脊髓后角AchE和ENK酶组织化学及免疫组织化学联合染色法的应用

脊髓胶状质（SG）是一级传入C纤维的投射区。脑啡肽（ENK）和乙酰胆碱酯酶（AchE）在此处分布也十分丰富。与痛觉传递有关的假说及针刺镇痛的机制都涉及到胶状质的ENK能神经元可能对一级传入纤维终未产生突触前抑制作用。

NDP-黄递酶组织化学方法用于植物组织NOS定位的初步研究

利用NDP-黄递酶组织化学方法鉴定了玉米、绿豆、菜豆胚根中NOS的存在,结果发现胚根 中显著的阳性反应,探究了该方法在植物体NOS研究中的应用前景.

不同温度微波消融肝癌效果的酶组织化学检测

目的比较HE染色和酶组织化学染色对判断微波消融灭活肝癌细胞效果的价值。方法分别用60℃、3min和50℃、3min两种条件的微波消融,依次治疗A、B两组(每组6只)小鼠移植型肝癌,取微波消融前、后的肿瘤组织标本制成石蜡和冰冻切片,进行常规HE染色及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸黄递酶(NADH-diaphorase)化学染色,并在显微镜下观察两种染色情况。结果从HE染色观察,两组小鼠肝癌组织在微波消融后的即刻,其细胞核形态和排列较消融前无明显改变;酶组织化学染色显示,A组肿瘤消融区内的NADH-diaphorase活性均消失,说明癌细胞灭活;B组肿瘤消融区内上述酶活性都呈散在阳性,提示部分癌细胞仍存活;两组肿瘤灭活效果明显不同(P<0.01)。结论HE染色不能评价微波消融对肝癌的即刻灭活效应,酶组织化学染色测定NADH-diaphorase活性能判定微波消融对肝癌的灭活效果。

甲状腺结节微波消融治疗后6个月消融区细胞活性的酶组织化学检测

目的探讨甲状腺结节微波消融治疗术后6个月消融区组织内细胞活性情况。方法选择2017年12月至2018年9月甲状腺结节微波消融治疗术后6个月进行消融区粗针穿刺活组织检查病理评估的患者20例24个消融区。使用切割式活检针分别对消融区中央域及边缘域进行粗针穿刺活组织检查,取得标本条置入液氮制成冰冻切片。采用酶组织化学染色法检测细胞内琥珀酸脱氢酶(SDH)和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸黄递酶(NADPH-d)的活性,并与常规病理切片H-E染色观察到的细胞形态及组织结构对比。结果微波消融术后6个月24个消融区的中央域及边缘域均成功取材。消融区中央域SDH及NADPH-d酶组织化学染色情况一致性好,阴性率均为95.83%(23/24)。消融区边缘域SDH及NADPH-d酶组织化学染色情况一致性好,阴性率均为91.67%(22/24)。23个中央域及22个边缘域的H-E染色切片均显示为红染无结构的大片坏死组织;1个中央域、2个边缘域H-E染色切片显示部分为坏死结构、部分为纤维组织增生,纤维组织增生处与酶组织化学染色阳性区域位置一致。结论微波消融术后6个月甲状腺结节消融区组织符合凝固性坏死改变,仍处于失活状态,酶组织化学染色结合H-E染色能够对陈旧消融区做出较为客观的评价。

四种蝗虫脑一氧化氮合酶组织化学比较研究

运用NADPH黄递酶组织化学法对笨蝗、稻蝗、黄胫小车蝗和云斑车蝗脑一氧化氮合酶进行了比较研究.发现四种蝗虫视叶的神经板层、髓质和视小叶都呈阳性反应,蕈形体球形细胞(Kenyon cells)都呈阴性反应,蕈形体的蕈体冠和小叶部有外来阳性神经纤维支配.稻蝗、黄胫小车蝗和云斑车蝗中央复合体的扇形体表现出阳性反应,只有黄胫小车蝗和云斑车蝗的椭圆体有阳性反应,笨蝗中央复合体未发现阳性反应.四种蝗虫的中脑触角叶都有强的阳性反应.稻蝗、黄胫小车蝗和云斑车蝗前脑前内侧神经分泌细胞部的部分细胞呈现阳性反应.

牙髓淋巴管网的酶组织化学研究

目的 :观察实验动物和人的牙髓淋巴管网的结构与分布特点。方法 :将非脱钙组织和用EDTA溶液脱钙的组织冰冻切片 ,分别应用光镜和电镜HE、5′ Nase单染和 5′ Nase ALPase双重染色作比较观察。结果 :HE染色切片光镜观察仅见管腔样结构 ;5′ Nase单染可见呈深棕色、形状不规则的淋巴管 ;而在同一切片上 5′ Nase ALPase双重染色观察到呈深棕色的淋巴管和呈蓝色的血管。扫描电镜和透射电镜观察牙髓的组织切片 ,见到丰富的呈 5′ Nase染色强阳性的淋巴管 ,5′ Nase反应产物存在于淋巴上皮细胞表面 ,牙髓中央部淋巴管较外围的成牙本质细胞层丰富。结论 :5′ Nase

沙蚕一氧化氮合酶的NADPH-d组织化学研究

用依赖还原型辅酶Ⅱ的黄递酶(NADPH d)组织化学方法研究了环节动物门多毛纲动物沙蚕(Nereis)脑神经节及部分外周器官中NADPH d阳性反应的分布.结果表明,沙蚕脑神经节中有少量阳性反应细胞及部分呈较强阳性反应的纤维束,触角中央有一束呈强阳性反应的纤维束通向脑神经节.在口前叶、口腔上皮、咽部上皮、体表皮肤中都呈现一定阳性反应.这表明一氧化氮合酶在沙蚕的神经系统和外周器官中都有分布,可以推测一氧化氮作为一种重要的信息分子参与了沙蚕多种生理调节过程.

人小肠粘膜内神经元的组织学与组织化学观察

一般认为,胃肠道粘膜内不存在神经元,粘膜神经丛仅由神经纤维组成。本文使用常规组织学方法和 NADH 黄递酶组化法证明在人小肠粘膜内可见到单个的神经元或由2～5个神经元组成的神经节。神经元胞体大小不等,形态多样,除梭形、卵圆形和不规则形外,还有呈扁平形的。粘膜内神经元多数位于固有层内,常紧贴粘膜肌;粘膜肌层内也可见到神经元。我们认为,小肠粘膜内神经元是肠神经系中粘膜神经丛的一部分。

人小肠粘膜神经元的组织化学研究

在人小肠粘膜内可见NADH黄递酶阳性细胞,并有GFAP阳性细胞紧贴.大多数NADH黄递酶阳性细胞呈AChE阳性反应.此类细胞形态多样,有扁平形、梭形、卵圆形或不规则形.它们多数呈单个分散存在,少数由2个以上的细胞组成细胞群.这些细胞主要存在于紧贴粘膜肌的固有层内,有一些在粘膜肌层内.

大鼠空肠肌间神经丛NADPH－黄递酶的光镜及电镜观察

用ＮＡＤＰＨ－黄递酶（ＮＤＰ）组织化学染色及电镜技术对正常成年大鼠空肠肌间神经丛的ＮＤＰ分布进行观察。结果显示，ＮＤＰ阳性产物为蓝色，分布于神经元胞浆中，核不着色。电镜下，ＮＤＰ阳性产物为中等电子密度，呈斑块或点状均匀分布或散在于神经元胞浆中，常靠近核膜和粗面内质网，但未发现与特定的细胞器或突触小泡有特殊的定位关系。

NADPH——黄递酶在饥饿大鼠肝脏内的分布及组化观察

作者用β—NADPH(还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸)黄递酶组织化学法,观察了正常大白鼠、饥饿大白鼠肝脏组织内的 NDP 黄递酶分布。结果显示,在饥饿大鼠的肝细胞、肝枯否氏细胞及肝血窦内皮细胞都有 NDP 阳性反应产物。NDP 呈细颗粒状,均匀分布于细胞质内。当饥饿延长到48小时以后,NDP 颗粒染色加深。以上提示,饥饿能诱导大鼠肝脏产生 NO(一氧化氮)。推测 NO 参与生理状态下肝脏的物质代谢调解。

单眼视觉剥夺幼猫外侧膝状体中一氧化氮合酶变化的组织化学研究

目的 观察一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)在正常和单眼视觉剥夺幼猫外侧膝状体中的变化 ,探讨一氧化氮 (nitricoxide ,NO)在弱视形成过程中的作用。方法 用尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸黄递酶 (nicotinamidadeninedinucleotidephosphate diaphorase,NADPH diaphorase)组织化学染色法观察正常组和单眼视觉剥夺组幼猫外侧膝状体中NOS的变化。结果 (1)正常组幼猫外侧膝状体各层中无NOS阳性细胞 ,但可见NOS阳性纤维 (轴突和末梢 ) ;(2 )单眼视觉剥夺组幼猫外侧膝状体各层中可见NOS阳性纤维 (轴突和末梢 )。两组幼猫外侧膝状体各层NOS阳性纤维 (轴突和末梢 )NADPH diaphorase染色无明显差别。 (3)单眼视觉剥夺组幼猫外侧膝状体的非剥夺层中可见条状分布的NOS阳性细胞 ,平均密度为 (16 80± 2 6 4 )个 /mm2 ,平均面积为 (44 5± 96 ) μm2 /个 ,无长树突 ,胞浆染色重而细胞核无染色 ;剥夺层偶见NOS阳性细胞 ,平均密度为 (1 80± 1 4 7)个 /mm2 ,平均面积为 (30 7± 75 )μm2 /个。

SYBR Green染色法检测肺癌及癌旁组织端粒酶活性

目的 研究TRAP SYBRGreen染色法定性检测端粒酶活性的方法及端粒酶活性在肺癌及癌旁组织中的表达 ,并探讨端粒酶的表达与P5 3之间可能的关系。方法 采用TRAP SYBRGreen染色法检测 36例肺癌、36例癌旁组织、8例肺部良性病变组织和A5 49肺腺癌细胞株端粒酶活性的表达 ,并利用免疫组化技术检测肺癌组织P5 3蛋白表达水平。结果 TRAP SYBRGreen染色法可检测出5个A5 49肺腺癌细胞所表达端粒酶活性。 83 3% (30 36 )的肺癌组织 ,3 8肺部良性病变组织 ,19 4%(7 36 )的癌旁组织表达端粒酶活性。端粒酶活性的表达与肺癌组织的病理类型、肿瘤大小、临床分期无相关性。在 30例表达端粒酶活性的肺癌组织中P5 3呈现过度表达的占 80 % (2 4 30 ) ,端粒酶活性与P5 3蛋白表达水平之间具有相关关系。结论 TRAP SYBRGreen染色法是一种较为灵敏、快速、简便的定性检测端粒酶活性的方法 ;端粒酶活性的定性检测可作为肺部恶性肿瘤诊断的辅助指标之一 ;端粒酶与P5 3之间的关系有待进一步阐明。

电针对脊髓损伤后一氧化氮合酶表达的影响

目的探讨电针对脊髓损伤后一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)基因及其蛋白表达的影响。方法采用改良的Allen's垂击法致大鼠脊髓(T10)中度损伤,损伤后即刻进行督脉电针治疗,于术后1、4、24、48h处死动物,分别用RT-PCR法和NADPH-黄递酶组织化学染色法测定各型NOSmRNA及其蛋白的表达,并进行图像定量统计学分析。结果电针可不同程度地降低nNOSmRNA、iNOSm-RNA的表达,降低NOS活性。结论电针早期治疗可能通过降低一氧化氮(NO)的形成减轻脊髓继发性损伤,有一定的神经保护作用。

兔急性胰腺炎并发十二指肠粘膜损伤与一氧化氮合酶改变的关系

目的:探讨急性胰腺炎并发十二指肠粘膜损伤与一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)改变的关系。方法:用胰管结扎及加压注射法建立大白兔急性胰腺炎模型,采用黄递酶组织化学染色法观察与比较两组动物胰腺及十二指肠组中NOS的变化。结果:经Winslow法测定血清淀粉酶分析及组织学检查,急性胰腺炎模型建立;经NADPH-d染色表明:实验组NOS染色强度明显高于对照组。结论:一氧化氮(nitric cxide,NO)在急性胰腺炎并发十二指肠粘膜损伤的病变过程中起重要的介导作用。

大鼠翼腭神经节、耳神经节神经元一氧化氮合酶与神经肽Y的共存

目的:为进一步阐明一氧化氮(NO)与神经肽Y(NPY)在翼腭神经节、耳神经节支配机制中的作用提供形态学资料。方法:用尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶(NADPH-d)组织化学方法与免疫组织化学方法结合技术观察翼腭神经节、耳神经节中一氧化氮合酶(NOS)与NPY阳性神经元分布及共存关系。结果:翼腭神经节、耳神经节中有NOS、NPY单标神经元和NOS-NPY双标神经元,以双标神经元最多,NPY单标神经元最少。3种神经元在神经节中无区域特异性的散在分布。两神经节中,各种神经元分布特点相似。结论:NO可能对翼腭神经节、耳神经节节后神经纤维末梢NPY的释放起重要作用。

鹅细小病毒在雏鹅体内分布的免疫组织化学检测

采用间接免疫酶组织化学染色法对14日龄雏鹅人工感染鹅细小病毒后不同时间段病毒抗原在体内的定位及分布情况进行了检测,同时应用图像分析软件对免疫组织化学图像中的抗原强度进行了定量分析。结果显示,感染后第1天到第21天,在心、肺、脾、肝、法氏囊、胸腺、腺胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、食管12种组织器官中检测到了病毒抗原。其中感染后第5天的感染组织最广泛,抗原染色强度最高,在检测的组织中以空肠的检出率最高。病毒抗原广泛分布于肠道的上皮细胞、腺上皮细胞,肺泡壁细胞和肾小管的上皮细胞内。始终未能从大脑、胰腺和骨骼肌中检测到鹅细小病毒。可见该病毒感染雏鹅后存在于患病鹅的大部分组织器官内,进一步证实该病毒是一种泛嗜性病毒。