黄蜀葵花黄酮类成分提取、纯化工艺优化

目的优化黄蜀葵花黄酮类成分提取、纯化工艺。方法在单因素试验基础上,以乙醇体积分数、提取时间、料液比为影响因素,黄酮类成分(芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、棉皮素-8-O-葡萄糖苷、杨梅素、槲皮素-3′-O-葡萄糖苷、槲皮素)含量为评价指标,Box-Behnken响应面法优化提取工艺。再以树脂型号、洗脱剂(乙醇)体积分数、上样质量浓度、洗脱体积为影响因素,绘制泄漏曲线,优化大孔吸附树脂纯化工艺。结果最佳提取工艺为15倍量70%乙醇提取2次,每次60 min;最佳纯化工艺为每1 g AB-8型树脂上样0.38 g生药,上样质量浓度1.0 g/mL,60%乙醇洗脱3 BV,黄酮含量达51.78%。结论该方法稳定合理,简便可行,可为提取、纯化黄蜀葵花黄酮类成分奠定基础。

HPLC法同时测定不同基原甘草中8种黄酮类成分的含量

目的:建立一种同时测定甘草中芹糖甘草苷、甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷、甘草查尔酮B、甘草素、异甘草素、甘草查尔酮A含量的方法,并对乌拉尔甘草、光果甘草与胀果甘草药材中上述成分含量进行测定。方法:采用InertSustain TM ODS-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈0.1%乙酸水溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为276 nm和360 nm,柱温为30℃。结果:芹糖甘草苷、甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷在10~500μg/mL范围内具有良好的线性关系(r≥0.9997),甘草查尔酮B、甘草素、异甘草素、甘草查尔酮A在1~50μg/mL范围内线性关系良好(r≥0.9998),平均加样回收率为98.73%~100.54%,精密度、稳定性、重复性试验的相对标准偏差(RSD)均小于3%。芹糖甘草苷、甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素在乌拉尔甘草中的含量最高,甘草查尔酮A和甘草查尔酮B在胀果甘草中的含量最高。结论:本研究建立了同时测定甘草药材中8种黄酮类成分的HPLC方法,该方法简便、高效、准确,可为甘草药材的质量控制提供有益参考。

红花中的黄酮类化学成分及其药理作用研究进展

红花为菊科属植物红花Carthamus tinctorius L.的干燥花,黄酮类化学成分是红花特征性和主要的活性成分,依据结构类型主要分为四类,包括黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、醌式查耳酮类。现代药理学研究表明,红花黄酮类化学成分药理作用广泛,如降低血液粘度、减轻血管内皮炎症损伤、抑制炎症因子释放、改善气道重塑、抑制心肌细胞凋亡、保护中枢神经、保肝等,对多系统疾病具有治疗作用。本文通过检索国内外文献,对红花黄酮类化学成分及其药理作用的研究进展进行综述,为红花的进一步研究提供参考。

林下人参不同部位黄酮类成分分析

为明确林下人参不同部位黄酮类成分含量,提高人参的综合利用水平。运用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)技术分析了林下栽培4年人参的根、茎、叶的黄酮类成分,并通过代谢组学的方法筛选出不同部位的差异代谢物。结果表明:林下人参根、茎、叶中共检测出92种黄酮类代谢物,包括41种黄酮醇、13种黄酮化合物、11种二氢黄酮、7种花青素、5种黄酮碳糖苷、5种异黄酮、5种查耳酮、4种二氢黄酮醇、1种其他类黄酮;并通过主成分分析(Principal Component Analysis,PCA)和正交偏最小二乘判别分析法(Partial Least Squares-Discriminant Analysis,PLSDA)筛选出27种差异代谢物,其中15种代谢物在林下人参各部位的含量从高到低依次为茎>叶>根,5种代谢物在林下人参各部位的含量从高到低依次为根>茎>叶,4种代谢物在林下人参各部位的含量从高到低依次为叶>根>茎,2种代谢物在林下人参各部位的含量从高到低依次为叶>茎>根,1种代谢物在林下人参各部位的含量从高到低依次为茎>根>叶。总的来说,人参不同部位黄酮类成分存在差异,可为人参的进一步研究与合理应用提供参考。

箭叶淫羊藿叶片不同发育时期黄酮类成分形成与元素含量关系研究

目的探究箭叶淫羊藿Epimedium sagittatum(Sieb.et Zucc.)Maxim.叶片不同发育时期黄酮类成分变化与元素积累的规律,揭示其黄酮类成分的形成机制。方法以箭叶淫羊藿叶片为研究对象,将其按照不同发育时期分为t1~t6共6个时期,高效液相色谱(HPLC)测定4种黄酮类成分含量,紫外分光光度法测定总黄酮醇苷含量;实时荧光定量法(RT-qPCR)测定17个与黄酮类成分合成关键酶基因的相对表达量;电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定25种元素含量;皮尔逊(Pearson)相关性分析黄酮类成分与元素的关系。结果淫羊藿苷含量呈现先上升后下降的趋势,朝霍定A、朝霍定B、朝霍定C、总黄酮醇苷的含量显著降低,但是5种黄酮类成分总量却显著升高,在t4和t5时期大量积累。大部分黄酮类成分合成关键酶基因表达量在t4和t5时期显著上调,在t2时期显著下调,不同基因的表达量随叶片发育而变化;叶片中元素Mg、Ca、Ti、Mn、Fe、Sr和Ba元素含量显著升高,元素K和Co含量显著降低;元素P、K、V、Cu的含量与箭叶淫羊藿中黄酮类成分含量呈显著性正相关。结论箭叶淫羊藿叶片中黄酮类成分形成过程受到叶片发育程度及相关基因表达的影响,黄酮类成分在叶片发育后期大量积累。

微生物发酵对刺五加叶黄酮类成分生物合成的影响

旨在高效生产刺五加叶中黄酮类成分。分别采用乳酸杆菌及酿酒酵母发酵刺五加叶,以金丝桃苷及槲皮素为指标,采用HPLC法,观察其发酵后含量的动态变化,并在此基础上,对刺五加叶发酵样品中黄酮成分采用D101大孔树脂柱及硅胶柱色谱进行分离。结果表明,经乳酸杆菌发酵后,刺五加叶中金丝桃苷含量显著降低,由4.00±0.15(mg/g)降低到1.71±0.09(mg/g),槲皮素含量显著增加,由0.03±0.33(mg/g)增加到0.437±0.15(mg/g);经酿酒酵母发酵后,其金丝桃苷及槲皮素含量均显著增加,金丝桃苷含量由4.00±0.15(mg/g)增加到5.97±0.48(mg/g),槲皮素含量由由0.03±0.33(mg/g)增加到1.40±0.65(mg/g)。经柱色谱分离,从刺五加叶发酵样品中分离得到了金丝桃苷及槲皮素。研究结果可为采用酿酒酵母发酵刺五加叶定向高产金丝桃苷及槲皮素及探讨黄酮类成分生物合成机制提供参考。

高效液相色谱法同时测定橘红颗粒中3种黄酮类成分含量

目的建立同时测定橘红颗粒中芸香柚皮苷、柚皮苷和橙皮苷含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Agilent 5TC-C18(2)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%醋酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为280 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。结果芸香柚皮苷、柚皮苷和橙皮苷进样量分别在0.0348~0.348μg(r=0.9995)、1.047~10.47μg(r=0.9994)、0.1859~1.859μg(r=0.9997)范围内与峰面积线性关系良好;精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均不大于2.0%;平均加样回收率分别为98.24%,96.29%,97.83%,RSD分别为1.16%,1.08%,2.34%(n=6)。结论所建立的方法操作简便、重复性好、结果准确,可用于同时测定橘红颗粒中上述3种黄酮类成分的含量。

响应面法优化黄芩茎叶黄酮类成分提取工艺及其含量测定

采用单因素和响应面试验考察乙醇浓度、料液比、提取时间和提取温度对黄芩茎叶中黄酮成分提取量的影响;在此基础上,采用HPLC法测定了17个黄芩茎叶中黄酮成分的含量。结果表明,黄芩茎叶中黄酮成分的最佳提取工艺为乙醇浓度55%、料液比1∶50、提取时间60 min、提取温度50℃,应用最佳提取工艺黄酮成分提取量为24.43 mg/g;不同产地黄芩茎叶中黄酮成分的含量存在差异,含量范围为15.839~26.044 mg/g。响应面法优化黄芩茎叶中黄酮成分的提取工艺稳定、准确可靠,所建立的黄酮成分含量测定方法稳定可靠,可为黄芩茎叶的质量评价及深度开发研究提供参考。

高效液相色谱法同时测定清热感冒颗粒中的6种黄酮类成分

目的 建立高效液相色谱法同时检测清热感冒颗粒中6种黄酮类成分的含量。方法 采用Agilent TC-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;以0.4%磷酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为360 nm,柱温为30℃。结果 6种黄酮类成分在各自相应浓度范围内与峰面积呈现良好的线性关系(r≥0.9997),加样回收率为95.4%~101.1%之间,相对标准偏差(RSD)≤3.01%。结论 该方法操作简单、准确可靠,可用于清热感冒颗粒中6种黄酮类成分的含量测定,并为清热感冒颗粒质量评价提供参考。

淫羊藿药材中黄酮类成分提取工艺优选

目的优选淫羊藿药材中黄酮类成分提取工艺。方法采用高效液相色谱法测定淫羊藿药材中朝藿定A1、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅰ含量。在单因素试验基础上,以提取溶剂、液料比、提取时间、提取次数为考察因素,待测成分提取总量为考察指标,采用响应面法优选淫羊藿药材中黄酮类成分的提取工艺。结果最佳提取工艺为液料比100(mL/g)时,以50%乙醇提取2次,每次40 min。验证试验结果显示,待测成分提取总量分别为3.16%,3.08%,3.03%,与预测值(3.12%)相当。结论该提取工艺合理可行,可为淫羊藿药材的进一步研发提供参考。

一测多评法测定止血化痔合剂中6种黄酮类成分的含量

目的建立一种一测多评法(QAMS)同时测定止血化痔合剂中6种黄酮类成分的含量。方法采用高效液相色谱法,以黄芩苷为内参物,建立黄芩苷与芦丁、甘草苷、槲皮素、黄芩素、汉黄芩素的相对校正因子(f),再通过f计算出止血化痔合剂中6种黄酮类成分的含量。同时采用外标法(ESM)测定6种黄酮类成分的含量,并比较二者的差异,以验证一测多评法的准确性和可行性。结果芦丁、甘草苷、黄芩苷、槲皮素、黄芩素、汉黄芩素在一定范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系(r>0.997);精密度、稳定性、重复性均符合方法学要求;平均加样回收率范围为95.72%~100.43%,RSD范围为1.97%~3.22%。芦丁、甘草苷、槲皮素、黄芩素、汉黄芩素的相对校正因子分别为6.426、3.939、3.215、41.140、0.555,且重现性良好。一测多评法的计算结果与外标法测定结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论以黄芩苷为内参物建立的一测多评法,同时测定止血化痔合剂中6种黄酮类成分的含量,方法操作简便,准确可靠,可用于止血化痔合剂的质量评价。

HPLC法同时测定炮制前后鸡内金中6种黄酮类成分

目的建立HPLC法同时测定炮制前后鸡内金中大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素、染料木素的含量。方法该药物的分析采用Spursil AQ C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长254 nm。结果6种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9990),平均加样回收率95.44%~104.10%,RSD 2.41%~4.01%。鸡内金生品和炮制品中大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素、染料木素的平均含量分别为1.10、0.22、1.33、0.27、0.77、0.62 mg/g和0.94、0.20、1.12、0.77、2.32、1.75 mg/g。结论该方法稳定可靠,可用于鸡内金生品和炮制品的质量控制。

UHPLC结合化学计量学分析不同采收期茶枝柑青皮中黄酮类成分

目的比较不同采收期茶枝柑青皮中黄酮类成分的差异,为青皮的质量评价提供依据。方法采用UHPLC法建立指纹图谱,对不同采收期的青皮进行相似度评价,同时测定并比较不同采收期样品中芸香柚皮苷、橙皮苷、香蜂草苷、甜橙黄酮、川陈皮素、3',4',3,5,6,7,8-七甲氧基黄酮、5-去甲川陈皮素和桔皮素的含量。结果建立了青皮的UHPLC指纹图谱,共指认了8个特征峰,7~9月采收的青皮相似度大于0.97,5月份与其他月份的相似度均小于0.8。8个黄酮类成分的总量随着生长期的增长而减少,5月采收的个青皮中芸香柚皮苷、橙皮苷、香蜂草苷含量明显高于其他月份,而3',4',3,5,6,7,8-七甲氧基黄酮含量明显低于其他月份;甜橙黄酮、川陈皮素、5-去甲川陈皮素、桔皮素的含量在不同采收期变化不明显。聚类分析与主成分分析均可将5月采收的样品与7~9月采收的样品分开。结论不同采收期的茶枝柑青皮中黄酮类成分的含量差异较大,本文可为青皮药材的质量控制提供依据。

UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS法分析光果甘草地上部分黄酮类成分

[目的]对光果甘草地上部分(茎、叶)的黄酮类化学成分进行分析,为进一步开发利用光果甘草地上部分及阐明其药效物质基础提供科学依据。[方法]将光果甘草地上部分醇提样品水沉,分为水溶性、脂溶性部位;采用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱联用(UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS)法检测样品,使用Xcalibur软件处理分析数据,将得到的成分分子质量、多级图谱碎片信息结合文献、数据库及标准品进行指认。[结果]从光果甘草地上部分共检测出100个黄酮类成分,有97种在光果甘草地上部分被首次发现;其中水溶性样品检测出61种,脂溶性样品检测出69种。[结论]通过UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS法,对光果甘草地上部分建立了快速、准确的定性方法,同时证实黄酮类成分含量丰富,为进一步开发利用提供依据。

黄酮类化合物的含N杂环共晶形成物研究概况

黄酮类化合物是一类受到广泛的研究天然化合物,具有十分广泛的药理作用,但是水溶性差,生物利用度低等缺点限制了其在临床的应用。药物共晶是指活性药物成分(APIs)在氢键等非共价键的作用下,与共晶形成物(CCFs)生成的新型晶体,并可在不改变化学结构的前提下改善药物的理化性质。由于含N杂环中的N原子可以参与氢键的生成,故本文将以N杂环结构为依据,对近年来参与黄酮共晶的CCFs进行综述,为黄酮共晶的进一步研究提供参考。

不同产地文冠果种仁黄酮类成分的LC-MS/MS检测

为考察不同产地文冠果种仁黄酮类成分的差异,以山东潍坊的60份和辽宁大连的58份文冠果种仁为原料,采用LC-MS/MS法检测其黄酮类成分及含量,并对两地文冠果种仁黄酮类成分含量的差异进行了对比分析。结果表明:118份文冠果种仁中均检测出5种黄酮类成分,其中芦丁含量为1.422~40.704μg/g,表没食子儿茶素含量为2.513~6.406μg/g,没食子儿茶素没食子酸酯含量为1.994~4.574μg/g,二氢槲皮素含量为1.102~4.452μg/g,没食子儿茶素含量为0.806~4.057μg/g;两地文冠果种仁黄酮类成分含量大小依次为芦丁>表没食子儿茶素>没食子儿茶素没食子酸酯>二氢槲皮素>没食子儿茶素;山东潍坊不同样树种仁中黄酮类成分总含量介于10.518~25.445μg/g之间,样树WF927的黄酮类成分总含量最高;辽宁大连不同样树种仁中黄酮类成分的总含量介于8.347~52.087μg/g之间,样树DL392的黄酮类成分总含量最高;两地文冠果种仁黄酮类成分含量间差异显著,其中辽宁大连文冠果种仁中黄酮类成分总含量平均值(19.491μg/g)极显著高于山东潍坊的(16.320μg/g);两地118份文冠果种仁中,黄酮类成分总含量最高的为DL392(52.087μg/g)、DL395(43.711μg/g)和DL347(40.481μg/g)。

一测多评法同时测定壮药倒地铃中6种黄酮类成分

目的:建立倒地铃Cardiospermum halicacabum L.中异槲皮苷、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷、槲皮苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷、芹菜素、金圣草黄素6种黄酮类成分的一测多评方法。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法,以芹菜素为内参物,建立芹菜素与异槲皮苷、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷、槲皮苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷、金圣草黄素的相对校正因子,并考察相对校正因子的耐用性和重现性。比较外标法和一测多评法对倒地铃中6种成分的测定结果。结果:各相对校正因子重复性良好,一测多评法测定结果与外标法测定结果无显著性差异。结论:采用一测多评法同时测定倒地铃中6种黄酮类成分,方法准确可靠,可作为倒地铃药材的质量控制手段之一。

黄酮类成分抗肺纤维化的作用机制研究进展

肺纤维化是以成纤维细胞增殖及大量细胞外基质聚集并伴炎症损伤、组织结构破坏为特征的一大类肺疾病的终末期表现。研究表明,黄酮类成分具有抗肺纤维化的作用,其中二氢杨梅素、桑色素、漆黄素等可通过抑制成纤维细胞分化,阿尔泰金莲花总黄酮、橘皮苷、蒙花苷等可通过发挥抗炎作用,黄芩总黄酮、黄芩苷、白杨素等可通过抑制上皮-间充质转化,荔枝核总黄酮、地奥司明、水飞蓟宾等可通过抑制氧化应激,槲皮素、黄芩苷、芹菜素等可通过调控自噬,镰形棘豆总黄酮、毛蕊异黄酮、二氢槲皮素等可通过调控细胞凋亡过程,柚皮素、黄芩苷、香草兰总黄酮等可通过抑制细胞焦亡等多种途径,发挥抗肺纤维化的作用。

不同产地文冠果叶片黄酮类成分差异

【目的】比较分析不同产地文冠果叶片黄酮类成分的差异,为挖掘黄酮类成分含量高的优良单株及茶用型文冠果种质资源提供科学参考。【方法】建立了液相色谱串联质谱法检测文冠果叶片黄酮类成分的技术体系,并利用方差分析、相关分析和主成分分析等方法对来自山东潍坊、宁夏吴忠和辽宁大连的共495株文冠果样树叶片的10种黄酮类成分进行了比较分析。【结果】山东潍坊文冠果叶片黄酮类成分总含量为682.135~2935.579μg·g^(-1);宁夏吴忠文冠果叶片黄酮类成分总含量为267.897~4899.386μg·g^(-1);辽宁大连文冠果叶片黄酮类成分总含量为703.787~2878.085μg·g^(-1)。三产地黄酮类成分总含量高低顺序为:山东潍坊(1451.666μg·g^(-1))>辽宁大连(1425.822μg·g^(-1))>宁夏吴忠(1235.374μg·g^(-1))。不同产地文冠果叶片各黄酮类成分的含量及总含量均存在显著差异(P<0.05),其中,山东潍坊文冠果叶片中芦丁、槲皮素、二氢槲皮素、木犀草素、柚皮素和没食子儿茶素没食子酸酯的含量较其他两地高;而宁夏吴忠文冠果叶片中没食子儿茶素的含量在三地中最高;辽宁大连文冠果叶片中表没食子儿茶素、山柰酚和二氢杨梅素的含量较其他两地高。山东潍坊、宁夏吴忠和辽宁大连三产地中没食子儿茶素没食子酸酯变异系数最小,分别为18.016%、16.444%和10.672%,说明三产地文冠果叶片没食子儿茶素没食子酸酯含量相对稳定。而三产地中黄酮类成分变异系数较大的分别为山东潍坊木犀草素114.702%、宁夏吴忠柚皮素98.773%和辽宁大连柚皮素78.675%,这为高木犀草素和高柚皮素品种的选育提供了潜力。三产地文冠果叶片黄酮类成分的主成分分别为没食子儿茶素、表没食子儿茶素、芦丁、槲皮素和二氢槲皮素。【结论】在三产地的所有样树中宁夏吴忠的No.333(4899.386μg·g^(-1))、No.103(3678.427μg·g^(-1))、No.266(3489.593μg·g^(-1))和No.148(3394.931μg·g^(-1))黄酮类成分总含量最高,可培养为茶用型文冠果品种。