黄连大黄药对调控ROS/NF-κB/GSDMD信号通路对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞焦亡的影响

目的基于活性氧(reactive oxygen species,ROS)/核转录因子κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)/消皮素D(gasdermin D,GSDMD)焦亡信号通路探讨黄连大黄药对发挥2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)胰岛β细胞保护作用的分子机制。方法选取自发性T2DM大鼠—Goto-Kakizaki(GK)大鼠构建动物模型,24只符合成模标准的GK大鼠随机分为模型组、二甲双胍组(0.1 g·kg^(-1)·d^(-1))、黄连大黄高剂量组(4.72 g·kg^(-1)·d^(-1))及低剂量组(2.36 g·kg^(-1)·d^(-1)),并随机选取6只正常Wistar大鼠设为正常组,连续灌胃干预8周后采用免疫荧光法检测大鼠胰腺组织胰岛素(insulin,INS)阳性表达,RT-PCR法检测细胞增殖相关细胞周期蛋白D1(cyclin D1,CCND1)、髓细胞瘤病毒癌基因(cellular-myelocytomatosis viral oncogene,c-Myc)mRNA表达,TUNEL染色检测胰岛细胞死亡,流式细胞术检测ROS水平,Western blot法检测NF-κB p65、GSDMD及消皮素D N端片段(gasdermin D-N,GSDMD-N)蛋白的表达,ELISA法检测白介素1β(interleukin 1β,IL^(-1)β)水平。结果与正常组比较,模型组大鼠胰腺组织INS平均光密度值显著降低,CCND1、c-Myc mRNA表达显著下调,TUNEL阳性率、ROS水平和NF-κB p65、GSDMD-N蛋白表达以及IL-1β水平均显著升高(P均<0.01);与模型组比较,黄连大黄低剂量组INS平均光密度值有效升高,CCND1、c-Myc mRNA表达有效上调,TUNEL阳性率、ROS水平以及NF-κB p65、GSDMD-N蛋白表达、IL-1β水平均明显降低(P<0.01,P<0.05),黄连大黄高剂量组仅c-Myc mRNA表达有效上调,NF-κB p65蛋白表达明显降低(P均<0.05)。结论黄连大黄药对可能通过ROS/NF-κB/GSDMD信号通路抑制细胞焦亡,促进增殖进而起到保护T2DM大鼠胰岛β细胞的作用。

黄连大黄肉桂复方及其有效组分配伍对人肝癌细胞株SMMC-7721端粒酶的影响

目的:探索黄连大黄肉桂复方及其有效组分配伍对人肝癌细胞株SMMC-7721端粒酶的影响。方法:将SMMC-7721细胞分为3组:对照组、复方组和组方组,分别给予0.1%二甲基亚砚(DMSO)、大黄黄连肉桂复方及其组分配伍(小檗碱、大黄素和桂皮醛)进行干预,作用24h后,在倒置相差显微镜下观察各组细胞数量及形态;收集细胞采用反转录-实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测端粒酶逆转录酶(hTERT)的mRNA表达;采用免疫印迹技术检测hTERT的蛋白表达。结果:黄连大黄肉桂复方及组方对人肝癌细胞株SMMC-7721的增殖具有一定的抑制作用,对hTERT的mRNA表达均有上调的趋势,而对hTERT的蛋白质表达具有下调的趋势,其中以组方组作用较甚。结论:黄连大黄肉桂复方及其有效组分可抑制人肝癌细胞株SMMC-7721的增殖,这可能与抑制hTERT的蛋白质表达有关。

大黄黄连泻心汤含漱防治放射性口腔粘膜炎临床观察

目的观察大黄黄连泻心汤对放射性口腔粘膜炎的防治作用。方法选择我院行口腔放疗的鼻咽癌、鼻咽部恶性淋巴瘤、口腔肿瘤患者共90例,随机分为对照组30例、治疗组60例。治疗组自放疗之日起用大黄黄连泻心汤煎汤含漱,对照组则用复方呋喃西林液含漱,直到放疗结束;观察两组患者放射性口腔粘膜炎的发生情况。结果对照组轻、中、重度放射性口粘膜炎的发生率分别为100%、83.33%、53.33%,治疗组则分别为100%、36.67%、16.67%。两组中、重度放射性口腔粘膜炎发生率差异有显著性。结论大黄黄连泻心汤含漱对防治放射性口腔粘膜炎有明显效果。

仝小林教授运用黄连不同配伍经验

总结了仝小林教授运用黄连不同配伍,治疗脾瘅、失眠、呕吐、腹泻、心悸、痈疮的经验。仝小林教授以黄连系列方剂为基础,灵活化裁配伍治疗脾瘅、失眠、腹泻、呕吐、心系疾病、皮肤病等疾病,并根据病证、病势,给予不同的剂量和配比。

从六经九分法看热痞证

热痞证在教材中归入太阳病变证,有大黄黄连泻心汤证和附子泻心汤证。通过对症状和方药的分析,认为大黄黄连泻心汤证属阳明病,附子泻心汤证属厥阴病。只有在六经辨证的大框架下,两证才能得到正确认识和充分运用。

基于肠道菌群探讨黄连-大黄药对对2型糖尿病GK大鼠代谢紊乱调控的影响

目的:研究中药黄连-大黄药对对自发性2型糖尿病(T2DM) GK大鼠糖脂代谢紊乱调控的影响,并基于肠道菌群探究其治疗T2DM的潜在作用机制。方法:以GK大鼠构建T2DM模型,将造模成功的30只大鼠随机分配为模型对照组、二甲双胍0.1 g/kg组、黄连-大黄药对1.18、2.36、4.72 g/kg组,另设6只正常Wistar大鼠作为正常对照组;采用血糖测试仪检测大鼠随机血糖(RBG)的动态变化;ELISA法检测空腹血清胰岛素(FINS)、内毒素(ET)、白介素1β(IL-1β)、白介素18 (IL-18)、白介素10 (IL-10)的含量;全自动生化仪检测总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量;16S rRNA扩增子粪便测序检测肠道菌群结构变化;并采用Spearman相关分析差异菌属与上述指标之间的相关性。结果:与正常对照组相比,模型对照组大鼠RBG、TC、TG、LDL-C、ET、IL-1β、IL-18含量均明显升高(P<0.05或P<0.01),而FINS、IL-10水平显著降低(P<0.01),并在门、属分类水平上存在菌群结构失衡;与模型对照组相比,不同剂量黄连-大黄药对干预均不同程度降低了大鼠RBG、TC、TG、LDL-C、ET、IL-1β、IL-18水平,升高了FINS、IL-10水平,其中以2.36、4.72 g/kg组效果较优(P<0.05或P<0.01);调节了菌群结构失衡,在门水平上降低了Firmicutes丰度而升高了Bacteroidetes丰度,增加了B/F比值,并在属水平上增加了Odoribacter、Papillibacter、Akkermansia等益生菌属的相对丰度,且差异菌属的变化与上述代谢指标的改善存在相关性。结论:黄连-大黄药对具有调控T2DM GK大鼠的糖脂代谢紊乱的有益作用,通过调控肠道菌群以降低代谢性内毒素血症和炎症水平可能是其发挥抗糖尿病作用的潜在途径。