银杏黄酮苷元减轻多柔比星心脏毒性的作用机制

目的探究银杏黄酮苷元(GA)减轻多柔比星(DOX)心脏毒性的潜在作用机制。方法将雄性ICR小鼠随机分为对照组(CON组)、模型组(DOX组)和GA+DOX组(GDOX组),每组12只。DOX组小鼠隔天尾静脉注射DOX药液3mg/kg,GDOX组小鼠每天灌胃GA混悬液100mg/kg+隔天尾静脉注射DOX药液3mg/kg,连续15d。给药结束后,检测各组小鼠血清中天冬氨酸转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)水平。基于代谢组学方法,采用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱串联质谱技术,在主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA)的基础上,以变量重要性投影值≥1、峰面积差异倍数>1且P<0.05为标准筛选差异代谢物(DEMs),并基于HMDB、PubChem等数据库进行生物学分析。结果与CON组比较,DOX组小鼠血清中AST、CK、CK-MB、LDH水平均显著升高(P<0.05);与DOX组比较,GDOX组小鼠血清中上述指标(CK-MB除外)水平均显著降低(P<0.05)。PCA、OPLS-DA结果均显示,CON组、DOX组、GDOX组小鼠心脏组织样品均能完全分离。经数据库匹配后,鉴定出37个共有DEMs,其中DOX组显著上调而GDOX组显著下调的DEMs有17个,DOX组显著下调而GDOX组显著上调的DEMs有8个;涉及通路包括不饱和脂肪酸的生物合成、花生四烯酸代谢、亚油酸代谢、牛磺酸和次牛磺酸代谢,关键代谢物包括二十二碳六烯酸、花生四烯酸、磷脂酰胆碱(16∶0/18∶3)和牛磺酸。结论GA可能通过作用于二十二碳六烯酸、花生四烯酸等关键代谢物来调节不饱和脂肪酸的生物合成、花生四烯酸代谢等代谢途径,进而减轻DOX的心脏毒性。

异黄酮苷元滴丸和片剂在大鼠体内的相对生物利用度研究

目的研究异黄酮苷元滴丸和片剂的药动学及相对生物利用度。方法以SD大鼠为实验动物,采用高效液相色谱法测定异黄酮苷元滴丸和片剂单剂量灌胃给药后大鼠的血药浓度变化。用3P97软件进行药代动力学数据处理,计算分析药代动力学参数和相对生物利用度。结果异黄酮苷元滴丸:AUC为46.30μg.min.mL-1,cmax为0.89μg.mL-1,tmax为18.03 min;片剂:AUC为36.01μg.min.mL-1,cmax为0.41μg.mL-1,tmax为31.43 min,滴丸相对于片剂的相对生物利用度为128%。结论异黄酮苷元滴丸、片剂均符合一室模型,滴丸较片剂具有较高的生物利用度。本研究为异黄酮苷元滴丸研制提供了一定的依据。

沙棘叶黄酮糖苷生物转化黄酮苷元研究

沙棘叶中的黄酮类化合物主要以糖苷形式存在,现采用酶法水解糖苷中的糖基使其变成苷元,提高抗氧化活性。沙棘黄酮糖苷经过α-鼠李糖苷酶(1IU)、β-葡萄糖苷酶(2IU)、木聚糖酶(1.5IU)、纤维素酶(15IU)、果胶酶(0.5IU)、α-淀粉酶(2IU)组成的复合酶预处理后,黄酮糖苷转化率仅为0.23%,再用柚苷酶水解可获得高含量的黄酮苷元,转化率达85%以上,其中槲皮素占总黄酮苷元的23.31%,异鼠李素占35.11%,山奈酚占9.95%。沙棘黄酮苷元不易溶于水而溶于乙醇。

5种大孔吸附树脂对沙棘叶黄酮苷元的静态吸附/解吸附性能

以槲皮素、山奈酚和异鼠李素的静态吸附率/解吸附率为评价指标,考察了HPD600、YWD01G3、YWD01F、07C、AB-8 5种大孔吸附树脂对沙棘叶黄酮苷元的吸附/解吸附性能。实验结果表明:非极性树脂YWD01G3在吸附/解吸附方面显示出最佳的综合性能,对槲皮素、山奈酚、异鼠李素的平均吸附率和解吸附率分别为90.81%和59.51%。该实验为初步确定沙棘叶黄酮纯化用大孔树脂和进一步研究其动态吸附/解吸附提供了依据。该工作经中国科学院兰州查新咨询中心2006年3月28日出具的第2006033101号《科技查新报告》证实,未见相同文献报道。

HPLC／ESI-MS法鉴定半枝莲乙酸乙酯组分中黄酮苷元类化合物

利用正离子模式电喷雾质谱研究了包括正黄酮、异黄酮、二氢黄酮、异二氢黄酮和黄酮醇在内的5个黄酮亚类苷元的质谱断裂碎片,并得到了能够区别鉴定这5类黄酮苷元的特征碎片离子。其中,2个CO的连续丢失可以看作异黄酮的特征断裂,[0,4B-H2O+H]+是二氢黄酮的特征碎片离子,黄酮醇和异二氢黄酮则主要发生0,2键和2,3键的断裂,分别形成特征的0,2A+和2,3B+碎片离子。在此基础上,利用高效液相色谱与电喷雾质谱联用技术对半枝莲乙酸乙酯组分中的化合物进行研究,确定了异红花素(isocarthamidin)、印黄芩素(scutellarin)、木樨草素(luteolin)、柚皮素(naringenin)、4’-羟基汉黄芩素(4-’hydroxy-wogonin)和芹菜素(apigenin)6个黄酮苷元,并结合紫外光谱信息和质谱碎片信息,对另外6个黄酮苷元类化合物进行初步的结构推断。

不同季节元宝枫叶中的三种黄酮苷元的含量测定

目的:利用反相高效液相色谱法测定不同季节元宝枫中槲皮素、山柰酚和异鼠李素含量,为元宝枫药用质量标准的建立奠定基础。方法:采用DiamonsilTM(钻石) C18色谱柱(4. 6mm×250mm, 5μm);流动相甲醇水(含1 冰醋酸) (60∶40);流速1. 0mL·min-1;检测波长360nm。结果:通过对样品的分析,证明其中含有槲皮素、山柰酚和异鼠李素三种黄酮苷元。并对不同季节样品的测定得到了满意的结果。槲皮素平均回收率100. 4 ,RSD=1. 61 (n=5);山柰酚平均回收率为102. 5 ,RSD=1. 77 (n=5);异鼠李素平均回收率为102. 3 ,RSD=1. 63 (n=5)。其中含有的山柰酚和异鼠李素为首次报道。结论:所建立的方法简便、准确、可靠,可作为元宝枫药用质量控制方法。

发酵处理对毛豆异黄酮苷元含量及其乙醇提取物抗氧化活性的影响

【目的】测定毛豆、发酵处理毛豆和大豆中的大豆苷元、黄豆黄素与染料木素3种异黄酮苷元以及多酚类化合物的总含量,并分析其乙醇提取物的抗氧化活性。【方法】利用回流法酸水解样品中的大豆异黄酮,通过高效液相色谱法测定大豆苷元、黄豆黄素和染料木素的含量;利用福林酚法测定3种样品中的多酚类物质总含量,并通过测定清除DPPH自由基、ABTS自由基和还原力比较样品乙醇提取物的抗氧化活性。【结果】毛豆、发酵处理毛豆和大豆的大豆苷元含量分别为255.96,286.04和358.08μg/g,黄豆黄素含量分别为57.96,65.51和59.73μg/g,染料木素含量分别为12.88,26.40和4.62μg/g。发酵处理毛豆中染料木素含量增加明显,分别为毛豆和大豆染料木素含量的2.05和5.71倍。发酵处理毛豆、大豆、毛豆中的多酚类化合物总含量分别为(3.31±0.138)mg/g、(1.148±0.028)mg/g和(2.69±0.011)mg/g,发酵处理毛豆的多酚类化合物含量约是大豆和毛豆的2.9和1.2倍。抗氧化活性比较表明,发酵处理毛豆清除ABTS自由基与DPPH自由基的能力优于大豆和毛豆。发酵处理毛豆、大豆和毛豆还原力大小依次表现为发酵处理毛豆>毛豆>大豆。【结论】经过发酵处理后,毛豆中的3种异黄酮含量均有所增加,但以染料木素的增加最为明显;发酵处理毛豆中多酚类化合物总含量升高,自由基清除活性增强。

杜仲叶黄酮苷元水解及富集纯化工艺研究

以杜仲叶提取物为原料,采用酸水解的方法制备杜仲叶黄酮苷元,通过单因素及正交试验优化杜仲叶黄酮苷元的水解条件;并研究了聚酰胺两步法富集黄酮苷元的工艺条件。结果表明:当料液比为2∶1(mg/m L)时,杜仲叶黄酮苷元水解的最佳工艺参数为:水解温度80℃,水解时间3 h,盐酸浓度6 mol/L,黄酮苷元的含量可达到2.512%。水解样品经过一次聚酰胺静态吸附,黄酮苷元的纯度可达12.87%,再经聚酰胺二次富集,杜仲黄酮苷元纯度可达63.19%。

β-葡萄糖苷酶法与盐酸法水解银杏黄酮制备黄酮苷元的比较

采用盐酸和β-葡萄糖苷酶分别水解银杏叶提取物(GBE)制备银杏黄酮苷元。通过正交试验得出了酸水解的最佳工艺参数为:温度70℃、时间4h、盐酸浓度4mol/L、甲醇浓度为80%、固液比(mg/ml)2:1;酶水解的最佳工艺参数为:温度40℃、酶浓度5×10-3mg/ml、pH5.0下水解6h。由HPLC图谱比较发现,经酸解的产物内有效成分只有黄酮苷元,而经酶解的产物内还保留了银杏内酯等活性成分,有利于保留银杏叶提取物的综合生物活性。

银杏黄酮苷元的平衡溶解度和表观油水分配系数的测定

目的测定银杏黄酮苷元中3种黄酮苷元的平衡溶解度和表观油水分配系数。方法采用饱和溶液法和摇瓶法,分别测定银杏黄酮苷元的平衡溶解度和表观油水分配系数,采用高效液相色谱法测定样品溶液的浓度。结果 25℃时,3种黄酮苷元的平衡溶解度均较小,其中槲皮素和山柰素在水中的平衡溶解度均为最大值,三者平衡溶解度分别为17.16,32.48和1.13μg.ml-1,槲皮素和山柰素的平衡溶解度受溶剂pH影响较大,而异鼠李素的平衡溶解度受溶剂pH影响较小;3种黄酮苷元在不同的pH溶剂中各自的Log P差别不大,pH对3种黄酮苷元的油水分配系数影响不显著,其中槲皮素和山柰素的油水分配系数均较大。结论银杏黄酮苷元为典型的疏水性药物。

藏药镰形棘豆总黄酮苷元抑菌活性的研究(英文)

镰形棘豆是中国应用的传统藏药，由于该植物的很多生物活性与其黄酮类有关，本研究提取了镰形棘豆中的总黄酮苷元，选择了9种病原菌对其抑菌活性进行了体外抑菌试验的评估。试验结果表明，镰形棘豆分离得到的总黄酮苷元对试验所用的病原菌均有较强的抑菌作用，其中对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为MIC=0．38mg／mL，其他各菌的MIC和MBC范围在0．75～3mg／mL之间。通过此研究可为镰形棘豆黄酮类活性组分的进一步研究提供依据。

大孔树脂分离纯化银杏黄酮苷元的研究

以银杏提取物的酶水解液为实验材料,研究大孔吸附树脂分离纯化其中的银杏黄酮苷元的工艺。通过静态吸附-解吸和吸附动力学实验,从3种大孔吸附树脂中筛选出非极性YWD07a为最适合分离纯化银杏黄酮苷元的树脂。YWD07a树脂吸附分离银杏黄酮苷元的最佳工艺条件为:吸附:银杏黄酮苷元的浓度3.26 mg/mL,pH 5.0,流速2 BV/h;解吸:洗脱体积6BV,流速3.0 BV/h,乙醇浓度70%。在最优条件下得到的银杏黄酮苷元产品中银杏黄酮苷元含量由18.5%提高到80.5%,回收率为73.6%。

山核桃叶总黄酮苷元抗炎镇痛作用的研究

[目的]研究山核桃叶总黄酮苷元的抗炎镇痛作用。[方法]将60只小鼠随机分为空白组,溶媒对照组,阴性组,山核桃叶总黄酮低、中、高剂量组。采用小鼠扭体实验和小鼠福尔马林实验研究山核桃叶总黄酮苷元的镇痛作用,通过小鼠耳廓肿胀实验和棉球肉芽肿胀实验研究山核桃叶总黄酮苷元的抗炎作用。[结果]山核桃叶总黄酮苷元中剂量组、高剂量组能明显减少醋酸致小鼠扭体次数;对福尔马林引起的小鼠疼痛也有明显的抑制作用;高剂量组对二甲苯致小鼠耳廓肿胀、棉球致小鼠肉芽肿胀均有明显的抑制作用。[结论]山核桃叶总黄酮苷元具有明显的抗炎镇痛作用。

蕨菜黄酮苷元的组成及含量测定研究

以80%乙醇浸提经乙醚脱脂预处理的干蕨菜粉,减压回收乙醇得浓缩液。浓缩液以8%硫酸沸水浴水解3h后,加入20%NaOH中和至弱酸性,过滤,滤渣以三氯甲烷索氏提取获总蕨菜黄酮苷元。TLC法检测总黄酮苷元的组成,HPLC法测定其主要苷元的含量。结果表明,通过酸水解获得总蕨菜黄酮苷元,其主要成分为山奈酚,含量约占蕨菜干重的1.9%。

喷雾干燥法制备黄酮苷元微胶囊的研究

以乳清蛋白和麦芽糊精构成复合型壁材,采用喷雾干燥方法制备黄酮苷元微胶囊。壁材组成为乳清蛋白∶麦芽糊精为2∶7(W∶W),单甘酯浓度0.3%,海藻酸钠浓度0.3%。芯材黄酮苷元首先溶解于无水乙醇,最适宜的芯材添加量为芯壁比1∶9(W∶W)。微胶囊化工艺参数为乳化均质压力40MPa,时间20min,喷雾干燥进风温度200℃,出风温度90℃。在最优条件下,微胶囊包埋率为91%。黄酮苷元微胶囊的扫描电镜结果显示,该微胶囊化产品具有较好的包埋效果。

银杏黄酮苷元对氧化型低密度脂蛋白诱导的人主动脉内皮细胞氧化损伤的影响

目的观察银杏黄酮苷元(Ginkgo flavone aglycone,GA)对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-den-sity lipoprotein,ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)氧化应激损伤的保护作用及其机制。方法体外培养HAECs,分为6组,即空白对照组、ox-LDL组、VitE组以及GA30、60、90mg/L组。除空白对照组外,其余5组均加入ox-LDL150mg/L复制氧化损伤模型;GA30、60、90mg/L组分别给予相应剂量GA干预;VitE组给予VitE200μmol/L干预。采用MTT法检测细胞存活率;CM-H2DCFDA荧光探针测定细胞内活性氧(ROS)含量;酶联免疫吸附法检测NADPH氧化酶含量;硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)水平;Griess reagent法测定一氧化氮(NO)含量;黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)的含量。结果与空白对照组(100.00%)比较,ox-LDL组(70.68%)细胞存活率明显降低(P<0.05);VitE组、GA30mg/L组、GA60mg/L组细胞存活率分别为88.95%、83.25%、94.93%,均明显高于ox-LDL组(P<0.05),以60mg/L GA作用更强。与空白对照组比较,ox-LDL组细胞内ROS、MDA及NADPH氧化酶水平增加,NO含量及SOD活性降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与ox-LDL组比较,GA30mg/L组、GA60mg/L组及VitE组细胞内ROS、MDA及NADPH氧化酶水平降低,NO含量及SOD活性增加,差异均有统计学意义(P<0.05),以60mg/L GA作用更强。结论 GA可明显抑制ox-LDL诱导的ROS合成,降低MDA水平,升高NO。其作用机制可能与SOD活性增加及NADPH氧化酶活性降低有关。

银杏叶提取物制取黄酮苷元的酶解工艺研究

研究了β-葡萄糖苷酶在银杏叶提取物制取黄酮苷元过程的酶解工艺:pH为银杏叶提取物的自然pH值,酶解温度为50℃,酶与底物比(E/S)为1/2000(g/g),底物浓度为5mg/mL,酶解时间6h,还原糖相对提高量达到92·31%。

微生物发酵产大豆异黄酮苷元的连续超声波提取工艺及其定量分析研究

选取浅玫瑰链霉菌、红色糖多孢菌及黑曲霉为发酵菌种,采用Plackett-Burman设计及正交试验,对影响微生物发酵法产大豆异黄酮苷元(染料木黄酮、黄豆苷元、黄豆黄素)的连续超声波提取工艺的主要试验因素进行系统优化。以浅玫瑰链霉菌为发酵菌种的实验结果表明:各主要试验因素对3种异黄酮苷元提取率影响程度大小为:抽提溶剂组分、超声波时间、淋洗液体积。而温度、溶剂流速两个因素与提取效率负相关。连续超声波作用时间及抽提溶剂组分为影响异黄酮苷元提取工艺的两个主要影响因素。当两因素的最优值分别为7min及70%时,总异黄酮苷元提取率为(98.7±1.23)%。通过固相萃取(SPE)可有效去除发酵提取液中杂质对HPLC定量分析的干扰,并使3种异黄酮苷元含量浓缩10倍以上,从而使HPLC方法的检测限达到10-3μg/mL,样品总分析时间小于10min,样品回收率为96.2%～103.4%,RSD值小于2.34%。上述结果表明,该方法可满足微生物发酵法产大豆异黄酮苷元的高效提取纯化及快速定量分析。

水解法提取大豆异黄酮苷元工艺研究

以大豆为原料,采用先酸水解、后碱水解的方法提取大豆异黄酮苷元,对碱水解工艺进行了研究.以单因素试验和L9(33)正交试验对大豆异黄酮苷元提取工艺进行了优化.结果表明:影响大豆异黄酮苷元提取率的因素从大到小依次为碱解温度、碱解时间、碱解pH值,最佳工艺条件为碱解温度50℃,碱解时间1 h,碱解pH值9.0,在此条件下大豆异黄酮苷元的提取率可达73.51%.

浙江不同产地山核桃叶主要黄酮苷元含量的比较研究

目的：测定和比较浙江不同产地山核桃叶中的主要黄酮苷元含量，为寻找黄酮苷元含量较高的山核桃叶提供了方向，将有利于山核桃叶的进一步开发利用。方法：采用反相高效液相色谱法（HPLC），以相应化合物最大吸收波长为检测波长，对不同产地山核桃叶中白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素的含量进行测定，并比较各个产地山核桃叶中白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素含量的差异。结果：白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素浓度分别在0．0025～0．025、0．0025—0．025、0．025～0．600和0．0125—0．250mg／mL范围内具有良好的线性关系。白杨素和球松素查尔酮以淳安县威坪镇汪川村山核桃叶最高，而小豆蔻明和球松素以浙江中医药大学滨江校区山核桃叶最高，临安市湍口镇凉溪村山核桃叶中白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素均最低。结论：浙江不同产地山核桃叶中主要黄酮苷元白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素含量具有较大的差异，根据需要选择不同产地的山核桃叶进行开发利用。