黄芪甙Ⅳ对阿霉素心肌损伤的保护作用研究

目的 :观察阿霉素 (Adriamycin ,ADR)造成大鼠心肌损伤时 ,心肌超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛(MDA)及心肌超微结构的改变及黄芪甙Ⅳ对其的影响。方法 :动物随机分 3组 ,ADR组 :大鼠腹腔注射ADR4 .5mg/kg ,共 2日 ;黄芪甙Ⅳ组 :腹腔注射黄芪甙Ⅳ 2mg/kg ,30分钟后给ADR同ADR组 ;正常对照组 :腹腔注射生理盐水 4 .5mg/kg ,共 2日。给药后第五天测定大鼠心肌组织SOD活性、MDA含量 ,并观察超微结构。结果 :黄芪甙Ⅳ能降低ADR心肌损伤大鼠心肌组织中MDA含量 ,增加SOD活性 ,明显减轻ADR对心肌组织超微结构的损害。结论 :黄芪甙Ⅳ可对抗ADR引起的心肌细胞脂质过氧化损伤 ,保护心肌组织。

黄芪甙Ⅳ对豚鼠心电图及心室肌动作电位的影响

目的观察黄芪甙Ⅳ对豚鼠心电图(ECG)及心室肌动作电位的影响。方法分别在麻醉豚鼠和Langendoff心脏灌流模型上记录体表ECG和离体心脏ECG,采用细胞内微电极技术记录豚鼠右心室乳头肌的动作电位。结果黄芪甙Ⅳ能延长豚鼠体表ECG和离体心脏ECG的RR间期,这一效应具有剂量依赖性。黄芪甙Ⅳ还能缩短动作电位的时程(APD),但对静息电位、动作电位幅度和最大去极速度没有明显影响。结论黄芪甙Ⅳ具有负性变时作用,能缩短心肌细胞APD,其作用机制可能与慢钙通道有关。

黄芪皂甙Ⅳ联合脂肪源性干细胞对老龄大鼠脑缺血再灌注中神经营养因子表达的影响

目的探讨黄芪皂甙Ⅳ联合脂肪源性干细胞(ADSC)移植对老龄大鼠脑缺血再灌注模型神经功能及神经营养因子表达的影响。方法老龄大鼠随机分为模型组、ADSC组、黄芪皂甙Ⅳ组、黄芪+ADSC组,应用PKH-26标记移植的ADSC,NSS法检测神经功能恢复,免疫组化法和实时荧光定量PCR检测基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、脑源性神经营养因子(BDNF)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)蛋白和mRNA的表达。结果治疗组均能使大鼠神经功能损害评分降低,以联合组恢复最为明显(P<0.05)。黄芪皂甙Ⅳ组SDF-1蛋白和mRNA表达较模型组显著增加(P<0.05)。联合组PKH-26标记的细胞个数高于ADSC组(P<0.05)。联合组和ADSC组BDNF和IGF-1蛋白和mRNA表达高于模型组,其中联合组表达最为显著(P<0.05)。结论联合组促进脑缺血再灌注老龄大鼠神经营养因子表达和神经功能恢复作用优于单独治疗组,其机制可能与黄芪皂甙Ⅳ上调脑缺血区SDF-1表达,促进移植的ADSC迁移和存活有关。

黄芪皂甙Ⅳ对大鼠心肌成纤维细胞胶原影响(英文)

目的探讨黄芪皂甙Ⅳ(XGA)对大鼠心肌成纤维细胞胶原影响及其量效和时效关系。方法采用胶原酶(胰蛋白酶消化法分离大鼠心肌成纤维细胞(FBC),建立FBC培养系统。在FBC培养系统内加入不同质量浓度和不同作用时间的XGA,提取RNA后用反转录PCR(RT-PCR)法检测Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原,基质金属蛋白酶(MMP-1、-2、-9)及其抑制剂(TIMP-1、-2)mRNA的表达水平。结果予不同水平和不同作用时间XGA后,FBC培养系统RT-PCR产物凝胶电泳显示有Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原,MMP-1、-2、-9、TIMP-1和-2mRNA表达;与予XGA前比较,Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原,TIMP-1、-2mRNA表达水平有所下降,而MMP-1、-2、-9mRNA表达水平有所上升,且随着XGA剂量增加或作用时间延长而渐下降或上升。Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原,TIMP-1、-2mRNA表达水平与XGA的剂量和作用时间呈负相关(r=-0.927^-0.637P=0~0.024);MMP-1、-2、-9mRNA表达水平与XGA剂量和作用时间呈正相关(r=0.672~0.962P=0~0.034)。结论XGA可减少心肌成纤维细胞胶原形成,其机制可能为抑制胶原的合成、增加胶原降解。

黄芪皂甙Ⅳ联合ADSC对坐骨神经缺损后大鼠运动功能的修复作用

目的探讨黄芪皂甙Ⅳ联合脂肪源性干细胞(ADSC)对大鼠坐骨神经缺损后运动功能恢复的影响。方法将40只清洁级雄性SD大鼠随机分为4组各10只,4组均采用化学萃取脱细胞方法制备大鼠缺损脱细胞神经支架(ARSN)。ARSN组注入等剂量DMEM于ARSN;黄芪皂甙Ⅳ组注入等剂量DMEM于ARSN,并于术前5 min及术后12、24 h腹腔注射黄芪皂甙Ⅳ(20 mg/kg);ADSC组注入等剂量ADSC(1×106/mL)于ARSN;黄芪皂甙Ⅳ+ADSC组同时采用黄芪皂甙Ⅳ组、ADSC组的方法。用各组的神经移植体桥接长1 cm坐骨神经两断端间的缺损造模,术后8周取材。检测各组坐骨神经功能指数(SFI)、神经电生理参数(神经传导速度、潜伏期、波幅)及胫前肌湿重比率。结果与ARSN组比较,黄芪皂甙Ⅳ组、ADSC组和黄芪皂甙Ⅳ+ADSC组术后各时点SFI增高,神经传导速度增快,潜伏期缩短,波幅增大,胫前肌湿重比率增高(P均<0.05);与黄芪皂甙Ⅳ组比较,黄芪皂甙Ⅳ+ADSC组术后56 d SFI增高,神经传导速度增快,潜伏期缩短,波幅增大,胫前肌湿重比率增高(P均<0.05)。结论黄芪皂甙Ⅳ联合ADSC移植能促进大鼠神经再生和运动功能恢复,其作用优于单独应用黄芪皂甙Ⅳ或ADSC。

黄芪皂甙Ⅳ对大鼠脑缺血/再灌注损伤海马神经元凋亡及Livin、Caspase-9、Caspase-3表达的影响

目的:探讨黄芪皂甙Ⅳ对大鼠脑缺血/再灌注损伤后海马区Livin、Caspase-9、Caspase-3及神经元细胞凋亡表达的影响。方法:观察黄芪皂甙Ⅳ对神经功能评分、海马区Lvin、Caspase-9、Caspase-3表达及细胞凋亡指数变化。结果:与模型组比较,黄芪皂甙Ⅳ组海马区Livin表达增高,神经功能损害评分、Caspase-9、Caspase-3表达及细胞凋亡指数下降。结论:黄芪皂甙Ⅳ能通过上调Livin表达,抑制细胞凋亡线粒体途径。

黄芪皂甙Ⅳ联合骨髓间充质干细胞对脑缺血再灌注大鼠血管生成的影响

目的研究黄芪皂甙Ⅳ联合骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BMSCs)移植对大鼠脑缺血再灌注模型血管生成和神经功能的影响。方法采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血模型,随机分为模型组、黄芪皂甙Ⅳ组、BMSCs组、黄芪加BMSCs组(联合组),应用PKH-26染色标记移植的BMSCs,NSS法检测神经功能恢复情况,免疫组化染色检测基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达,CD34标记血管内皮细胞并计数微血管密度(MVD)。结果与模型组和黄芪皂甙Ⅳ组比较,黄芪加BMSCs组和BMSCs组均能使大鼠神经功能损害评分降低,以黄芪加BMSCs组恢复最为明显(P<0.05)。与模型组比较,黄芪皂甙Ⅳ组SDF-1蛋白表达显著增加(P<0.05)。黄芪加BMSCs组PKH-26标记的细胞个数显著高于BMSCs组(P<0.05)。治疗组VEGF和MVD表达均显著高于模型组,其中黄芪加BMSCs组表达最为显著(P<0.05)。结论联合组促进脑缺血损伤血管生成和神经功能恢复的作用优于单独治疗组,其机制可能与黄芪皂甙Ⅳ上调脑缺血区SDF-1表达,促进移植的BMSCs迁移和存活有关。

黄芪皂甙Ⅳ联合BMSCs移植对大鼠脑缺血再灌注海马神经细胞凋亡及Livin、Caspase-9蛋白的影响

目的探讨黄芪皂甙Ⅳ联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对缺血再灌注大鼠海马Livin、Caspase-9蛋白及神经细胞凋亡表达的影响。方法实验动物随机分为假手术组、模型组、BMSCs组、联合组。采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)模型,假手术组不予处理。BMSCs组于造模后3 h移植BMSCs。联合组既移植BMSCs,又给予黄芪皂甙Ⅳ治疗。观察缺血72 h后,各组神经功能评分,PKH-26标记的移植BMSCs分布,采用Western blot和免疫组化方法检测大鼠海马Livin、Caspase-9蛋白的表达,TUNEL方法检测细胞凋亡指数。结果 PKH-26标记的BMSCs在海马有表达。各组中联合组神经功能恢复最为明显(P<0.05)。与模型组比较,联合组和BMSCs组均可上调Livin蛋白表达(P<0.05),下调Caspase-9蛋白表达(P<0.05),降低神经元细胞凋亡指数(P<0.05),以联合组作用更为显著(P<0.05)。结论黄芪皂甙Ⅳ联合BMSCs移植对脑缺血再灌注神经元细胞凋亡有协同抑制作用,其作用机制可能与黄芪皂甙Ⅳ促进BMSCs上调Livin蛋白表达,下调Caspase-9蛋白表达,抑制细胞凋亡有关。

黄芪皂甙Ⅳ对大鼠心肌胶原的影响及其机制

目的研究黄芪皂甙Ⅳ(XGA)对大鼠心肌胶原代谢的影响及机制。方法采用胶原酶-胰蛋白酶消化法分离大鼠心肌成纤维细胞(FBC),建立FBC培养系统,加入不同浓度和不同作用时间的XGA后,检测Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原,基质金属蛋白酶(MMP-1、MMP-2、MMP-9)及其组织抑制物(TIMP-1,TIMP-2)mRNA的表达水平。结扎左冠状动脉前降支制备大鼠心肌梗死模型,存活者随机分为缺血组和XGA组,另设正常组和假手术组;给予XGA组不同剂量(0.5～10.0mg/kg)和不同作用时间(7～28d)的XGA,观察血清Ⅲ型前胶原氨基端肽(P-Ⅲ-NP)、Ⅰ型前胶原羧基端肽(Ⅰ-CTP)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和内皮素(ET)的变化,Masson染色观察心肌组织胶原情况,免疫组化法观察心肌组织MMP-2、MMP-9及TIMP-1的表达。结果给予不同浓度和不同时间的XGA后,心肌成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原,TIMP-1,TIMP-2mRNA的表达水平有所下降,而MMP-1,MMP-2,MMP-9mRNA的表达水平有所上升,且随XGA剂量的增加或作用时间的延长而逐渐下降或上升。给予缺血大鼠不同剂量XGA后,血清P-Ⅲ-NP、Ⅰ-CTP、AngⅡ、ET含量均较缺血组明显下降(0.5mg/kg剂量组除外);同时5,10mg/kg剂量组心肌MMPs/TIMP比值较缺血组明显增加;且随XGA剂量的增加,上述变化逐渐增加。给予缺血大鼠XGA10mg/kg,除血清ET水平和心肌MMPs/TIMP比值在治疗7d后与缺血组变化不大外,余各组血清指标较缺血组明显下降,心肌MMPs/TIMP比值较缺血组明显增加,且随用药时间的延长,上述变化逐渐增大。结论 XGA可减少心肌胶原的形成,其机制可能为抑制胶原的合成、增加胶原的降解。

黄芪皂甙Ⅳ在C57BL/6小鼠肾脏缺血再灌注损伤中的作用

目的:探讨黄芪皂甙Ⅳ对C57BL/6小鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用。方法:将24只SPF级C57BL/6小鼠随机分为四组:对照组(C组)、阴性治疗组(S组)、肾脏缺血再灌注组(I组)、肾脏缺血再灌注损伤治疗组(IA组)。肾脏缺血再灌注损伤模型采用双侧肾动脉夹闭的方法制作。四组小鼠均分离双侧肾动脉,C组:尾静脉给予生理盐水;S组:尾静脉给予黄芪皂甙Ⅳ(2mg/kg);I组:夹闭双层肾动脉,尾静脉给予生理盐水;IA组:夹闭双侧肾动脉,尾静脉给予黄芪皂甙Ⅳ(2mg/kg)。生理盐水和黄芪皂甙Ⅳ每天1次,连续给予7天。用肾功能检测、组织损伤评分、Western blot法检测PUMA的表达,ELISA法检测肾组织TNF-α、IL-6的表达。结果:与C组、S组比较,I组小鼠血清BUN、Scr、炎症因子TNF-α、IL-6及肾组织中PUMA均明显升高(P<0.05);经黄芪皂甙Ⅳ预处理,与I组比较,IA组中小鼠血清中BUN、Scr、炎症因子TNF-α、IL-6及肾组织中PUMA均明显降低(P<0.05)。结论:黄芪皂甙Ⅳ通过阻止PUMA上调和TNF-α、IL-6的表达来保护肾脏缺血再灌注损伤。

黄芪皂甙Ⅳ联合骨髓间充质干细胞移植对大鼠脑缺血/再灌注损伤海马神经元凋亡及相关基因表达的影响

目的探讨黄芪皂甙Ⅳ联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对缺血再灌注大鼠海马神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响。方法实验动物随机分为假手术组、模型组、BMSCs组、BMSCs+黄芪组。采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)模型,BMSCs组、BMSCs+黄芪组分别于建模成功后3h经尾静脉注射已制备好的PKH26标记BMSCs悬液。另外BMSCs+黄芪组于缺血前5min、缺血后12h,24h腹腔注射黄芪皂甙Ⅳ。缺血再灌注72h后,各组进行神经功能评分,应用荧光显微镜观察海马PKH-26标记的移植BMSCs分布,采用免疫组化法和实时荧光定量PCR方法检测大鼠海马Bcl-2、Bax、caspase-3的表达,运用TUNEL方法检测神经元细胞凋亡指数。结果 PKH-26标记的BMSCs在海马有表达。与模型组比较,BMSCs组与BMSCs+黄芪组均能够使大鼠神经功能损害评分降低(P<0.01),BMSCs+黄芪组神经功能恢复最为明显(P<0.05)。模型组Bcl-2、Caspase-3、Bax蛋白表达及细胞凋亡与假手术组差异显著(P<0.01)。与模型组比较,BMSCs+黄芪组和BMSCs组均可下调Caspase-3、Bax蛋白表达和细胞凋亡指数(P<0.05),上调Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/Bax比值(P<0.05),其中以BMSCs+黄芪组作用更为显著(P<0.05)。实时荧光定量PCR显示:与模型组和BMSCs组比较,BMSCs+黄芪组能显著下调Caspase-3、Baxm RNA相对表达(P<0.05),上调Bcl-2mRNA相对表达(P<0.05)。结论黄芪皂甙Ⅳ联合BMSCs移植对脑缺血再灌注神经元细胞凋亡有协同抑制作用,其作用机制可能与黄芪皂甙Ⅳ促进BMSCs抑制Bax、caspase-3表达,增强Bcl-2表达和Bcl-2/Bax比值有关。