影响,为其蜜炙最佳工艺的建立提供依据。方法采用传统炒制、烘制、微波制的方法蜜炙红芪;采用Agilent HC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-0.01%磷酸水溶液,梯度洗脱(0~12 min,30%~33%乙腈;12~13 min,31%~40%乙腈,13~25 min,40%乙腈),流速1.0 mL/min,检测波长248 nm,柱温30℃,进样量10μL。结果红芪不同蜜炙品中毛蕊异黄酮和芒柄花素含量存在差异。红芪烘制炙品中毛蕊异黄酮和芒柄花素含量最高,分别为7.911 6、49.699 6μg/g;红芪传统炙品中二者含量最低,分别为4.776 7、37.291 0μg/g;红芪生品和红芪微波炙品中二者含量相当,分别为5.080 2、42.798 9μg/g和3.983 9、42.314 5μg/g。结论不同蜜炙方法对红芪中毛蕊异黄酮和芒柄花素含量有一定影响,烘制炙法是红芪蜜炙的最优方法。

蒙古黄芪中芒柄花素含量的测定及黄酮类成分提取工艺的优化

目的建立芒柄花素的含量测定方法,优选黄芪中黄酮类成分的提取工艺。方法采用高效液相色谱-紫外检测法,建立芒柄花素的含量测定方法,以芒柄花素含量为指标,用正交设计法对影响超声提取的因素如乙醇浓度、乙醇用量、提取次数和超声时间进行考察,优化提取工艺。结果芒柄花素在1～40μg/ml范围内线性关系良好,以峰面积(A)对浓度(C)进行线性回归,方程为A=212096C+3958.7,r2=0.9999。日内、日间相对标准差(RSD)均<5%;平均回收率均在98.0%～102.0%;优化提取条件为加15倍量75%乙醇,连续提取3次,每次20min。结论所建立的含量测定方法可用于蒙古黄芪中芒柄花素的含量测定,优化的提取工艺具有效率高和操作简便等优点。

黄芪类中药中芒柄花素和毛蕊异黄酮的HPLC测定

黄芪作为一种经典的中药,在临床中能够起到补中益气、利水消肿、敛汗固脱的功效。现代研究认为其还有调节血压、增强免疫力以及保护心肝的作用,在临床中具有非常重要的药用价值。很多中成药中都含有黄芪,基于此,运用高效液相色谱(HPLC)测定法对中药黄芪中所含的异黄酮类成分进行测定。逐一对成品中的芒柄花素(F)、毛蕊异黄酮(C)以及黄芪异黄烷苷(A)进行定性检测,并对F和C的含量进行了有效的测定,以期为临床用药提供安全保障。

高速逆流色谱法分离纯化黄芪中毛蕊异黄酮苷和芒柄花苷

目的:建立高速逆流色谱法(HSCCC)分离纯化黄芪中毛蕊异黄酮苷和芒柄花苷的方法。方法:黄芪粗提物分别采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1∶10∶2∶10)、乙酸乙酯-乙醇-正丁醇-水(30∶10∶6∶50)两相溶剂系统进行HSCCC分离纯化,下相为流动相,流速分别为2.5 m L·min^(-1)、2.0 mL·min^(-1),转速900 r·min^(-1),检测波长254 nm,所得产物采用高效液相进行纯度测定。结果:300 mg黄芪粗提物分离得到毛蕊异黄酮苷(20 mg)、芒柄花苷(25 mg),两个化合物经高效液相色谱法(HPLC)分析,纯度均大于95%。结论:高速逆流色谱法是一种高效分离纯化黄芪中毛蕊异黄酮苷和芒柄花苷的方法。

不同干燥工艺对红芪中毛蕊异黄酮和芒柄花素含量的影响

目的:探讨不同干燥工艺对红芪黄酮类成分毛蕊异黄酮和芒柄花素含量的影响,为其最佳干燥工艺的建立提供实验依据。方法:红芪经不同方法干燥后,采用HPLC测定红芪中的毛蕊异黄酮和芒柄花素含量并比较;采用Agilent1260高效液相仪液C18柱;乙腈-0.01%磷酸水溶液为流动相;洗脱梯度,0~12min,30%~33%乙腈;12~13min,33%~40%乙腈,13~25min,40%乙腈;流速为1.0mL·min^-1;选用248nm为检测波长;色谱柱温度为30℃;进样量为10μL。结果:红芪电热鼓风干燥(条件:65℃,2层)组毛蕊异黄酮、芒柄花素含量最高,真空干燥组、微波干燥(条件:高温,3层)组、阴干组、真空冷冻干燥组次之,晒干组最低。结论:不同方法干燥红芪对红芪中毛蕊异黄酮和芒柄花素含量有一定的影响;电热鼓风干燥红芪效率高、方法简单、时间短、成本低,适合药材大批量干燥,可作为红芪干燥的优先选择方法。

芪苈强心胶囊中黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素在大鼠体内药动学研究

目的建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)方法,研究芪苈强心胶囊中黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素在大鼠体内的药动学特征。方法SD大鼠ig给予芪苈强心胶囊混悬液1.3 g/kg,于不同时间点经目内眦静脉丛取血,采用HPLC-MS/MS法测定黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的血药浓度。色谱柱为Agilent Zobrax XDB-C18(50 mm×4.6 mm,3.5μm);流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸甲醇溶液(B),梯度洗脱;扫描方式为多反应监测(MRM)正离子模式检测。通过DAS 3.0软件拟合计算药动学参数。结果大鼠ig芪苈强心胶囊后,血浆中黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的药动学参数达峰时间(tmax)分别为(0.67±0.00)、(0.67±0.06)、(0.17±0.00)h,峰浓度(Cmax)分别为(120.46±45.03)、(31.49±12.00)、(5.17±1.13)ng/mL,药时曲线下面积(AUC0~t)分别为(320.92±79.10)、(103.26±47.63)、(14.70±5.48)h·ng/mL,半衰期(t1/2)分别为(5.74±0.78)、(6.05±3.34)、(5.07±2.13)h。结论该检测方法专属性强、重复性好,适用于芪苈强心胶囊中黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素在大鼠体内的药动学研究。

不同产地、不同采收期黄芪药材及饮片中毛蕊异黄酮葡萄糖苷及芒柄花素含量测定

目的:采用HPLC法测定不同产地、不同采收期黄芪药材及饮片中毛蕊异黄酮葡萄糖苷及芒柄花素含量。方法:采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速1 mL·min-1,柱温35℃,检测波长260 nm。结果:毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素线性范围分别为0.1272～12.72μg(r=0.9999)和0.003344～2.508μg(r=0.9999),平均回收率(n=6)分别为98.9%(RSD=1.7%)和99.0%(RSD=2.3%)。不同产地黄芪药材及饮片中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素含量差异较大,生长年限6年的黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素含量最高。结论:该方法简单快捷,适合于黄芪中黄酮类化合物的含量测定研究,为寻找更佳黄芪产地及黄芪采收期提供了依据。

不同加工方法的蒙古黄芪药材中毛蕊异黄酮苷和芒柄花素定量分析

目的建立HPLC法同时测定蒙古黄芪药材中的毛蕊异黄酮苷和芒柄花素量的方法,考察不同产地、加工方法、栽培年限对蒙古黄芪质量的影响。方法色谱柱为Dikma C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;检测波长260 nm;柱温30℃。结果通过对蒙古地区11个不同产地的40批次蒙古黄芪药材进行分析,比较毛蕊异黄酮苷和芒柄花素量得出,蒙古黄芪的产地加工方式最佳为清洗后自然晾晒干燥;巴彦淖尔市乌拉特中旗明安镇头份子地区为蒙古黄芪最佳栽培种植基地;生长年限二年、三年的蒙古黄芪栽培品种质量差异不大;蒙古黄芪野生品种质量优于栽培品种。结论该方法简单快捷,适合于黄芪中异黄酮类化合物的定量测定研究,为今后蒙古黄芪药材的栽培种植和加工方式合理标准的制定提供科学、可靠的依据。

中药黄芪中异黄酮苷类化合物的高效液相色谱-串联质谱分析

利用高效液相色谱-大气压化学电离质谱联用技术,建立了黄芪提取物中的有效成分毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷和芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷的定性分析方法。这两个化合物在大气压化学电离质谱条件下,质谱裂解行为的研究表明,二者具有相似的特征质谱裂解行为,即在正离子模式下的一级质谱中均产生强的准分子离子[M+H]+峰和苷元离子[M+H-G lu]+峰;且苷元离子经碰撞诱导解离均产生.CH3(15 Da)、CH3OH(32Da)和2CO(56 Da)的中性丢失;同时发生Retro-D iels A lder(RDA)裂解反应,导致在毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷和芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷的二级质谱图中分别产生相对分子质量为m/Z148和m/Z133的特征碎片离子峰。这些特征碎片可以作为这两个化合物定性的依据。该方法已成功应用于黄芪注射液中的这两种物质的定性分析。

HPLC法测定康复春口服液中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪甲苷和人参皂苷Rb_1

目的建立HPLC同时测定康复春口服液中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪甲苷和人参皂苷Rb_1的方法。方法采用Diamonsil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–0.2%甲酸溶液,梯度洗脱;检测波长254 nm(0~30 min,检测毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素)、210 nm(30~36 min,检测黄芪甲苷)和203 nm(36~50 min,检测人参皂苷Rb_1);体积流量:0.8 mL/min;柱温:30℃;进样量为20μL。结果毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪甲苷、人参皂苷Rb_1分别在3.29~82.25μg/mL(r=0.999 1)、4.77~119.25μg/mL(r=0.999 8)、4.16~104.00μg/mL(r=0.999 2)、11.33~283.25μg/mL(r=0.999 7)、7.39~184.75μg/mL(r=0.999 9)、2.05~51.25μg/mL(r=0.999 5)线性关系良好;平均加样回收率分别为97.98%、98.45%、97.38%、99.72%、98.67%、96.99%,RSD值分别0.91%、1.41%、0.78%、1.09%、1.22%、0.85%。结论方法专属性强,结果准确,重复性好,为更好地评价康复春口服液的质量提供参考。

红芪与黄芪中两个异黄酮类成分含量的比较研究

目的：通过高效液相色谱法,对红芪和黄芪药材进行鉴别和定量分析,为药材质量评价提供科学依据.方法：色谱柱为TC-C18（2）柱（250 mm ×4.6 mm,5 μm）,TC-C18保护柱（10 mm× 4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.01％磷酸水溶液（梯度洗脱）,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为248 nm,柱温为30℃,进样量为10 μL.结果：15批红芪样品中芒柄花素的质量分数均高于毛蕊异黄酮,其中芒柄花素质量分数在77.51 ～ 424.94 μg·g-1,毛蕊异黄酮质量分数在2.27 ～26.13 μg·g-1;而7批黄芪中芒柄花素的质量分数均低于毛蕊异黄酮,其中芒柄花素质量分数在4.84 ～29.94 μg·g-1,毛蕊异黄酮质量分数在12.95 ～62.98 μg·g-1.结论：毛蕊异黄酮和芒柄花素的相对质量分数可作为红芪与黄芪的定性鉴别和质量评价的主要特征之一.

高效液相色谱法考察黄芪蜜炙前后4种异黄酮含量的变化

目的通过HPLC法测定炮制前后黄芪中4种异黄酮含量,为黄芪和炙黄芪提供简便快捷的分析方法。方法色谱柱为kromasil C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水系统,梯度洗脱,检测波长:251nm,柱温:40℃,流速:1.0mL.min-1,进样量:10μL。结果毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅰ)在6.3～630mg.L-1、芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅱ)在4～400mg.L-1、毛蕊异黄酮(Ⅲ)在4.5～450mg.L-1、芒柄花素(Ⅳ)在5～500mg.L-1与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为0.999 5、0.999 5、0.999 6、0.999 7。4种成分的加样回收率均>96%,RSD均<3%。结论该法简便快速,重复性良好,结果准确可靠,可用于黄芪和炙黄芪药材中4种主要异黄酮类成分的含量测定,为提高黄芪、炙黄芪质量标准提供借鉴。