黄芩总黄酮部位对常见水产致病菌的体外抑制作用

为寻找水产养殖领域天然、安全的抗生素替代品,探索黄芩醇提物对水产致病菌抑制作用的总黄酮部位.采用大孔树脂分离和抑菌圈法确定黄芩抗菌的总黄酮部位,采用紫外分光光度法和HPLC法分别对其进行定量和定性分析,采用琼脂稀释法测定黄芩总黄酮部位对7种水产致病菌的MIC.研究结果表明,黄芩中的黄酮类成分主要富集在30%醇洗和70%醇洗部位,并表现出明显的抑菌活性,其总黄酮含量达75.2%.黄芩总黄酮部位对其中6种水产致病菌的10个菌株均表现出较强的抑制作用,其MIC在0.36~1.43 mg/mL之间.黄芩总黄酮部位具有较广谱的抗水产致病菌作用,在水产养殖业有着广泛的应用前景.

基于UPLC-Triple TOF MS/MS和网络药理学技术分析打箭菊总黄酮部位保肝活性成分及其潜在靶点研究

目的:研究打箭菊总黄酮部位的主要化学成分,以其总黄酮中的化学成分结合网络药理学方法预测其保肝作用的潜在靶点。方法:采用80%乙醇加热回流提取打箭菊药材,提取液过AB-8大孔树脂柱,以30%乙醇洗脱获得总黄酮部位,利用UPLC-Triple TOF MS/MS技术对打箭菊总黄酮部位进行检测,通过对照品、分子量和质谱裂解规律对打箭菊化学成分进行鉴定。通过Pubchem数据库、Swiss Target Prediction数据库和Cytoscape分析软件构建打箭菊总黄酮化学成分-靶点作用网络图。结果:从打箭菊总黄酮部位中鉴定18个主要的化学成分,其中12个化学成分通过串联质谱进行了结构推测,6个化学成分通过对照品得到确证。通过网络药理学研究预测出打箭菊保肝作用的5个潜在靶点。结论:UPLC-Triple TOF MS/MS技术可用于打箭菊总黄酮部位的化学成分鉴定,通过网络药理学研究可预测打箭菊保肝作用的潜在靶点,为深入阐释打箭菊保肝作用机制提供参考依据。

UPLC-Triple TOF MS/MS技术分析打箭菊总黄酮部位的化学成分

目的解析打箭菊总黄酮部位的主要药效物质基础。方法采用80%乙醇为溶剂加热回流提取打箭菊药材,提取液过AB-8大孔树脂经30%乙醇洗脱获得总黄酮部位,利用超高效液相质谱联用技术对打箭菊总黄酮部位进行检测,通过对照品、分子量和质谱裂解规律对未知成分进行指认。结果通过超高效液相色谱可将19个主要的化学成分较好的分离,其中6个通过对照品得到确证,13个通过串联质谱进行了结构推测。结论利用超高效液相质谱联用技术可以高效准确地确认中药提取物部位中主要的化学成分,可用于打箭菊总黄酮部位的化学成分鉴定。

DPPH-HPLC法研究金银花黄酮部位抗氧化效应动力学

目的:综合评价金银花黄酮部位吸收入血成分的体内动态变化过程。方法:以L-ascorbic acid为对照品,采用DPPH-HPLC法进行抗氧化效应动力学研究。结果:其抗氧化效应动力学参数为tmax 47.2 min;Cmax 154.6 ng/ml;t1/2 53.6 min;AUC(0-∞)5169.4 ng.min/ml;Cl 23.5 ml/min;Vd 548.8 ml。与多成分的血药浓度法研究结果相比有明显的相关性。结论:所得结果能够综合反映金银花黄酮部位吸收入血成分的体内动态变化过程,是对多成分的血药浓度法研究金银花黄酮部位药代动力学的一种有益补充。

石韦的抗病毒黄酮部位及有效化学成分

目的:探究石韦的黄酮部位的抗病毒效果,并分析其有效成分.方法:采用标准病毒株或临床分离病毒株进行活性检测,通过观察病毒致细胞病变效应的发生率,计算黄酮部分抑毒指数TI,评价其抗病毒活性,并用HPLC-MS分析有效成分.结果:体积分数为30%的乙醇洗脱的石韦黄酮部位对肠道EV-71病毒抑制效果最好,用HPLC-MS分析体积分数为30%的乙醇洗脱石韦总黄酮部位的15个成分,其中3个酚酸类成分,12个黄酮类成分.结论:石韦黄酮部位有显著的抗病毒效果,可能是一种潜在的具有开发性的抗病毒药物.

复方“前愈”总黄酮部位的分离纯化与含量测定

目的从中药复方"前愈"中提取分离总黄酮化学部位,建立总黄酮及淫羊藿苷的含量测定方法。方法采用溶剂法结合聚酰胺树脂柱层析法分离纯化总黄酮部位;应用紫外分光光度法和高效液相色谱法,分别测定分离提取液及纯化液中总黄酮及淫羊藿苷的含量。结果溶剂法提取分离所得总黄酮含量8.86%,淫羊藿苷含量为0.14%;纯化后总黄酮含量为28.36%,淫羊藿苷含量为3.19%。结论该分离纯化方法操作简便合理,可显著提高前愈复方中总黄酮及淫羊藿苷含量。

中华苦荬菜黄酮部位制备工艺及抗氧化活性研究

目的:优选中华苦荬菜黄酮部位的提取及大孔树脂的纯化工艺,考察中华苦荬菜黄酮部位抗氧化活性。方法:以木犀草苷提取率为评价指标,通过单因素试验及正交实验优选提取工艺。在此基础上,考察不同型号的大孔树脂,优选大孔树脂的纯化工艺。采用清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基试验对黄酮提取物进行抗氧化活性评价。结果:最佳提取工艺:12倍量的70%乙醇回流提取2次,每次1.5 h。最佳纯化工艺:HPD100型大孔吸附树脂,上样浓度0.48 mg·mL^-1,最大上样量5 BV,上样速率2 BV·h^-1,洗脱剂70%的乙醇,洗脱速率2 BV·h^-1,洗脱剂用量5 BV。中华苦荬菜醇提物经大孔树脂纯化后的出膏率为3.79%,纯化物中木犀草苷含量为7.04%。中华苦荬菜黄酮部位对DPPH自由基有较好的清除作用。结论:该制备工艺操作简便易行,适用于大规模生产。中华苦荬菜总黄酮具有良好的抗氧化活性。

辣蓼黄酮正丁醇部位对PRV感染3D4/2细胞氧化应激相关因子水平的影响

【目的】探究辣蓼黄酮正丁醇部位(N-butanol fraction of Polygonum hydropiper flavonoids,FNB)对猪伪狂犬病毒(Pseudoabies virus,PRV)体外感染猪肺泡巨噬细胞(3D4/2细胞)氧化应激相关因子的影响,旨在初步分析FNB的抗氧化效果。【方法】采用10-1至10-10浓度PRV体外感染猪肾细胞(PK15细胞),计算病毒半数组织培养感染剂量(TCID50);将3D4/2细胞分为BC组、DMSO组、PRV组、FNB 1、FNB2和FNB3组,BC组用DMEM培养液处理,其余各组用感染复数(multiplicity of infection,MOI)=0.1 RPV处理,孵育2 h后,PRV组添加DMEM培养液,DMSO组及FNB1、FNB2、FNB3组分别添加0.05%DMSO及12.5、25、50μg/mL FNB的DMEM培养液。培养4、8、12、24 h后,分别收取各组细胞培养液上清和细胞,通过试剂盒测定细胞培养液上清中一氧化氮(NO)的含量、细胞内活性氧(ROS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、髓过氧化物酶(MPO)的活性和丙二醛(MDA)的含量。【结果】PRV的TCID50为10-8.25/0.1 mL;与BC组相比,PRV组上清中NO水平在4、8 h时极显著降低(P<0.01),在12、24 h时极显著升高(P<0.01),细胞内ROS在4 h时显著降低(P<0.05),8~24 h时显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),iNOS和XOD活性在8~24 h时显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),MPO活性在4~24 h时显著升高(P<0.05),MDA含量在4 h时显著降低(P<0.05),12~24 h时显著升高(P<0.05)。与PRV组相比,FNB2组NO含量在4~8 h时显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),在12 h时显著降低(P<0.05),FNB3组在24 h时极显著升高(P<0.01);细胞内ROS水平在4 h时极显著升高(P<0.01),8~24 h时极显著降低(P<0.01);FNB1组iNOS活性在4 h时显著升高(P<0.05),3个FNB组iNOS活性在8~24 h时显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),MPO和XOD活性在4~24 h时显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01),MDA含量在4 h时升高,8 h时FNB2、FNB3组MDA含量显著降低(P<0.05),24 h时FNB1、FNB2组MDA含量显著降低(P<0.05)。【结论】FNB可以通过干预氧化应激相关因子的分泌调节细胞氧化应激水平,维持氧化与抗氧化的平衡,结果可为辣蓼黄酮正丁醇部位的开发应用提供理论依据。

LCMS-IT-TOF法快速分析薄荷黄酮部位的主要化学成分

目的快速分析鉴别薄荷黄酮部位的化学成分。方法采用高效液相色谱-离子阱-飞行时间质谱法(LCMS-IT-TOF)对薄荷黄酮部位化学成分进行分析,Sunfire C18色谱柱(4.6 mm×150mm,5μm),甲醇(A)-水(B)为流动相进行梯度洗脱,电喷雾离子源为质谱离子源,同时采用正、负离子检测模式,获得不同化合物的多级质谱数据。结果根据高分辨质谱结果和MS/MS碎片信息,结合对照品质谱信息及相关文献,共鉴定推断出12个黄酮类化合物,其中4个黄酮苷:芹菜素-7-O-芸香糖、香叶木苷、木犀草素-7-O-芸香糖、蒙花苷;6个黄酮苷元:5,6-二羟基-7,8,3',4'-四甲氧基黄酮、栀子黄素B、5,6-二羟基-7,8,4'-三甲氧基黄酮、刺槐素、5-羟基-6,7,8,3',4'-五甲氧基黄酮、香叶木素;1个黄酮醇苷:芦丁;1个二氢黄酮苷:橙皮苷。结论 LCMS-IT-TOF能快速有效地分析薄荷黄酮部位的化学成分,为其进一步研究提供物质基础。

陕产黄花油点草总黄酮部位纯化工艺研究

目的优选大孔吸附树脂纯化陕产黄花油点草总黄酮部位的最佳工艺。方法以紫外分光光度法测定总黄酮的量。采用每克树脂纯化转移总黄酮的量为指标,通过考察动态吸附-解吸附、静态吸附-解吸附过程,对AB-8、D-101、HPD-450、HPD-600、HPD-700大孔树脂进行了优选;再进一步考察提取药液质量浓度、洗脱剂用量、径高比、药液的pH值对树脂纯化工艺的影响,确定最佳工艺条件,并对优选工艺条件进行了验证试验。结果药液质量浓度为1.2 g/mL,径高比为1∶5,药液pH 6.47,生药材-树脂为1∶3,上样体积流量为1 BV/h,洗脱液为40%乙醇,洗脱体积流量为1 BV/h,洗脱体积为2 BV。结论该工艺科学合理,可有效实现总黄酮部位的富集。

土茯苓黄酮部位成分分析及指纹图谱研究

目的:分析土茯苓黄酮部位成分并建立指纹图谱。方法:采用超高液相-质谱仪联用技术(UPLC-UV-MS)分析土茯苓黄酮部位成分;Diamonsil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇(A)-1.5%冰醋酸(B)为流动相,流速0.8 mL.min-1,柱温30℃,检测波长280 nm,进样10μL,HPLC建立指纹图谱。结果:鉴定出土茯苓黄酮部位中16个成分,其中9个通过对照品确认;指纹图谱有24个共有峰,10批不同来源土茯苓的黄酮部位相似度>0.99。结论:土茯苓黄酮部位成分明确,HPLC指纹图谱重复性、精密度良好,专属性强,可用于土茯苓黄酮部位的质量控制,为深入研究土茯苓黄酮部位药效物质提供参考。

鸡血藤干、鲜品黄酮部位的高效液相指纹图谱比较

目的:建立鸡血藤黄酮部位的HPLC指纹图谱,通过比较同一产地鸡血藤干、鲜品药材的指纹图谱,考察两者化学成分种类和含量上的差异。方法:采用高效液相色谱法,DiamonsilC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,检测波长280 nm,检测时间80 min。结果:分别建立了干、鲜鸡血藤黄酮部位的HPLC指纹图谱共有模式,标定了11个共有指纹峰,并指认了4个共有峰,发现干、鲜品在成分和含量上均有差异。结论:该方法简便、准确,具有良好的重复性,可为鸡血藤化学成分深入研究及其加工利用提供科学依据。

基于2D-TLC与HPLC-IT-TOF-MS联用技术的雪菊黄酮部位化学成分分析

应用2D-TLC与HPLC-IT-TOF-MS对雪菊黄酮部位的主要成分进行研究,阐明雪菊黄酮部位的化学组成。采用2D-TLC对雪菊黄酮有效部位进行分离;并采用菲罗门Kinetex Evo C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.6μm),以甲醇-0.05%甲酸水为流动相梯度洗脱;采用ESI离子源,正离子与负离子模式下采集数据。通过对质谱数据分析,与相关文献对照,共指认了18个化合物,包括3个黄酮,1个黄酮醇,9个二氢黄酮,1个二氢黄酮醇,4个查耳酮。2D-TLC能够充分分离雪菊黄酮类成分,HPLC-IT-TOF-MS可以快速准确地分析雪菊黄酮部位的主要化学成分,研究结果为阐明雪菊的药效物质基础提供实验依据。

HPLC法测定黄芩总黄酮部位3种成分的含量

目的建立黄芩总黄酮部位3种成分黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素的HPLC含量测定方法。方法采用HPLC法,Waters-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水-磷酸(47:53: 0.2)为流动相,等度洗脱,流速0.6 ml/min,检测波长280 nm,柱温为室温(24℃)。结果黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素平均回收率分别为99.70%、100.06%和100.85%,RSD分别为2.47%、3.27%、2.66%。结论3批样品测定结果表明,该方法简便、准确,可用于黄芩总黄酮部位3种成分的含量测定。

基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS指纹图谱和多成分定量的不同产地辣木叶药材及其黄酮部位质量研究

目的 建立不同产地辣木Moringa oleifera叶药材和黄酮部位UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS指纹图谱和多成分定量方法,并进行化学计量学分析,为辣木叶药材和黄酮部位的质量控制提供参考。方法 采用UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS检测并结合“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012 A版)”建立15个不同批次辣木叶药材和黄酮部位(S1~S15)指纹图谱,并进行相似度评价和共有峰指认,测定3个黄酮类成分异牡荆素、异槲皮苷、紫云英苷含量。采用聚类分析(hierarchical clustering analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least-squares discrimination analysis,OPLS-DA)等化学计量学分析方法对15批不同产地辣木叶药材质量和黄酮部位进行评价。结果 15批不同产地辣木叶药材标定了17个共有峰,指认出其中14个共有峰;辣木叶黄酮部位标定和指认出10个共有峰。15批不同产地辣木叶和黄酮部位的相似度和HCA分析聚为4类,且HCA结果与相似度评价结果基本相一致;PCA、OPLS-DA分析聚为3类。15批药材中异牡荆素、异槲皮苷、紫云英苷的含量分别为0.06%~0.19%、0.27%~0.79%、0.08%~0.23%;黄酮部位中含量分别为0.53%~3.53%、6.49%~14.36%、2.05%~4.66%。结论 建立了专属性强、灵敏度高的不同产地辣木叶药材和辣木叶黄酮部位的定性定量方法,为辣木叶药材和辣木叶黄酮部位综合评价提供依据。

周氏克金岩方有效部位中黄酮皂苷的分离工艺研究

目的:对周氏克金岩方有效部位中黄酮皂苷类成分进行分离纯化工艺研究,为深入研究周氏克金岩方抗肺癌物质基础、开发新药奠定基础。方法:应用溶剂法分离,以黄酮、皂苷的含量为指标,采用正交设计优选提取物浓度、PH值、静置条件的最佳分离工艺条件。结果:有效部位提取物的浓度为0.5g.mL-1,PH=7,常温静置24h,黄酮和皂苷提取物的纯度分别为70.25%和71.32%;结论:用溶剂法分离周氏克金岩方有效部位中的黄酮皂苷部位,分离工艺简单,操作容易,能达到较好的分离效果。

玳玳果黄酮有效部位中柚皮苷含量的高效液相色谱测定

目的建立高效液相色谱法测定玳玳果黄酮有效部位中柚皮苷含量的方法。方法色谱柱为250-4 lichrocart C18柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(20∶80),流速为1.0 ml/min;检测波长为283 nm。结果柚皮苷浓度在0.008 91～0.089 10 mg/ml范围内呈良好的线性关系,平均回收率为99.7%,RSD为1.60%。结论所建立的方法精密度、稳定性及重复性良好,可用于玳玳果黄酮有效部位的质量控制。

沙蓬降糖总黄酮有效部位的化学成分

目的对沙蓬Agriophyllum squarrosum(L.)Moq.中具有降血糖作用的总黄酮有效部位的化学成分进行研究。方法按照总黄酮有效部位的制备工艺制备总黄酮,采用大孔吸附柱色谱、反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱以及半微量制备型高效液相色谱法,对总黄酮的化学成分进行分离,通过1H-NMR、13C-NMR等谱学数据对分离得到的化合物进行结构鉴定。结果从总黄酮有效部位中分离鉴定了8个单体化合物。其中,7个黄酮类化合物:槲皮素(quercetin,1)、木犀草素(luteolin,2)、银锻苷(tiliroside,3)、牡荆素-2″-O-鼠李糖苷(2″-O-rhamnosylvitexin,4)、芒果酚(mangiferin,5)、异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷(isorhamnetin 3-O-β-D-rutinoside,7)和芦丁(rutin,8)、以及1个三萜类化合物eupatoric acid(6)。结论化合物3、5和6为首次从藜科植物中分离得到,化合物1、2和4为首次从沙蓬属植物中分离得到。

鸡血藤木质部、韧皮部黄酮类成分比较及药效成分分布规律研究

目的:建立HPLC-ESI-MS法鉴定比较鸡血藤木质部、韧皮部中黄酮类成分;建立HPLC-PDA法同时测定鸡血藤木质部、韧皮部中5种黄酮类成分(儿茶素、表儿茶素、大豆苷、芒柄花苷、芒柄花素)的含量。方法:HPLCESI-MS法采用DiamonsilC_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm),流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B),梯度洗脱,流速0.7 m L/min,柱温:25℃。离子阱质谱,负离子模式扫描。结果:从鸡血藤木质部中检测到23种黄酮类成分,韧皮部中检测到21种黄酮类成分。鸡血藤木质部中5种黄酮类成分的含量高于韧皮部。结论:木质部的药效成分含量高于韧皮部,为鸡血藤的"辨状论质"提供理论数据。

粉色西番莲甲醇提取物中苯并黄酮部位对小鼠大麻素成瘾的治疗作用

<正> 除极少数抗抑郁药外,对大麻素(canna-binoid)的成瘾性和依赖性目前尚无特效治疗方法。作者研究了粉色西番莲 Passiflora in-carnata L.的苯并黄酮提取部位对小鼠大麻素(△~9-THC)依赖性的作用。Swiss 小鼠分为4组,每组10只。第1组为对照组,给以赋形剂;第2组给以10mg/