稳心草黄酮类化合物对肺动脉平滑肌细胞增殖及其TGF-β表达影响的实验研究

目的:研究稳心草黄酮类化合物对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMs)增殖和TGF-β表达水平的影响,探讨其防治肺动脉高压的疗效及作用机制。方法:组织帖块法培养大鼠肺动脉平滑肌细胞,MTT法确定高、中、低剂量分组及作用时间。MTT法进行细胞计数,流式细胞仪进行细胞周期测定,ELISA法进行细胞培养夜TGF-β含量测定。结果:贴块培养的细胞经电镜鉴定为动脉平滑肌细胞;台盼蓝染色倒置显微镜观察表明细胞生长状态良好。黄酮类化合物高、中剂量组细胞计数明显减少、细胞周期G0/G1期细胞增多,S期、G2/M期细胞减少;细胞TGF-β含量明显降低,与空白对照组比较有统计学意义(P<0.05);低剂量组与空白对照组比较无统计学意义(P>0.05)。结论:稳心草黄酮类化合物可抑制大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖,延缓细胞周期进程,调节细胞分泌TGF-β水平。

豹皮樟总黄酮抗炎作用及部分机制研究

目的 研究豹皮樟总黄酮 (LCTF)的抗炎作用及部分机制。方法 采用二甲苯诱导的小鼠耳肿胀、角叉菜胶诱导的大鼠足爪肿胀、棉球诱导的大鼠肉芽肿和佛氏完全佐剂诱导的大鼠佐剂性关节炎模型观察LCTF的抗炎作用 ;采用腹腔巨噬细胞培养并诱导生成IL 1的方法探讨LCTF抗炎作用机制。结果 LCTF对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀、角叉菜胶诱导的大鼠足爪肿胀、棉球诱导的大鼠肉芽肿和大鼠佐剂性关节炎具有抑制作用 ,对AA大鼠腹腔巨噬细胞IL 1的生成有抑制作用。结论 豹皮樟总黄酮具有较强的抗炎作用 ,抗炎机制与抑制IL 1的生成有关。

山香圆总黄酮对免疫功能低下小鼠免疫功能的影响

目的探讨山香圆总黄酮(TFS)对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法在腹腔注射环磷酰胺(Cy)诱导小鼠免疫低下模型的基础上,采用碳廓清实验检测小鼠巨噬细胞的吞噬功能;分光光度法测定血清及脾细胞中溶血素水平;二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应,并用流式细胞仪检测T细胞亚群。结果TFS(240、480mg/kg,ig)可明显提高Cy诱导免疫功能低下小鼠的吞噬指数a值和校正指数K值、增加Cy诱导免疫功能低下小鼠脾细胞和血清中溶血素水平,增强Cy诱导免疫低下小鼠的迟发性变态反应。进一步研究发现,TFS(240mg/kg,ig)可明显提高CD4+、CD8+细胞数,使CD4+/CD8+细胞比值上升。结论TFS能明显改善Cy致免疫功能低下小鼠的免疫功能,其免疫调节作用与调节T细胞亚群有关。

野菊花总黄酮对四氯化碳致急性肝损伤小鼠的保护作用

目的观察野菊花总黄酮(TFC)对CCl4致小鼠急性肝损伤的保护作用及部分机制。方法用TFC(125、250、500 mg/kg)连续给小鼠灌胃4后,腹腔注射0.1%CCl4(10ml/kg)致小鼠急性肝损伤模型,测定不同剂量的TFC对肝损伤血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)活性、肝匀浆中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响;并通过放射免疫分析法测定肝匀浆中细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNFα-)的表达量;同时对肝组织进行病理学检查。结果TFC能降低CCl4致小鼠急性肝损伤血清ALT、AST值的升高,降低肝匀浆中MDA含量,增强SOD的活性,TNFα-表达降低,减轻CCl4对肝组织的病理损伤。结论TFC对CCl4致小鼠急性肝损伤具有一定的保护作用,其机制可能主要与清除自由基、抑制脂质过氧化作用、抑制TNFα-表达有关。

杜鹃花总黄酮对心肌缺血损伤的保护作用

目的观察杜鹃花总黄酮(TFR))对心肌缺血性损伤的保护作用及其机制。方法小鼠心肌缺血采用sc异丙肾上腺素(Iso)法,观察心电图ST段的变化,测定小鼠血清和心肌中的丙二醛(MDA)含量及血清中乳酸脱氢酶(LDH)活性;Langendorff法离体大鼠心脏缺血30min后再灌30min,测定心脏的冠脉流量、心肌中的MDA、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)及一氧化氮(NO)等的变化。结果TFR25、50mg/kg可以抑制Iso引起的小鼠心电图ST段的抬高和抑制心肌中MDA的含量的升高,TFR50mg/kg降低血清中LDH和MDA的增高;TFR20、40、80mg/L抑制离体心脏冠脉流量的减少和心肌中SOD活性的下降。TFR80mg/L能抑制心肌中MDA含量的增高和NOS活性的降低,TFR40mg/L抑制心肌中的NO含量下降。结论TFR对心肌缺血和缺血再灌注损伤有一定的保护作用,其作用机制可能与抗自由基及增加NO产生有关。

野菊花总黄酮抗炎作用及部分机制

目的探讨野菊花总黄酮(TFC)的抗炎作用及部分机制. 方法采用二甲苯诱导的小鼠耳肿胀、角叉菜胶诱导的大鼠足肿胀、棉球诱导的大鼠肉芽肿模型观察TFC的抗炎作用;分别采用放射免疫法(RIA)和反相高效液相色谱法(RP-HPLC)检测TFC对大鼠腹腔巨噬细胞产生前列腺素E2(PGE2)和白三烯B4 (LTB4)的影响. 结果 TFC对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀、角叉菜胶诱导的大鼠足爪肿胀、棉球诱导的大鼠肉芽肿具有抑制作用;TFC在0.05～50 mg/L范围内能够浓度依赖性地抑制PMФ中PGE2和LTB4的产生. 结论 TFC具有较强的抗炎作用且可能与其影响PGE2和LTB4的生物合成有关.

黄蜀葵花总黄酮抗感染性口腔粘膜溃疡及体外抗菌作用

目的 研究黄蜀葵花总黄酮（Total flavone of abelmoschus manihot Lmedic，TFA）对感染性豚鼠口腔粘膜溃疡的治疗作用及体外抗菌作用。方法 采用感染性豚鼠口腔粘膜溃疡模型观察黄蜀葵花总黄酮的治疗作用；采用二倍稀释法观察黄蜀葵花总黄酮的最小抑菌浓度MIC。结果 黄蜀葵花总黄酮能显著缩短感染性豚鼠口腔粘膜溃疡的愈合时间和50％缩小时间；体外抗菌结果显示，TFA对表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度（MIC）为3．125g·L^-1，对白色念珠菌的抑菌浓度为1．562～3，125g·L^-1。结论 黄蜀葵花总黄酮对感染性口腔溃疡有一定疗效。

黄蜀葵花总黄酮体外抗单纯疱疹病毒作用

目的研究黄蜀葵花总黄酮(Total flavone ofabelm oschus manihot L m edic,TFA)的体外抗病毒作用。方法在Hep-2细胞上传代单纯疱疹病毒Ⅰ型(Herpes simp lex virus-Ⅰ,HSV1)和单纯疱疹病毒Ⅱ型(Herpes simp lex virus-Ⅱ,HSV2)后滴定其50%组织细胞感染剂量(50%tissue cell infection dose,TC ID50),测定TFA的半数有效量(50%inh ib ition concentration,IC50)值及治疗指数(TI)值。结果TFA对HSV1和HSV2的IC50分别为1.01±0.39 mg.L-1和1.21±0.42 mg.L-1;TFA对HSV1和HSV2的TI值分别为12.09±2.70和10.83±1.44。结论TFA对HSV1和HSV2均有一定的抑制病毒作用,而对HSV1和HSV2病毒之间作用没有差别。

银杏叶总黄酮对大鼠缺血后脑细胞凋亡的影响(英文)

背景:银杏叶总黄酮有抗自由基的作用,但其对缺血后脑细胞凋亡的影响尚不十分清楚。目的:研究银杏叶总黄酮对脑缺血诱发的细胞凋亡的抑制作用。设计:以实验动物为观察对象的完全随机设计,对照实验。单位:一所大学的药理学教研室。材料:SD大鼠24只,清洁级,体质量(250±50)g,雌雄各半,实验动物合格证号,皖医实准第01号,随机分为4组,分别为假手术组,模型对照组,银杏叶总黄酮40mg/kg组,银杏叶总黄酮80mg/kg组。方法:实验于2001-10/2002-01在安徽医科大学药理学教研室完成。采用双侧颈总动脉结扎法造成大鼠不完全脑缺血;采用TUNEL法和电镜法观察细胞凋亡;用二苯胺试剂法测定DNA片段含量并测定脑水肿。主要观察指标:银杏叶总黄酮用药后脑缺血致脑皮质细胞凋亡的影响,银杏叶总黄酮用药后脑缺血后DNA片段百分率的影响。结果:结扎双侧颈总动脉可显著诱导脑皮质细胞凋亡,银杏叶总黄酮80mg/kg可显著抑制脑水肿(P<0.05)并减少脑皮质中细胞凋亡数(P<0.01),同时对凋亡细胞超微结构变化有改善作用;银杏叶总黄酮40,80mg/kg可抑制脑缺血诱导的DNA片段的增多(P<0.05,P<0.01)。结论:银杏叶总黄酮对缺血诱导的脑皮质细胞凋亡有抑制作用,并改善凋亡细胞超微结构变化,可减轻缺血组织脑水肿发生并抑制脑缺血诱导的DNA片段的增多?

禹州漏芦总黄酮对类风湿关节炎大鼠治疗机制研究

目的：研究禹州漏芦总黄酮（FELT）对类风湿关节炎大鼠模型的治疗作用及病理机制的影响。方法：50只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、空白对照组和FELT 50 mg／kg组、100 mg／kg组、150 mg／kg组，每组10只。空白对照组采用完全弗氏佐剂于每只大鼠右后足趾皮内注射0．1 mL致炎的方法制备，正常对照组大鼠右后足趾皮内注射0．1 mL磷酸盐缓冲液。采用大鼠关节炎评分法和足爪肿胀评分法评价FELT对类风湿关节炎大鼠的治疗作用，采用实时定量PCR分别检测FELT灌胃治疗对类风湿关节炎大鼠滑膜组织中纤维连接蛋白和基质金属蛋白酶3 mRNA表达的影响，对类风湿关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞（ FLS ）中促凋亡基因Bcl－2相关X蛋白（ Bax ）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（ caspase 3）、抗凋亡基因Bcl－2表达的影响。结果：类风湿关节炎大鼠经FELT 50、100、150 mg／kg 3个剂量灌胃治疗后，其关节炎评分和足爪肿胀评分较空白对照组均显著减少（均P＜0．05）。空白对照组和FELT 50、100、150 mg／kg 3个剂量组关节滑膜组织中纤维连接蛋白平均相对表达量分别为2．53和1．80、1．76、1．67（均P＜0．05）；基质金属蛋白酶3平均相对表达量分别为2．67和1．69、1．46、1．45（均P＜0．05）；FLS中Bax平均相对表达量分别为0．30和0．56、0．58、0．60（均P＜0．05） ，caspase 3平均相对表达量分别为0．29和0．54、0．56、0．59（均P＜0．05） ，Bcl－2平均相对表达量分别为4．04和2．20、2．08、2．08（均P＜0．05）。结论：FELT可以改善类风湿关节炎大鼠关节炎的严重程度，其机制可能与促进FLS凋亡、抑制滑膜组织异常增殖有关。

映山红总黄酮的镇痛作用

目的研究映山红总黄酮(TFR)的镇痛作用。方法TFR(50、100、200mg/kg.d-1,3d)ig,采用小鼠扭体法、小鼠福尔马林实验、小鼠温浴法及小鼠热板法。结果ig TFR(100、200mg/kg)可明显抑制小鼠扭体反应数及小鼠福尔马林实验Ⅱ相反应,ig100mg/kg可延长小鼠热水缩尾时间,ig200mg/kg可延长小鼠热板舔足反应潜伏期。icv TFR(5、10mg/kg)可明显抑制小鼠扭体反应数。结论TFR具有明显的镇痛作用,而且其镇痛机制至少部分有中枢参与。

野菊花总黄酮体外对佐剂性关节炎大鼠的免疫调节作用

目的探讨野菊花总黄酮(TFC)体外对佐剂性关节炎(AA)大鼠免疫功能的影响。方法采用AA大鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞体外给药培养,并检测一些免疫指标(ConA增殖反应、IL-1、IL-2)。结果TFC能提高AA大鼠过低的脾淋巴细胞增殖反应和IL-2水平,对AA大鼠腹腔巨噬细胞产生过高的IL-1水平具有抑制作用。结论TFC对AA大鼠免疫功能具有明显的调节作用。

黄蜀葵总黄酮对脑卒中后抑郁模型大鼠行为学及血浆ACTH、CORT浓度的影响

目的探讨黄蜀葵总黄酮(TFA)对脑卒中后抑郁(PSD)大鼠模型行为学及血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇(CORT)浓度的影响。方法采用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型,在此基础上综合孤养、应激处理复合制备PSD大鼠模型。观察TFA对PSD大鼠开野行为和糖水消耗试验等行为学指标变化,采用放射免疫方法检测大鼠血浆ACTH和CORT的水平。结果TFA可增加PSD大鼠的水平与垂直运动得分,增加糖水消耗量,降低血浆ACTH和CORT的水平。结论TFA具有抗PSD作用,其机制可能与其调节PSD大鼠血浆ACTH和CORT的水平有关。

映山红总黄酮对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用

目的研究映山红总黄酮(TFR)对脑缺血及再灌注损伤的保护作用。方法采用线栓法复制局灶性脑缺血(MCAO)/再灌注损伤模型,评价动物行为功能,测定脑梗死范围,脑组织中含水量和血清中超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量。结果在局灶性脑缺血/再灌注损伤中,TFR(50.0、25.0、12.5mg/kg)连续灌胃给药5d能缩小缺血/再灌注后脑梗死体积,改善神经功能状态,降低脑含水量;减少血清中MDA、NO含量,升高SOD活性,降低LDH的活性。结论TFR对局灶性脑缺血/再灌注损伤有保护作用,其机制可能与抗自由基和脂质过氧化抑制NO的释放有关。

豹皮樟总黄酮对佐剂性关节炎大鼠炎症免疫功能的影响

目的研究豹皮樟有效部位总黄酮(LCTF)对佐剂性关节炎(AA)大鼠炎症免疫功能的影响,探讨其治疗作用的机制。方法SD大鼠左后足跖皮内注射0·1ml,弗氏完全佐剂复制AA模型;大鼠免疫后12d开始分别灌胃LCTF66·5、133、266mg/kg,连续给药12d。组织块培养法分离培养大鼠滑膜细胞,透射电镜分析滑膜细胞内具分泌功能细胞器的形态学改变;放射免疫测定法检测腹腔巨噬细胞、滑膜细胞分泌IL-1β水平;探讨LCTF作用机制。结果LCTF133、266mg/kg可恢复A、B型滑膜细胞的分泌功能;纠正AA大鼠腹腔巨噬细胞、滑膜细胞过高分泌IL-1β的功能。结论LCTF可恢复AA大鼠滑膜细胞的形态及改善腹腔巨噬细胞、滑膜细胞过高的分泌炎性介质的功能是其治疗AA的途径之一。

黄芩苷对巨噬细胞分泌TGF-β1的影响

目的:研究黄芩苷对体外培养的人巨噬细胞TGFβ1表达的影响。方法:体外分离培养人巨噬细胞,将不同浓度的黄芩苷加入培养液,48h后用RT-PCR、Western blot技术检测各组细胞中TGFβ1表达情况。结果:与阴性对照组比较,不同浓度的黄芩苷均可使巨噬细胞中TGFβ1的表达量显著增加,其中,1.0μg/ml浓度组的黄芩苷作用最为显著。结论:黄芩苷可以促进巨噬细胞分泌TGFβ1。

三羟基异黄酮对人多发骨髓瘤细胞的增殖及细胞内NF-κB的影响

目的:研究4′,5,7三羟基异黄酮(Genistein)对人多发骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞的增殖及NF-κB表达的影响。方法:体外培养人多发骨髓瘤细胞株XG1,依据剂量梯度分别给予Genistein,用噻唑蓝染色法(MTT)观察不同药物浓度的Genistein对MM细胞的增殖影响;应用10μg/mL Genistein处理XG1细胞,用免疫组化法观察Genistein处理前后细胞内NF-κB的表达情况。结果:Genistein作用XG1细胞72h,随浓度增加,细胞增殖逐渐下降,半数抑制浓度在11μg/mL左右;Genistein使NF-κB在XG1细胞内重新分布,胞核内NF-κB表达下降。结论:Genistein可能通过下调骨髓瘤细胞核中NF-κB表达来抑制骨髓瘤细胞的增殖。

4,5,6-三羟基异黄酮对原代培养大鼠成骨细胞增殖、分化、钙含量及矿化功能的影响(英文)

背景:骨质疏松症是人类老年时生活质量下降和寿命缩短的主要原因之一,而其发生与成骨细胞和破骨细胞的功能失偶联有关,因而在细胞水平上观察药物对成骨细胞功能的调整作用是评价骨质疏松症防治药物药效的方法之一。目的:了解4,5,6-三羟基异黄酮(Genistein)对体外培养成骨细胞的作用。设计:以大鼠成骨细胞为研究对象的随机对照单盲研究。单位:一所市级医院的检验科。材料:本实验于2001-02/2001-12在北京中日友好医院核医学科同位素室完成。选择10只出生24h的SD大鼠,(购自北京维通利华实验动物技术有限公司,许可证编号为SCXK11-00-0008),实验室级别为SPF级。方法:取小鼠头盖骨成骨细胞进行体外培养,应用四氮唑盐(MTT)法、对硝基苯磷酸盐法、原子吸收分光光度法及茜素红染色方法观察Genistein对体外培养成骨细胞的增殖、碱性磷酸酶表达、基质钙含量及矿化结节形成的影响。主要观察指标:形态观察、增值率测定、碱性磷酸酶染色、细胞基质钙含量测定、茜素红染色显示矿化结节数。结果:Genistein刺激成骨细胞的增殖,提高了碱性磷酸酶活性,细胞基质钙含量及矿化结节形成的数量增大。结论:Genistein具有刺激体外培养成骨细胞增殖、分化成熟及促进矿化的作用。

5，7-二甲氧基黄酮抑制人胰腺癌PANC-1细胞系胰腺癌干细胞特性的体外研究

【目的】探讨5,7二甲氧基黄酮（DMF）对人胰腺癌干细胞特性的影响。【方法】体外培养人胰腺癌PANC1细胞系得到微球细胞，流式细胞仪检测；划痕法分析不同浓度DMF对胰腺癌干细胞自我更新、体外细胞迁移和运动能力影响； Western Blot分析不同浓度DMF干预后PANC1细胞系胰腺癌干细胞表面标志物CD133、CD44、ALDH1、Bmil、Ecad、Ncad蛋白表达变化。【结果】DMF以浓度依赖方式抑制人胰腺癌PANC1细胞系胰腺癌干细胞肿瘤球形成能力及抑制细胞体外迁移能力；DMF以浓度依赖方式使胰腺癌干细胞标志物CD133、CD44、ALDH1、Bmi1、Ncad蛋白表达水平降低,而Ecad蛋白水平升高。【结论】DMF以浓度依赖方式显著抑制人胰腺癌PANC1细胞系胰腺癌样干细胞自我更新、分化后细胞迁移、细胞标志物CD133、CD44、ALDH1、Bmi1、Ncadherin蛋白表达，而增强Ecadherin蛋白表达。

银杏叶总黄酮体内抗肿瘤作用及抗氧化活性研究

【目的】探讨银杏叶总黄酮体内抗肿瘤作用及抗氧化活性。【方法】选取健康的纯昆明种小鼠72只，随机分为6组，每组12只，分别为①空白对照组；②模型组；③环磷酰胺组；④低剂量黄酮组；⑤中剂量黄酮组；⑥高剂量黄酮组。利用S180瘤细胞悬液进行实体瘤造模，比较各组平均瘤重和抑瘤率的差异，各组小鼠瘤组织中Bcl-2和Bax表达水平的差异，小鼠血清／肝脏中抗氧化相关物质含量的差异。【结果】银杏叶总黄酮具有明显的抑制瘤生长的作用，且高剂量黄酮组的平均瘤重（0．723±0．215）g低于中剂量黄酮组（0．854±0．312）g和低剂量黄酮组（0．917±0．231）g，且差异有显著性（P〈0．05）；高剂量黄酮组的Bcl-2表达低于中剂量和低剂量黄酮组，高于环磷酰胺组；高剂量黄酮组的Bax表达高于中剂量和低剂量黄酮组（0．152±0．023），低于环磷酰胺组，且差异均有显著性（P〈0．05）；高剂量黄酮组的总抗氧化能力（T—AOC）、过氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）高于中剂量和低剂量黄酮组，高剂量黄酮组的丙二醛（MDA）低于中剂量和低剂量黄酮组，且差异均有显著性（P〈0．05）。【结论】银杏叶总黄酮有明显的抗肿瘤和抗氧化作用。